不同灌水量对黑比诺葡萄有机酸积累及成熟期果实品质的影响

Effects of different irrigation amounts on the accumulation of organic acids and fruit quality of Pinot Noir grapes

摘要

目的 研究葡萄生长过程中有机酸的积累规律，明确不同灌水量对酿酒葡萄果实品质的影响机制。 方法 试验以树龄5 a的黑比诺葡萄为试材，设置土壤含水量为田间持水量的（40±5）%（T₁）、（60±5）%（T₂）、（80±5）%（T₃）3个滴灌处理，以沟灌为对照（CK），设CK土壤含水量占田间持水量的（60±5）%，通过测定不同时期果实有机酸的含量、酸代谢酶活性和成熟期的品质指标，运用相关性分析、显著性分析和主成分分析，确定河西走廊武威葡萄产区适宜的灌水量。 结果 不同灌水量条件下，成熟期果实酒石酸含量T₂处理比CK高14.89%，比T₁、T₃分别低9.69%、11.56%；苹果酸含量T₂处理比CK低34.92%；柠檬酸含量T₂处理比T₁、T₃和CK分别高38.50%、14.43%、15.07%；T₂处理果实抗坏血酸含量显著高于T₁、T₃和CK，分别高115.85%、140.27%、94.51%。T₂处理增加了成熟期果实中可溶性糖、单宁、总酚的含量，降低了可滴定酸的含量；灌水量对于可溶性固形物的影响不大。 结论 T₂处理，即滴灌灌溉土壤含水量占田间持水量的（60±5）%时，黑比诺葡萄果实品质较优，建议在河西走廊武威产区酿酒葡萄种植中推广应用。

Abstract

Objective The accumulation of organic acids during grape growth was studied to clarify the influence mechanism of different irrigation amount on the fruit quality of Pinot Noir grapes. Method The experiment was conducted with 5 year old Pinot noir grapes as the test material.Three drip irrigation treatments were set up to keep the soil water content at （40±5）% (T₁)，（60±5）% (T₂),（80±5）% (T₃) of the field water holding capacity.In addition，the control used furrow irrigation to keep the soil water content at (60±5) % of the field water holding capacity.By measuring the organic acid content，acid metabolizing enzyme activity and quality indexes of the fruit at different periods of maturity，and using correlation analysis，significance analysis and principal component analysis to determine the suitable irrigation water amount in the Wuwei production area of the Hexi Corridor. Result Under different irrigation conditions，the tartaric acid content of the ripe fruit in the T₂ treatment was 14.89% higher than that of the control，9.69% and 11.56% lower than T₁ and T₃，respectively，and the malic acid content in T₂ treatment was 34.92% lower than that of the control.The citric acid content of T₂ treatment was 38.50%，14.43%，15.07% higher than that of T₁,T₃ and the control，and the ascorbic acid content of T₂ treatment was significantly higher than that of T₁,T₃ and CK.T₂ treatment was 115.85%，140.27%，94.51% higher than that of T₁，T₃ and the control. Conclusion It can be concluded that when the soil water content accounts for （60±5）% of the field water holding capacity，the fruit quality is better than other treatments and controls，and it can be used in wine grape planting in the Wuwei production area of the Hexi Corridor.

Graphical abstract

关键词

葡萄 / 灌水量 / 有机酸 / 果实品质 / 滴灌

Key words

grape / irrigation amount / organic acid / fruit quality / dripping irrigation

葡萄（V.vinifera）属于葡萄科葡萄属藤本植物，葡萄果实富含有机酸、维生素等营养成分，具有较高的营养和保健价值，还可以加工为葡萄酒、葡萄干等产品，备受消费者青睐。随着中国葡萄酒产业的快速发展，酿酒葡萄的栽培面积迅速扩大。甘肃河西走廊作为酿酒葡萄的优势产区，占全国酿酒葡萄栽培总面积的13.8% ^［1］。武威产区位于河西走廊东端，属温带干旱地区，干旱少雨，光照充足，昼夜温差大，具有种植酿酒葡萄得天独厚的地理优势和气候条件^［2］。目前，甘肃武威地区的葡萄种植已大面积推广滴灌技术。研究发现，在种植玉米^［3］、马铃薯^［4］、小麦^［5］、棉花^［6］等作物时用滴灌方式不仅可以节约水资源，而且有利于作物品质和产量的提高。Machado 等^［7］研究得出，灌溉方式的改变不仅可以改变根系的分布、构型，而且可以改变根系对水分的吸收和利用效率。苗世成^［8］研究认为，滴灌在红提葡萄中的应用可以节水、节肥、增产。张振文等^［9］研究表明，在葡萄栽培中，采用滴灌方式进行灌溉，可很大程度上避免水资源的浪费，提高水分的利用效率，优化土壤结构，为葡萄根系的生长提供有利环境，促进根系向土层深处延伸，增强树势，从而提高果实品质，增加产量。

