7种药剂对食用玫瑰叶螨的室内毒力及田间防治效果评价

Evaluation of Indoor Toxicity and Field Control Effects of Seven Insecticides against Edible Rose Mites

摘要

二斑叶螨（Tetrangchus urticae）和朱砂叶螨（Tetranychus cinnabarinus）是危害食用玫瑰的2种重要害螨，但是目前缺少关于食用玫瑰叶螨防治的农药产品登记。为筛选防治二斑叶螨和朱砂叶螨2种害螨的高效安全药剂，分别采用浸叶法和玻片浸渍法测定7种药剂对2种叶螨卵和雌成螨的致毒作用，并开展田间试验评价4种药剂对食用玫瑰的安全性和对2种叶螨的防治效果。室内毒力试验表明，腈吡螨酯、阿维菌素和联苯肼酯对2种害螨均具有较好的毒性，对二斑叶螨成螨和朱砂叶螨成螨的LC₅₀分别为9.068~26.590、2.390~6.107 mg/L，对二斑叶螨卵和朱砂叶螨卵的LC₅₀分别为1.705~16.798、0.846~7.948 mg/L；螺螨酯则对2种叶螨卵具有极好的致毒作用，对二斑叶螨卵和朱砂叶螨卵的LC₅₀分别为2.622、1.674 mg/L。田间试验结果表明，腈吡螨酯、阿维菌素、螺螨酯和哒螨灵等4种药剂对3个品种的食用玫瑰生产安全、无药害，腈吡螨酯、阿维菌素和螺螨酯对食用玫瑰2种叶螨防治效果优于常用药剂哒螨灵，可作为替代哒螨灵的药剂轮换使用。

Abstract

Tetrangchus urticae and Tetranychus cinnabarinus are two important mites that harm edible rose. Up to now, there is a lack of registered insecticides for controlling edible rose mites. To screen both efficient and secure pesticides for controlling edible rose mites, in this study, leaf-dip method and slide-dip method were used to test the toxicity of 7 insecticides against eggs and femal adults of T. urticae and T. cinnabarinus, respectively. Field experiments were also conducted to evaluate the safety of edible rose and control efficacy against the two kinds of mites of 4 insecticides. The toxicity results demonstrated that the toxicity of cyenopyrafen, abamectin, and bifenazate possessed excellent toxicity against the two kinds of mites, and the LC₅₀ value were 9.068~26.590 mg/L for T. urticae adults and 2.390~6.107 mg/L for T. cinnabarinus adults, and the LC₅₀ value for eggs were 1.705~16.798 mg/L and 0.846~7.948 mg/L, respectively. Spirocliclofen possessed excellent toxic effects on eggs of the two kinds of mites, with the LC₅₀ values of 2.622 mg/L for T. urticae eggs and 1.674 mg/L for T. cinnabarinus eggs. The results of the field experiments showed that the four insecticides including cyenopyrafen, abamectin, spirocliclofen, and pyridaben were safe for three edible rose varieties, and the control efficacy of the insecticides including cyenopyrafen, abamectin, and spirocliclofen against the two kinds of edible rose mites were better than that of pyridaben, and they could be applied as the insecticides replacing pyridaben.

关键词

食用玫瑰 / 叶螨 / 腈吡螨酯 / 浸叶法 / 玻片浸渍法 / 毒力 / 安全性 / 防治效果

Key words

edible rose / mites / cyenopyrafen / leaf-dip method / slide-dip method / toxicity / pesticide safety / control effects

玫瑰（Rosa rugosa）为蔷薇科蔷薇属多年生灌木，我国作为玫瑰原产地，具有超过2 000 a的种植历史，目前在全国各地均有种植^[1-2]。玫瑰不仅可以用于观赏和提取精油，并且因其富含多种氨基酸、微量元素也常被制作成食物和保健品^[3-5]。食用玫瑰在我国玫瑰产业中占有较大比重，种植面积广，且主要集中在山东平阴、甘肃苦水、云南安宁、北京妙峰山、新疆和田、陕西渭南和江苏铜山等地种植，对当地种植户增收致富具有重要意义^[6-8]。

