饲料中添加黄连素和胆汁酸对大口黑鲈生长、抗氧化指标、肝肠组织结构及肠道菌群的影响

Effects of dietary berberine and bile acid supplementation on largemouth bass growth，antioxidant indices，liver and intestinal tissue and its microbiota

摘要

目的 探究饲料中添加黄连素和胆汁酸对大口黑鲈生长性能、代谢、肠道组织学及微生物种群和肠道微生物的影响。 方法 以初始体质量为（133.7±1.43）g的大口黑鲈为研究对象，在基础饲料中分别添加300 mg/kg的胆汁酸和2 g/kg的黄连素作为试验组，以基础饲料作为对照组，饲喂大口黑鲈50 d，测定比较其生长指标、血清和肝脏生理生化指标、肠道组织学及内容物微生物种群组成差异。 结果 饲料中添加黄连素和胆汁酸可以显著改善大口黑鲈的生长性能，与对照组相比，黄连素组和胆汁酸组特定生长率显著增加，肝体比显著降低（P<0.05）；饲料中添加黄连素和胆汁酸可以显著降低大口黑鲈血清促炎症因子（肿瘤坏死因子（TNF-α））和血糖含量（P<0.05）；饲料中添加黄连素可显著提升肝脏糖酵解、糖异生关键酶含量（P<0.05）；与对照组相比，黄连素组和胆汁酸组肠道微生物厚壁菌门（Firmicutes）占比增加，变形菌门（Proteobacteria）降低，假单孢菌属（Pseudomonas）降低；饲料中添加黄连素和胆汁酸可以使大口黑鲈肝脏组织空泡化明显改善，细胞脂肪减少，肠道绒毛长度较长，肠壁较厚，杯状细胞数量增加，嗜酸性颗粒细胞较少。 结论 添加黄连素和胆汁酸能够提高大口黑鲈的生长性能，减少炎症反应，促进大口黑鲈的糖代谢，改变肠道菌群的相对丰度和多样性。

Abstract

Objective This study aimed to investigate the effect of berberine and bile acid supplementation on the growth performance，immunity，glucose metabolism，and intestinal microbiota of largemouth bass. Method Largemouth bass with an initial body weight of （133.7±1.43）g were selected as the research subjects，and the basal diet was supplemented with 300 mg/kg bile acid and 2 g/kg berberine.The control group was fed with the basal diet for 50 days.Physiological and biochemical analyses，as well as high-throughput sequencing，were employed to assess physiological and metabolic parameters，tissue morphology，and intestinal microorganisms. Result It was showed that berberine and bile acid supplementations significantly improved the growth performance of largemouth bass.Compared to the control group，the berberine and bile acid groups exhibited a significantly increased specific growth rate and a decreased hepatosomatic ratio （P<0.05）.Berberine and bile acid supplementation also led to a significant decrease in the levels of the proinflammatory factor TNF-α and blood glucose in the serum of largemouth bass （P<0.05）.Dietary berberine increased the levels of key enzymes involved in liver glycolysis and gluconeogenesis （P<0.05）.Moreover，the berberine and bile acid groups displayed an increased proportion of intestinal microbe Firmicutes，a decreased abundance of Proteobacteria，and reduced levels of Pseudomonas.Additionally，dietary supplementation of berberine and bile acid improved liver tissue vacuolation，reduced cellular fat，resulted in longer intestinal villi and thicker intestinal walls，increased goblet cells，and decreased eosinophilic granulosa cells. Conclusion The dietary addition of berberine and bile acid improved growth performance，reduced inflammation，promoted glucose metabolism，and caused the changes in relative abundance and diversity of intestinal microbiota in largemouth bass.

Graphical abstract

关键词

大口黑鲈 / 胆汁酸 / 黄连素 / 肠道微生物

Key words

largemouth bass（Micropterus salmoides） / bile acid / berberine / gut microbes

水产养殖是食品生产中增长最快的产业之一，在满足人类膳食蛋白质需求方面发挥着至关重要的作用^［1］，但水产养殖所用饲料需要大量的鱼粉。近几年，迅速扩张的水产养殖业面临着鱼粉短缺及其价格上涨的问题。饲料中的碳水化合物是相对便宜的能量来源，可以代替饲料中部分蛋白质，作为饲料原料用以降低养殖成本^［2-5］。然而，进一步的研究发现，与杂食性和草食性鱼类相比，肉食性鱼类对碳水化合物的利用率较低，其肠道葡萄糖吸收率低、激素和血糖代谢调节的差异是主要原因^［2］。