糖、酸和酚类物质是评价葡萄果实品质的重要指标，其含量主要受品种和外界环境的影响。葡萄是酒石酸型水果，酒石酸和苹果酸两者的共同含量大概是在总酸含量的90%以上，除酒石酸和苹果酸外葡萄果实中还含有比较少量的柠檬酸等有机酸，这些有机酸是影响葡萄果实品质及葡萄酒风味重要的成分^［10］。Wang 等^［11］研究得出番茄生产过程中，合理的灌水量是限制高产优质的首要因素之一。刘洁等^［12］在灵武长枣中研究发现，不同的灌水施肥量对果实品质有显著影响，滴灌水肥一体化技术可显著提高果实品质。沈甜等^［13］研究得出，在赤霞珠葡萄栽培中，适度减少灌水量可提高果实的糖酸比，促进果实中单宁和总酚的合成。Genebra 等^［14］研究得出，水分亏缺可以影响单宁生物合成基因的表达。前人研究发现，葡萄果实中可滴定酸的含量会随着灌水量的减少而降低^［15］。武威地区对黑比诺葡萄合适的灌水量研究较少，因此，本试验通过研究不同灌水量对葡萄果实中有机酸积累及品质的影响，探究武威产区黑比诺葡萄最佳的灌水量，为酿酒葡萄栽培提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 试验材料及处理

试验材料选自武威市林科院黑比诺葡萄，南北行向，树形为扇形，其田间病虫害防治按当地管理制度进行。试验处理采用滴灌形式，可以更加准确地控制土壤含水量占田间持水量的（40±5）%（T₁）、（60±5）%（T₂）、（80±5）%（T₃）。在3个处理行分别滴灌1、2、3 m³水，过24 h进行土壤含水量的测定。分别测定0~20、20~40、40~60 cm的土壤含水量，若达到对应的值，则在48 h后再次灌溉；若没有达到对应的值，则继续灌溉。对照为沟灌，保持土壤含水量占田间持水量的（60±5）%。供试材料皆为长势一致、中庸、健壮的植株，每个处理为一行，对照为一行。采样时间分别为坐果期（S₁，8月8日）、转色前期（S₂，8月24日）、转色中期（S₃，9月9日）、转色后期（S₄，9月25日）、成熟期（S₅，10月11日）。每次取样挑选生长大小一致的5株葡萄，并分别在植株阴、阳两个部位各采1串果穗，共取10穗果实，分别在采得果穗上、中、下3个部位随机选取90粒果实，样品采集后液氮速冻并置于-80 ℃冰箱中，用于后续相关指标的测定分析，每项指标测定3个重复。

1.2 有机酸的测定

1.2.1 有机酸的提取方法

葡萄果实去籽去皮后加液氮研磨后准确称取2 g，加入超纯水，定容至10 mL，超声波提取30 min，4 ℃ 10 000 r/min离心10 min，取上清液，用0.22 μm水相微孔滤膜过滤至进样瓶，待测分析，重复3次。

1.2.2 有机酸的测定方法

参照李玉梅等^［16］的方法（略有改动），用美国Waters Acquity Arc高效液相色谱仪测定有机酸的含量。色谱柱为XBridge BEH Amide（4.6 mm×150.0 mm、3.0 μm）；流动相：20 mmol/L NaH₂PO₄溶液（用H₃PO₄将pH调至2.7）；流速：0.5 mL/min；进样量：20 μL；检测波长：210 nm；柱温：30 ℃；检测器：2498UV紫外检测器。