近年来，国家对农产品安全问题高度重视，对农产品中的农药残留标准逐年提高。在食用玫瑰生产中，因不合理使用化学农药导致的农药残留问题是影响其产业发展的重要因素。目前，因针对食用玫瑰病虫害防控尚无规范化标准，生产上种植户多凭个人经验进行防控，致使用药选择错误及用药量加倍等问题出现，不仅不能有效防控病虫害，而且极易产生农药残留问题^[9]。叶螨是影响食用玫瑰安全生产的重要害螨，田间调查发现二斑叶螨Tetrangchus urticae和朱砂叶螨Tetranychus cinnabarinus是2种主要害螨种类^[10-11]，在田间经常混合发生，且发生盛期为5—7月；而食用玫瑰采花期集中于4月下旬至5月下旬，因此，叶螨的危害与食用玫瑰采花期存在时间重叠^[12]。针对叶螨的防治多依赖化学药剂，由于叶螨世代周期短、繁殖快、环境适应能力强等特点，不合理的化学防治使叶螨对多种化学药剂产生抗药性，如重庆潼南朱砂叶螨种群对联苯肼酯和哒螨灵产生了中等水平的抗性^[13]，江苏江宁二斑叶螨对联苯肼酯产生高水平抗性^[14]。并且不合理用药易引发农药残留问题^[15-17]。尤其当2种叶螨混合发生时，防治难度也增大，筛选高效、低毒环境友好的药剂至关重要。从中国农药信息网查询，尽管关于叶螨防治的药剂已有多种登记，但是尚没有防治食用玫瑰叶螨的农药产品登记。

本研究选取7种杀虫杀螨剂测定其对朱砂叶螨和二斑叶螨卵、雌成螨的室内毒力，并评价了4种药剂对食用玫瑰的安全性和对叶螨的田间防治效果，以期为食用玫瑰叶螨的防治提供参考。

1 材料和方法

1.1 供试材料

1.1.1 供试昆虫

朱砂叶螨和二斑叶螨种群于2019年5月采自平阴县玫瑰镇食用玫瑰种植区，在温度（25±1）℃，相对湿度70%，光照时间L∶D＝16 h∶8 h的养虫室内采用盆栽玫瑰继代饲养，建立实验室种群。

1.1.2 供试药剂

98%螺螨酯原药、98%联苯肼酯原药、96%螺虫乙酯原药；98%哒螨灵原药、98%虫螨腈原药、95%阿维菌素原药、95%腈吡螨酯；15%哒螨灵水乳剂、30%腈吡螨酯悬浮剂、1.8%阿维菌素乳油、240 g/L螺螨酯悬浮剂。以上原药和制剂均由山东省农药检定所提供。

1.2 试验方法

1.2.1 毒力测定

成螨毒力测定用NY/T 1154.11—2008 农药室内生物测定准则，采用玻片浸渍法。用丙酮配制95%腈吡螨酯原药、98%螺螨酯原药、98%联苯肼酯原药、98%哒螨灵原药、96%螺虫乙酯原药、98%虫螨腈原药、95%阿维菌素原药的母液（5 000 mg/L），用0.1%吐温80水溶液将母液稀释成5个系列浓度（二斑叶螨，腈吡螨酯：2.5、5、10、20、40 mg/L，螺螨酯：125、250、500、1 000、2 000 mg/L，联苯肼酯：2.5、5、10、20、40 mg/L，哒螨灵：25、50、100、200、400 mg/L，螺虫乙酯：62.5、125、250、500、1 000 mg/L，虫螨腈：15、30、60、120、240 mg/L，阿维菌素：5、10、20、40、80 mg/L；朱砂叶螨，腈吡螨酯：1.25、2.5、5、10、20 mg/L，螺螨酯：62.5、125、250、500、1 000 mg/L，联苯肼酯：0.625、1.25、2.5、5、10 mg/L，哒螨灵：6.25、12.5、25、50、100 mg/L，螺虫乙酯：25、50、100、200、400 mg/L，虫螨腈：3.75、7.5、15、30、60 mg/L，阿维菌素：1.25、2.5、5、10、20 mg/L）。每个玻片放置25头雌成螨（5头×5头），将带虫的玻片置于药液中浸渍5 s，取出后用吸水纸吸干多余药液，将玻片放置于倒扣于方形托盘中的培养皿上方，在托盘中铺有清水以防止其他叶螨进入玻片中影响试验。对照组用0.1%吐温80水溶液处理，每一处理重复4次。将所有玻片置于（25±1）℃培养，48 h后检查死、活螨数，计算并求出毒力回归式及LC₅₀，药剂相对毒力为某药剂的LC₅₀与毒力最小药剂的LC₅₀的比值。