大口黑鲈（Micropterus salmoides），又名加州鲈，属鲈形目（Perciformes），太阳鱼科（Ceutrarchidae），原产自北美，为肉食性鱼类，其营养价值丰富全面、生长快、抗病力较强，是经济价值较高的名贵鱼类，也是目前具有发展潜力的淡水养殖品种。近些年来，大口黑鲈养殖方式已从传统的投喂冰鲜饵料转为投喂配合饲料，但饲料中不能使用高水平的碳水化合物。大口黑鲈对糖类的耐受力极低^［6］，饲料糖水平维持在10%以下时尚能正常生长^［7］，但是随着饲料糖水平继续增加，大口黑鲈会出现严重的“肝胆综合征”，表现为持续高血糖、肝肿大、肝糖原累积、生长率减缓和饲料效率降低，严重时会引发大规模死亡^［8］。

胆汁酸（bile acid，BA）是胆固醇代谢过程中产生的一系列固醇类物质^［9］。近年来，胆汁酸除了促进脂质消化吸收，其作为信号分子调节宿主血糖平衡、脂质代谢和能量消耗的作用日益受到人们的关注^［10-11］。研究发现，饲料中添加胆汁酸后，可提高大口黑鲈生长效率、肌肉品质以及可食用部分比例^［12］；胆汁酸通常以胆汁酸盐的形式存在。周楠楠等^［13］研究表明，饲料中添加脱氧胆酸钠增加了大口黑鲈关于糖代谢相关的基因，降低了厚壁菌门和拟杆菌门的丰度，提升了放线菌门的丰度。胆汁酸与牛磺酸结合形成结合型胆汁酸，研究表明，饲料中添加牛磺酸降低了大菱鲆（Scophthalmus maximus L.）的血糖，结合型胆汁酸对大菱鲆葡萄糖稳态具有有益作用^［14］。黄连素（berberine，BBR）是中药黄连（Coptis chinensis Franch）的有效成分，是一种异喹啉生物碱，存在于包括黄连在内的多种药用植物中。在临床医学中，BBR 早已广泛地用于人类糖尿病的治疗，相关研究表明其在调控机体糖脂代谢中效果显著^［15］。在水产养殖领域，BBR作为功能性饲料添加剂能改善高脂饲料导致的团头鲂氧化应激，调控机体脂代谢的效果显著^［16-17］。饲料中添加黄连素显著降低了草鱼血清葡萄糖、总胆固醇（TC）和甘油三酯（TG）水平^［18］。研究表明，胆汁酸和黄连素都能降低动物体内血糖水平或者减轻高血糖对机体的应激，但关于其对大口黑鲈免疫、糖代谢、肠道菌群等方面的影响研究较少。

在本实验室前期研究的基础上，本研究主要评估饲料中添加300 mg/kg胆汁酸^{［12-13，19］}和2 g/kg黄连素^［20］后对大口黑鲈生长性能、机体免疫能力和糖代谢以及肠道菌群的影响，以期为大口黑鲈饲料配方优化提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 试验材料与试验设计

试验用鱼为中国水产科学研究院珠江水产研究所培育的优鲈3号大口黑鲈，选取初始体质量（133.7±1.43）g健康有活力的鱼种270尾，暂养两周，使其适应试验环境，然后将其随机分为对照组（基础饲料）、黄连素组（2 g/kg）和胆汁酸组（300 mg/kg），每组设3个重复，每个重复30尾。投饵率为鱼体质量的3%，每日投喂两次（早8∶00~9∶00；晚17∶00~18∶00）。养殖水源为曝气自来水，试验期间，水温为17~23 ℃，溶解氧（DO）为6~9 mg/L，总磷（TP）为（0.19±0.07）mg/L，总氮（TN）为（2.45±0.39）mg/L，氨氮为（0.23±0.06）mg/L，亚硝酸盐氮为（0.52±0.08）mg/L，硝酸盐氮为（0.56±0.12）mg/L，pH在8.53左右，养殖周期50 d。

试验基础饲料购自杰大饲料有限公司，基础饲料营养成分为：粗蛋白质≥48.0%，粗脂肪≥5.0%，粗纤维≤6.0%，粗灰分≤24.0%，总磷≥0.8%，赖氨酸≥2.7%，水分≤12.0%。盐酸黄连素（ruitaibio）（纯度为98%）购自甘肃林茂源生物科技有限公司，胆汁酸购自广州信豚科技有限公司，主要含有猪去氧胆酸（HDCA），鹅去氧胆酸（CDCA），有效成分含量在80%以上。试验组饲料在基础饲料的基础上添加黄连素和胆汁酸，黄连素添加量为2 g/kg，胆汁酸添加量为300 mg/kg。

1.2 样品采集

试验结束后，禁食24 h，每组随机取12条鱼，用麻醉剂麻醉，测量体质量及体长后，用2 mL注射器取血，4 ℃静置过夜，3 000 r/min离心10 min，取上清液得血清，-80 ℃保存，以备后续检测分析。在无菌工作台上解剖剩余9 尾。称量记录内脏团质量，肝胰脏质量。每尾鱼取0.4 cm左右大小的肝脏组织于4%甲醛溶液中浸泡，浸泡后切片，用HE染色和油红染色观察；另取0.4 cm左右大小的中肠组织于4%甲醛溶液中浸泡，切片用HE染色观察。收集剩余肝脏，中后肠及全部肠道内容物等组织，液氮速冻，-80 ℃保存，以备后续检测分析。