1.3 酸代谢酶的测定

使用苏州科铭生物技术有限公司相关试剂盒分别测定磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶（PEPC）、柠檬酸合成酶（CS）、顺乌头酸酶（ACO）、苹果酸脱氢酶（MDH）。

1.4 成熟期果实品质指标的测定

可溶性固形物用TD-35 手持式数字折光糖度计测定^［17］，可滴定酸用NaOH中和滴定法测定^［18］，可溶性糖利用蒽酮比色法测定^［19］，单宁和总酚分别用福林-丹尼斯法和福林-肖卡法测定^［20］。

1.5 土壤含水量及田间持水量的测定

含水量参照徐爱珍等^［21］的方法（略有改动）测定，田间持水量参照袁娜娜^［22］的方法（略有改动）测定。

1.6 数据处理

用Excel 2010软件进行数据整理，用SPSS 23软件进行统计分析，采用Duncan法进行显著性分析，Origin 2018作图。

2 结果与分析

2.1 不同灌水量对果实中有机酸含量的影响

不同灌水量对果实中酒石酸含量的影响如图1-A所示。从S₁到S₅时期，3个处理和对照果实中酒石酸的含量变化趋势一致，呈下降趋势，从S₁到S₄时期下降比较明显。从S₄到S₅时期，T₁和T₃有上升的趋势，而对照的含量趋于稳定；T₂处理在S₅时期果实酒石酸含量显著低于T₁和T₃，T₂处理在成熟期果实酒石酸含量降至最低，为3.14 mg/g。

不同灌水量对果实中苹果酸含量的影响如图1-B所示。从S₁到S₄时期，各处理果实中苹果酸的含量变化趋势一致，均呈现下降的趋势，从S₄到S₅时期，T₂和T₃处理的含量趋于稳定，T₁和对照反而有上升的趋势。T₂处理在S₅时期果实苹果酸含量显著低于CK，T₂处理在S₅时期果实苹果酸含量降至最低，为2.44 mg/g。

不同灌水量对果实中柠檬酸含量的影响如图1-C所示。从S₁到S₅时期，不同处理的果实中柠檬酸的变化趋势一致，均呈现下降趋势，从S₁到S₂时期下降趋势明显。T₂处理在S₅时期果实柠檬酸含量显著高于其他处理，在S₅时期含量为0.09 mg/g。

不同灌水量对果实中草酸含量的影响如图1-D所示。从S₁到S₄时期果实中草酸含量的变化趋势基本相同，均呈下降的趋势，且S₃时期T₂、T₃和CK处理的果实草酸含量无明显差异，T₁处理的草酸含量最低。从S₄到S₅时期各处理草酸含量均呈现上升趋势。在S₅时期T₂处理的草酸含量是0.58 mg/g，且显著高于T₁和CK的含量。

不同灌水量对果实中抗坏血酸含量的影响如图1-E所示。从S₁到S₅时期，抗坏血酸含量均呈“上升-下降-上升”的趋势。在S₁时期，T₁、T₂和T₃处理果实抗坏血酸的含量高于CK。T₂处理在S₅时期果实抗坏血酸的含量显著高于T₁、T₃和CK，T₂处理比T₁、T₃和CK分别高115.85%、140.27%、94.51%。

不同灌水量对果实中奎宁酸含量的影响如图1-F所示。从S₁到S₅时期各个时期的不同灌水量的处理之间奎宁酸的变化均呈“上升-下降-上升”的趋势。在S₂时期，T₁、T₂和CK果实中奎宁酸含量达到峰值，T₃处理果实中奎宁酸含量在S₃时期达到峰值。在S₅时期果实中奎宁酸的含量T₂处理显著高于其他处理。

2.2 不同灌水量对果实中有机酸代谢酶活性的影响

不同灌水量对果实中NADP-苹果酸脱氢酶（NADP-MDH）活性的影响如图2-A所示。从S₁到S₅时期，T₁和T₂处理果实中的NADP-MDH的活性呈逐渐上升的趋势；对照处理果实中的NADP-MDH的活性在S₁时期后下降，在S₂时期逐渐上升；T₃处理果实中的NADP-MDH的活性在S₃时期下降，在S₄逐渐上升。在S₅时期果实中，T₂处理（981.65 nmol/（min·g） FW）果实中的NADP-MDH的活性显著高于T₃（865.89 nmol/（min·g） FW）和CK（805.91 nmol/（min·g）FW）。