卵：用丙酮配制95%腈吡螨酯原药、98%螺螨酯原药、98%联苯肼酯原药、98%哒螨灵原药、96%螺虫乙酯原药、98%虫螨腈原药、95%阿维菌素原药的母液（5 000 mg/L），用0.1%吐温80水溶液将母液稀释成5个梯度浓度（二斑叶螨，腈吡螨酯：0.5、1、2、4、8 mg/L，螺螨酯：0.5、1、2、4、8 mg/L，联苯肼酯：6.25、12.5、25、50、100 mg/L，哒螨灵：50、100、200、400、800 mg/L，螺虫乙酯：31.25、62.5、125、250、500 mg/L，虫螨腈：6.25、12.5、25、50、100 mg/L，阿维菌素：1.25、2.5、5、10、20 mg/L；朱砂叶螨，腈吡螨酯：0.25、0.5、1、2、4 mg/L，螺螨酯：0.25、0.5、1、2、4 mg/L，联苯肼酯：2.5、5、10、20、40 mg/L，哒螨灵：50、100、200、400、800 mg/L，螺虫乙酯：25、50、100、200、400 mg/L，虫螨腈：3.125、6.25、12.5、25、50 mg/L，阿维菌素：0.625、1.25、2.5、5、10 mg/L）。挑选带有新产叶螨卵的新鲜玫瑰叶片，去除多余的螨，将带卵的叶片在药液中浸渍10 s，取出晾干后，每个叶片上保留50粒卵。将叶片放入铺有凝固琼脂（12 g/L）的培养皿中，用保鲜膜封住。对照组用0.1%的吐温80水溶液处理，每一处理重复4次。将所有培养皿置于（25±1）℃培养，72 h后检查孵化卵数，计算并求出毒力回归式及LC₅₀。

1.2.2 安全性评价

按照《农药对作物安全性评价准则第1部分：杀菌剂和杀虫剂对作物安全性评价试验方法》，根据240 g/L螺螨酯悬浮剂、15%哒螨灵水乳剂、30%腈吡螨酯悬浮剂和1.8%阿维菌素乳油防治叶螨的田间药效登记剂量，设计成田间推荐最高剂量的1倍、2倍和4倍剂量的3个处理和1个空白对照。于2020年4月在平阴县玫瑰镇玫瑰种植园进行安全性试验，选择5年生重瓣、丰花和紫枝等3个常见玫瑰品种。用喷雾器将药液均匀喷布于玫瑰叶片上，每公顷用水量675 kg，以不施药的清水处理为对照，每个处理重复5株。试验前每株植株选择10个长势一致的枝条，距离顶端5 cm处标记，药后21 d测量枝条的长度和花苞数量，剪下标记处以上的枝条和鲜花称取鲜质量。

1.2.3 田间防效

试验于2020年5月在平阴县玫瑰镇玫瑰种植园进行，玫瑰品种为重瓣玫瑰，树龄8年。选用4种药剂2种剂量（15%哒螨灵水乳剂（600、900 g/L）、30%腈吡螨酯悬浮剂（225、300 g/L）、1.8%阿维菌素乳油（225、300 g/L）、240 g/L螺螨酯悬浮剂（225、300 g/L））进行试验，用喷雾器将药液均匀喷布于玫瑰叶片上，每公顷用水量675 kg。每处理设置3个重复，每小区5株玫瑰，每一株选有足够叶螨的玫瑰叶片10复叶。分别于施药前、施药后3 d和7 d记录各虫态叶螨数量，统计总叶螨量，计算药剂的防治效果。

