荆防止痒方调控KLF15抑制特应性皮炎中NLRP3介导角质形成细胞焦亡的作用机制

摘要

目的 探究荆防止痒方(Jingfang Zhiyang formula)通过Kruppel样因子15(KLF15)抑制NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)介导角质形成细胞焦亡缓解特应性皮炎(AD)的分子机制。方法 观察AD患者使用荆防止痒方后的皮损改善情况，检测患者血清中IL-18、IL-1β含量及LDH水平；Western blot检测皮损组织中NLRP3、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、半胱天冬酶-1(caspase-1)、裂解的N端Gasdermin D蛋白(GSDMD-N)、IL-18和IL-1β的表达。建立AD细胞模型，分为对照组、AD模型组及不同浓度荆防止痒方处理组，筛选最佳浓度；RT-qPCR和Western blot检测荆防止痒方治疗前后KLF15的表达水平，并观察敲降KLF15后对各组细胞中NLRP3介导的细胞焦亡通路的影响。结果 荆防止痒方能够改善AD患者的皮损情况，降低IL-1β、IL-18及LDH水平，抑制NLRP3、ASC、剪切的半胱天冬酶-1(cleaved-caspase-1)以及GSDMD-N的表达(P<0.05)。荆防止痒方浓度为1.0%时细胞活力最强，并可恢复AD患者皮损组织和细胞模型中KLF15的表达(P<0.05);而敲降KLF15后逆转了荆防止痒方对AD细胞模型中细胞焦亡的抑制作用(P<0.05)。结论 荆防止痒方可上调KLF15的表达，进而抑制角质形成细胞中NLRP3介导的细胞焦亡，最终缓解AD的发展。

关键词

特应性皮炎 / 细胞焦亡 / 荆防止痒方 / Kruppel样因子15 / NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3

基金资助

湖南省自然科学基金青年基金项目(2023JJ40493); 湖南省中医皮肤临床医学研究中心(2023SK4036); 2024年度湖南中医药大学校级国自然预研项目青年项目(2024XJYY14)