不同灌水量对果实磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶（PEPC）活性的影响如图2-B所示。从S₁到S₄时期PEPC呈现上升趋势，从S₄到S₅时期PEPC则呈下降的趋势，3个处理和对照变化的PEPC活性变化趋势一致，均在S₄时期出现峰值。在果实S₅时期PEPC的活性T₂处理（50.31 nmol/（min·g） FW）显著高于CK（37.29 nmol/（min·g） FW）和T₃处理（35.86 nmol/（min·g） FW）。

不同灌水量对果实柠檬酸合成酶（CS）活性的影响如图2-C所示。从S₁到S₅时期，试验各处理CS活性都呈现先上升后下降的趋势，而且在S₁时期和S₂时期CS的活性大致相同，S₄到S₅时期C_S的活性强弱依次为T₂>对照>T₁>T₃，T₂处理的C_S（20.45 nmol/（min·g） FW）显著高于T₃（14.01 nmol/（min·g）FW）。

不同灌水量对果实顺乌头酸酶（ACO）活性的影响如图2-D所示。从S₁到S₅时期，不同处理下ACO活性都保持“上升-下降-上升-下降”的相同变化趋势，而且对照和T₁处理的ACO活性从S₁时期到S₅时期都有相同的活性。在S₅时期各处理间无明显的差异。

2.3 不同灌水量对果实中有机酸含量和酶活性的相关性分析

由表1可以看出，不同灌水量的葡萄果实中的有机酸含量和酶活性之间的相关性，从S₁时期到S₅时期，果实中草酸含量与PEPC活性呈极显著负相关（R²=-0.688^**），与CS、NADP-MDH的活性呈显著负相关（R²=-0.451^*，R²=-0.482^*）。酒石酸含量与CS、NADP-MDH活性呈极显著负相关（R²=-0.562^**，R²=-0.732^**），与PEPC活性呈显著负相关（R²=-0.511^*）。柠檬酸含量与NADP-MDH活性呈极显著负相关（R²=-0.719^**）。苹果酸含量与PEPC活性呈极显著正相关（R²=0.808^**）。VC含量与NADP-MDH活性呈极显著负相关（R²=-0.614^**）。

2.4 不同灌水量对成熟期果实品质的影响

由表2可知，成熟期果实中可溶性固形物含量依次为：T₂>T₁>T₃>CK，说明不同灌水量对成熟期果实的可溶性固形物含量有一定的影响，3个处理和对照之间有显著差异，T₁、T₂、T₃之间无明显差异，T₂处理可溶性固形物含量最高，为24.25%。不同灌水量处理中，T₂可滴定酸含量显著低于T₃处理，为0.60 mg/L。不同灌水量对成熟期可溶性糖含量影响较大，T₂与T₁、T₃和CK间有显著差异，且T₂（27.57%）显著高于T₁（23.71%）、T₃（23.81%）和CK（21.24%）。不同灌水量对成熟期单宁含量影响较大，含量大小依次为T₂>T₁>T₃>CK。T₂处理和T₁、T₃、CK间有显著差异。在果实成熟期，总酚含量T₂显著高于其他处理，且与其他处理相比有显著差异。

2.5 不同灌水量对成熟期果实品质的主成分分析

对成熟期葡萄果实的11种品质指标数据进行主成分分析发现（表3、4），基于特征值大于1可得出2个主成分，2个主成分所产生的特征值分别为6.98和3.10。第1主成分的方差贡献率为63.49%，第2主成分的方差贡献率为28.26%，2个主成分的累积方差贡献率达到了91.75%，说明2个主成分总体上可以反映这11个指标的所有信息。第1主成分中，可溶性糖、可溶性固形物、单宁等指标有较大的正向量值，可滴定酸、苹果酸等指标有较大的负向量值；第2主成分中，酒石酸、柠檬酸等指标有正向量值，总酚、苹果酸等指标有负向量值。