螨口减退率=（药前螨口数-药后螨口数）/药前螨口数×100%（1）

校正防效=（处理区螨口减退率-对照区螨口减退率）/（1-对照区螨口减退率）×100%（2）

1.3 数据分析

数据处理和统计分析采用Excel 2013和SPSS 19.0软件。

2 结果与分析

2.1 7种药剂对食用玫瑰二斑叶螨卵的致毒作用

在7种供试药剂中，腈吡螨酯对二斑叶螨卵毒力最高，LC₅₀为1.705 mg/L；其次依次为螺螨酯和阿维菌素，LC₅₀分别为2.622、5.264 mg/L。联苯肼酯和虫螨腈对卵毒力也较高，LC₅₀分别为16.798、28.832 mg/L；螺虫乙酯和哒螨灵的毒力最低，LC₅₀分别为123.997、228.453 mg/L（表1）。

2.2 7种药剂对食用玫瑰二斑叶螨雌成螨的致毒作用

7种药剂对二斑叶螨雌成螨的致毒作用存在差异，其中联苯肼酯对二斑叶螨雌成螨毒力最高，LC₅₀为9.068 mg/L；其次为腈吡螨酯和阿维菌素，LC₅₀分别为12.326、26.590 mg/L；螺虫乙酯对二斑叶螨成螨毒力较低，LC₅₀为217.358 mg/L；螺螨酯对二斑叶螨成螨几乎没有致毒作用，LC₅₀为1 718.180 mg/L（表2）。

2.3 7种药剂对食用玫瑰朱砂叶螨卵的致毒作用

7种药剂对朱砂叶螨卵的致毒作用表明，除哒螨灵和螺虫乙酯外，其他4种药剂均有较好的杀卵活性，LC₅₀为0.846~10.262 mg/L，尤以腈吡螨酯毒性最突出，LC₅₀为0.846 mg/L，毒力倍数为哒螨灵的213.21倍；其次为螺螨酯，LC₅₀为1.674 mg/L，毒力倍数为哒螨灵的107.75倍；哒螨灵对朱砂叶螨卵的毒性最低，LC₅₀为180.373 mg/L（表3）。

2.4 7种药剂对食用玫瑰朱砂叶螨雌成螨的致毒作用

7种杀螨剂中对朱砂叶螨雌成螨毒性最高的是联苯肼酯，LC₅₀为2.390 mg/L，毒力倍数为螺螨酯的275.03倍；其次依次为腈吡螨酯和阿维菌素，LC₅₀分别为6.107、5.737 mg/L；螺螨酯则对成螨致毒作用最弱，LC₅₀为657.330 mg/L（表4）。

2.5 4种药剂对食用玫瑰生产安全性评价

采用腈吡螨酯、螺螨酯、阿维菌素和哒螨灵1~4倍剂量对重瓣玫瑰进行地上喷雾，药后21 d各药剂处理与对照相比，枝条长度、枝条鲜质量和花苞数量无显著差异（表5）。虽然240 g/L螺螨酯悬浮剂最高剂量（3 600 g/hm²）处理的鲜花质量最轻，为3.35 g/朵，但与对照（3.70 g/朵）相比，差异较小，因此，4种药剂对重瓣玫瑰较为安全。

从表6可以看出，采用腈吡螨酯、螺螨酯、阿维菌素和哒螨灵1~4倍剂量对丰花玫瑰进行地上喷雾，药后21 d各药剂处理与对照相比，枝条长度、枝条鲜质量及鲜花质量无显著差异。除15%哒螨灵水乳剂1 800 g/hm²外，其余药剂处理对丰花玫瑰花苞数量无明显影响，表明供试药剂对丰花玫瑰较安全。

采用腈吡螨酯、螺螨酯、阿维菌素和哒螨灵1~4倍剂量对紫枝玫瑰进行地上喷雾，药后21 d不同处理与对照相比，枝条长度、枝条鲜质量、花苞数量和鲜花质量无显著差异（表7）。说明供试药剂对紫枝玫瑰安全。

2.6 4种药剂对食用玫瑰叶螨的田间防治效果

田间药效试验结果（表8）表明，30%腈吡螨酯悬浮剂对叶螨防治的速效性和持效性在4种供试药剂中最为突出，300、225 g/hm²处理后3 d防效分别为88.06%和83.24%，处理后7 d防效分别为92.43%和86.42%，240 g/L螺螨酯悬浮剂对叶螨防效也较好，300 g/hm²药后3、7 d防效分别达81.97%和83.99%。1.8%阿维菌素乳油对叶螨防治的速效性较差，300 g/hm²药后3 d防效仅为41.71%，但是持效性较好，药后7 d防效达到84.53%。15%哒螨灵水乳剂对叶螨防治的速效性和持效性均一般，900 g/hm²药后3、7 d防效分别为73.93%和78.70%。

3 结论与讨论

叶螨是食用玫瑰种植过程中重要的害虫，防治过程中不合理使用化学药剂易引发叶螨抗药性的产生，并引起农药残留超标^[11,16]。本研究室内毒力测定结果表明，腈吡螨酯、阿维菌素、联苯肼酯对食用玫瑰二斑叶螨和朱砂叶螨的成螨和卵具有较好的毒性，螺螨酯尽管对害螨成螨致毒作用不明显，但是杀卵活性突出，而哒螨灵对成螨的活性要明显高于卵。与前人研究报道相比^[18-19]，本研究结果表明，2种叶螨对药剂的敏感性要显著降低，说明2种害螨的田间种群抗药性在逐渐积累。此外，研究发现，二斑叶螨对药剂的敏感性要低于朱砂叶螨，说明前者对药剂的抗性水平高于后者^[20]。再者，山东地区食用玫瑰朱砂叶螨和二斑叶螨雌成螨对哒螨灵的抗性水平较高，与山东地区花生田2种害螨种群相比，抗性水平分别提高了6.14倍和45.78倍^[19]。哒螨灵作为当前平阴地区食用玫瑰叶螨防治的主要药剂，频繁的使用使2种叶螨产生了较高的抗性水平，因此，亟需筛选能够替代哒螨灵的新型药剂。腈吡螨酯为最新研发生产的高效、微毒、广谱性的吡唑类杀螨剂，与当今使用的各种类型杀螨剂无交互抗性^[21-22]。本研究证实，腈吡螨酯对二斑叶螨和朱砂叶螨成螨和卵都具有极高的活性。

评价药剂对作物的安全性有利于农药的规范化使用，减少药害的产生^[23-24]。枝条长度、枝条鲜质量、花苞数量和鲜花质量是食用玫瑰生长的重要植物学性状，也是反映药剂施药后的关键生产安全性指标。本研究中药剂生产安全性试验表明，30%腈吡螨酯悬浮剂、240g/L螺螨酯悬浮剂、1.8%阿维菌素乳油和15%哒螨灵水乳剂1~4倍田间推荐剂量使用对3个品种的食用玫瑰均是安全的，并未发生明显药害，对玫瑰枝条生长和鲜花产量均无不利影响。在田间防效试验中，30%腈吡螨酯悬浮剂对叶螨的田间防治效果最佳，速效性和持效性均较好，300 g/hm²药后3、7 d防效分别为88.06%和92.43%。王莹等^[25]研究发现，腈吡螨酯在药后1 d对茄子上二斑叶螨的防治效果可达到93%，并且药后28 d的持效不低于96%，说明腈吡螨酯对害螨的超高防治效果。本试验中，阿维菌素和螺螨酯对食用玫瑰叶螨的防治效果仅次于腈吡螨酯，而哒螨灵防治效果相对较低，说明田间叶螨种群对哒螨灵的抗性水平较高^[26]。因此，腈吡螨酯可替代老牌杀螨剂用来防治食用玫瑰叶螨，并且各种药剂应当交替使用，避免抗药性的快速积累。此外，阿维菌素除对叶螨防治效果较好，还能兼防玫瑰田蚜虫、棉铃虫和玫瑰三节叶蜂^[27]。因此，当田间害虫种类复杂时，使用阿维菌素能够起到对其他害虫的兼治作用。

综上，针对食用玫瑰叶螨防治，推荐腈吡螨酯作为特效药剂，结合田间害螨发生情况与螺螨酯和阿维菌素进行轮换使用。田间叶螨对哒螨灵的抗性水平较高，应避免该药剂的频繁使用。为了完善农药在田间的使用规范，还应补充玫瑰中农药残留的测评，进而制定安全间隔期，更好的指导田间应用。

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基金资助

山东省特色小宗作物农药登记联合试验(K19LD2001)

山东省自然科学基金项目(ZR2020QC140)