对不同灌水量成熟期果实品质主成分得分评价，得出的果实品质综合评价方程为F_品质=0.634 95×F₁+0.282 58×F₂。由表4可以得出，T₂处理的葡萄果实品质得分最高，各处理果实品质得分由高到低依次为T₂>T₃>T₁>CK，由此可以得出T₂处理时果实品质最好。

3 讨论

研究表明，在葡萄生长发育过程中，水分是限制葡萄生长和产量形成的重要因素之一，合理的灌水量有利于有机酸的积累^［23］。而有机酸的种类及其积累量随着葡萄的品种和发育时期的差异而表现不同^［24］。在酿酒葡萄中，酒石酸、柠檬酸、苹果酸等能够平衡果实的味感，而且味感的质量取决于有机酸之间的有机结合^［25］。此外抗坏血酸可以增强葡萄酒的防腐能力^［26］。本研究发现，从坐果期到成熟期，葡萄果实酒石酸、柠檬酸以及苹果酸含量总体呈下降趋势，T₂处理在成熟期的酒石酸的含量显著低于T₁和T₃处理。与牛冬青^［27］研究的结果相近，在‘赤霞珠’葡萄果实中酒石酸、柠檬酸和苹果酸的含量呈下降趋势。成熟期果实中有机酸组分从高到低排序为：酒石酸>苹果酸>奎宁酸>草酸>柠檬酸>抗坏血酸。苹果酸是浆果中酸的主要成分，酸度较重，属尖酸，带有青涩味，它的含量影响葡萄的口味和品质^［28］。酒石酸参与葡萄酒味感的平衡，影响葡萄酒微生物和物化及颜色稳定性，进而影响葡萄酒的陈酿潜力^［29］。柠檬酸味道清爽宜人，会持续刺激味觉，因此柠檬酸含量越高，果实风味越好^［32］。在转色中期到成熟期过程中，T₂处理酒石酸的含量与其他处理和对照之间有显著的差异，且显著高于对照，说明滴灌灌溉土壤含水量占田间持水量的（60±5）%可以提高酒石酸的含量，在成熟期，T₂处理显著提高了柠檬酸的含量。赵悦等^［24］研究发现，不同地区的酿酒葡萄赤霞珠果实中的有机酸含量与产地和气候相关，杨春霞等^［28］研究得出，在成熟期苹果酸有所上升，与本试验结果有所差异，可能是不同环境的光照、水分和气候等因素不同所造成的。T₁处理，即滴灌灌溉土壤含水量占田间持水量的（40±5）%和T₃处理，即滴灌灌溉土壤含水量占田间持水量的（80±5）%均不能显著提高果实的有机酸含量，且会降低水分利用效率，过低的水分会影响葡萄植株的生长发育，影响关键时期相关酶的活性；过高的水分又会使果实膨大，降低果实中有机酸的含量。

在葡萄果实中有机酸作为细胞中重要的物质，支持着细胞中三羧酸循环、糖酵解等多种生理生化反应^［33］。Notton等^［34］研究得出，在胞质中，苹果酸是由NADP-苹果酸脱氢酶（NADP-MDH）催化NADPH还原草酰乙酸和磷酸烯醇式丙酮酸羧化合成。成熟期的NADP-苹果酸脱氢酶（NADP-MDH）的活性逐渐上升，T₂处理成熟期苹果酸脱氢酶的活性高于CK和T₃。从坐果期到转色后期NADP-苹果酸脱氢酶（NADP-MDH）与苹果酸的含量变化一致，在成熟期因为稀释作用各种酸的含量都是下降的趋势。在柠檬酸合成和分解的过程中，柠檬酸合成酶（CS）、顺乌头酸酶（ACO）起着重要的作用，柠檬酸合成酶（CS）参与柠檬酸的合成，顺乌头酸酶（ACO）参与柠檬酸的分解，T₂处理的柠檬酸合成酶（CS）在成熟期含量上升，且显著高于其他处理，顺乌头酸酶（ACO）的含量下降，且T₂处理显著高于CK和T₁处理，说明T₂处理对于柠檬酸的合成有着促进作用。文涛等^［35］研究得出，柠檬酸合成酶（CS）活性与柠檬酸含量呈现正相关，与本试验结果一致。

苏学德等^［36］研究得出，在无核葡萄果实中，随着灌水量的增大可溶性固形物含量减小，本试验研究得出，成熟期葡萄果实中，T₂处理的可溶性固形物高于T₃处理。李磊等^［37］研究得出，合理的水分供应可以提高可溶性糖、单宁和总酚的含量。本试验研究得出，T₂处理显著提高了成熟期果实中可溶性糖、单宁和总酚的含量，两者结果相同。王童孟^［38］研究发现，可滴定酸随着灌水量增加表现为增加趋势，与本试验结果相同。在成熟期葡萄果实中，T₂处理有利于酿酒葡萄植株生长发育、促进光合作用提高水分转化率，同时对葡萄果实的品质具有显著的提高作用。滴灌灌溉土壤含水量占田间持水量的（60±5）%处理下酿酒葡萄果实中可溶性糖、单宁、总酚含量增加，总酸含量降低，糖酸比增加，提高了果实品质。

4 结论

通过试验得出，滴灌灌溉土壤含水量占田间持水量的（60±5）%可明显提高果实的可溶性固形物、抗坏血酸、柠檬酸以及奎宁酸含量，降低可滴定酸含量，提高果实品质，可在葡萄栽培中推广应用。

参考文献

[1] 梁伟.甘肃河西走廊酿酒葡萄发展优势及存在问题和对策［J］.现代职业教育，2016（3）：178-179.

[2] 李利，郝燕.甘肃河西走廊葡萄酒产业发展的思考与建议［J］.农业科技与信息，2019（11）：57-61.

[3] 罗英舰，刘君鹏，蒙懿练，等.苗期调亏灌溉对玉米生理生化特性及养分积累的影响［J］.江苏农业科学，2018，46（24）：79-82.

[4] 薛道信，张恒嘉，巴玉春，等.调亏灌溉对荒漠绿洲膜下滴灌马铃薯生长、产量及水分利用的影响［J］.干旱地区农业研究，2018，36（04）：109-116，132.

[5] 李熙婷，田德龙，郭克贞，等.膜下滴灌对小麦根系分布特征的影响［J］.排灌机械工程学报，2016，34（6）：545-552.

[6] 石岩，张金霞，董平国，等.干旱缺水区膜下滴灌棉花节水机理及灌溉制度研究［J］.干旱地区农业研究，2018，36（2）：77-85，100.

[7] Machado R A， Do Rosário M， Oliveira G，et al.Tomato root distribution，yield and fruit quality under subsurface drip irrigation ［J］.Plant and Soil，2003，255（1）：333-341.

[8] 苗世成.日光温室红提葡萄滴灌技术［J］.甘肃农业科技，2007（10）：65-66.

[9] 张振文，李华，宋长冰.节水灌溉对葡萄及葡萄酒质量的影响［J］.园艺学报，2002，29（ 6） ： 515-518.

[10] 张晓峰，娄玉穗，尚泓泉，等.不同保鲜处理对“阳光玫瑰”葡萄品质及生理生化的影响［J］.河南农业大学学报，2019，53（5）：698-703.

[11] Wang F， Kang S， Du T，et al.Determination of comprehensive quality index for tomato and its response to different irrigation treatments［J］.Agricultural Water Management，2011，98（8）： 1228-1238.

[12] 刘洁，万仲武，曹兵，等.不同滴灌水肥处理对灵武长枣果实品质的影响［J］.节水灌溉，2014（8）：25-28.

[13] 沈甜，黄小晶，牛锐敏，等.不同灌水量对贺兰山东麓葡萄生长和品质的影响［J］.灌溉排水学报，2020，39（10）：65-74.

[14] Genebra T， Santos R R， Francisco R，et al.Proanthocyanidin accumulation and biosynthesis are modulated by the irrigation regime in tempranillo seeds［J］.International Journal of Medical Students，2014，15（7）：11862-11877.

[15] 李昭楠.戈壁葡萄滴灌节水机理及灌溉制度模式研究［D］.兰州：甘肃农业大学，2012.

[16] 李玉梅，韦霞霞，李彦彪，等.美乐和蛇龙珠葡萄在甘肃不同产区的品质评价［J］.经济林研究，2020，38（4）：152-160.

[17] 黄玉平，彭文娟，张瑜，等.NO处理对草莓果实采后品质和苯丙烷类代谢的影响［J］.核农学报，2016，30（10）：1959-1966.

[18] 张倩，辛力，亓雪龙，等.肉桂精油对甜樱桃果实品质和货架期的影响［J］.核农学报，2015，29（9）：1737-1742.

[19] 陈克明，陈伟，杨震峰.桃果实采后可溶性糖和果胶类物质的变化与低温冷害的关系［J］.核农学报，2013，27（5）：647-652.

[20] 李合生.植物生理生化实验原理和技术［M］.北京：高等教育出版社，2000.

[21] 徐爱珍，胡建民，熊永，等.TDR法、干烧法及烘干法测定土壤含水量的比较研究［J］.水资源与水工程学报，2018，29（2）：253-256.

[22] 袁娜娜.室内环刀法测定土壤田间持水量［J］.中国新技术新产品，2014（9）：184.

[23] 伍国红，骆强伟，苏来曼·艾则孜，等.不同灌水量对无核白葡萄生长发育和产量的影响［J］.新疆农业科学，2013，50（5）：889-893.

[24] 赵悦，韩宁，孙玉霞，等.不同产地酿酒葡萄赤霞珠果实中有机酸差异性研究［J］.食品工业科技，2016，37（1）：297-301.

[25] 崔婧，段长青，潘秋红.反相高效液相色谱法测定葡萄中的有机酸［J］.中外葡萄与葡萄酒，2010（5）：25-30.

[26] 刘笑宏，赵烁，李公存，等.叶幕类型对摩尔多瓦葡萄酒品质的影响［J］.中国酿造，2018，37（11）：142-146.

[27] 牛冬青.整形方式和砧木对酿酒葡萄果实糖酸代谢及有机酸相关基因表达的影响［D］.太谷：山西农业大学，2019.

[28] 杨春霞，刘元柏，葛谦.贺兰山东麓酿酒葡萄中有机酸含量分析［J］.食品科技，2016，41（11）：244-247.

[29] Lamikanra O， Inyang ID， Leong S.Distribution and effect of grape maturity on organic acid content of red muscadine grapes［J］.Journal of Agricultural and Food Chemistry，1995，43（12）：3026-3028.

[30] Lamikanra O.Changes in organic acid composition during fermentation and aging of noble muscadine wine［J］.Journal of Agricultural and Food Chemistry，1997，45（3）：935-937.

[31] Bartowsky E J.Bacterial spoilage of wine and approaches to minimize it.［J］.Letters in Applied Microbiology，2009，48（2）：149-56.

[32] 陈海菊.河北昌黎5个酿酒葡萄品种比较研究［D］.杨凌：西北农林科技大学，2010.

[33] 何志刚，李维新，林晓姿，等.枇杷果实成熟和贮藏过程中有机酸的代谢［J］.果树学报，2005（1）：23-26.

[34] Notton B A， Blanke M M.Phosphoenolpyruvate carboxylase in avocado fruit： Purification and properties［J］.Pergamon，1993，33（6）：1333-1337.

[35] 文涛，熊庆娥，曾伟光，等.脐橙果实发育过程中有机酸合成代谢酶活性的变化［J］.园艺学报，2001（2）：161-163.

[36] 苏学德，李铭，郭绍杰，等.不同灌水处理对克瑞森无核葡萄光合特性及果实品质的影响［J］.安徽农业科学，2011，39（30）：18649-18652.

[37] 李磊，王锐，纪立东，等.贺兰山东麓酿酒葡萄赤霞珠合理灌水量的研究［J］.北方园艺，2016（19）：17-21.

[38] 王童孟.调亏灌溉对赤霞珠葡萄生长发育及果实品质的影响［D］.杨凌：西北农林科技大学，2016.

基金资助

甘肃农业大学伏羲杰出人才培育计划(Gaufx-03J02)

甘肃省现代水果产业体系项目(GARS-SG-1)