1.3 样品分析

血清通过试剂盒检测总胆固醇（TC）、总胆汁酸（TBA）、血糖（GLU）、溶菌酶（LZM）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-6（IL-6）指标；称取肝脏或肠道组织质量，按照质量（g）∶体积（mL）=1∶9的比例加入9倍体积生理盐水，剪碎组织，冰水浴制备匀浆，3 000 r/min，离心10 min，取上清液用试剂盒检测肝脏丙酮酸羧化酶（PC）、磷酸果糖激酶（PFK）、己糖激酶（HK）、丙酮酸激酶（PK）、葡萄糖-6-磷酸酶（G6P）、磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶（PEPCK）、谷草转氨酶（GOT）、谷丙转氨酶（GPT）等指标；试剂盒检测肠道丙二醛（MDA）、过氧化氢酶（CAT）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH－PX）、超氧化物歧化酶（SOD）等指标。试剂盒均购于南京建成生物科技有限公司，ELISA试剂盒购于江苏酶免实业有限公司。

1.4 肠道菌群DNA提取、扩增和测序

采集大口黑鲈200 mg的肠内容物样本，使用细菌 DNA 提取试剂盒（omega bio-kit，Norcross，USA）提取细菌DNA。应用高通量测序技术对大口黑鲈的肠道内容物进行16S rRNA基因V3+V4区测序（诺禾致源科技股份有限公司，北京）。在Solexa PCR过程中，20 µL的反应体积包含5 µL的PCR纯化产物，2.5 µL浓度为2 μmol/L正向和反向引物，10 µL的2×Q5 HF MM。PCR循环条件如下：98 ℃ 30 s；98 ℃ 10 s、65 ℃ 30 s、72 ℃ 30 s（10 个循环）；72 ℃ 5 min。PCR 产物与相同体积的1×加载缓冲液混合，在1.5%琼脂糖凝胶上电泳分离。选择400~450 bp的扩增子进行下一步的试验。PCR 产物以等密度比混合，然后使用OMEGA凝胶提取试剂盒（Thermo Fisher Scientific，Waltham，MA，United States）纯化。切胶回收后片段进行测序。

1.5 计算公式

WGR（%）=（m₂-m₁）/m₁ ×100（1）

SG（%/d）=（lnm₂-lnm₁）/t×100（2）

Wv（%）=m_v /m_b ×100（3）

W_h （%）=m_h /m_b ×100（4）

式中：WGR 为增重率（%），SG为特定生长率（%/d），Wv 为脏体比（%），W_h 为肝体比（%），m₁为鱼体最初平均质量（g），m₂ 为鱼体最终平均质量（g），t为饲喂天数（d），m_h 为每尾鱼末肝脏质量（g），m_v 为每尾鱼末内脏质量（g），m_b 为每尾鱼末体质量（g）。

1.6 数据分析

试验结果用平均值±标准差表示，数据分析采用SPSS 25.0软件进行单因素方差分析。

2 结果与分析

2.1 黄连素和胆汁酸对大口黑鲈生长性能的影响

与对照组相比，黄连素组大口黑鲈终末体质量、增重率有所增加，但差异不显著（P>0.05），胆汁酸组大口黑鲈终末体质量、增重率显著增大（P<0.05），黄连素组和胆汁酸组大口黑鲈的特定生长率均显著增加（P<0.05）；黄连素组脏体比、肝体比均显著降低（P<0.05），胆汁酸组脏体比降低，但差异不显著（P>0.05），肝体比显著降低（P<0.05）。与胆汁酸组相比，黄连素组大口黑鲈脏体比、肝体比显著减小（P<0.05），其他指标两组之间差异不显著。

2.2 黄连素和胆汁酸对大口黑鲈血清生化指标的影响

与对照组和黄连素组相比，胆汁酸组大口黑鲈的血清TC显著降低；与对照组相比，黄连素组和胆汁酸组大口黑鲈的血清GLU显著降低（P<0.05），黄连素组比胆汁酸组降低程度更明显，但两组之间差异不显著；黄连素组血清TBA含量增加，但差异不显著（P>0.05），胆汁酸组血清TBA较对照组显著升高（P<0.05）；黄连素组HDL-C、LDL-C降低，但差异不显著（P>0.05），AKP、TNF-α、IL-6显著降低（P<0.05），胆汁酸组LDL-C、TNF-α显著降低（P<0.05），IL-6降低但差异不显著（P>0.05）。

2.3 黄连素和胆汁酸对大口黑鲈肝脏理化指标的影响

与对照组相比，黄连素组PC、PEPCK、G6P、PFK、HK和PK活性显著升高，GOT活性显著升高（P<0.05），GPT活性降低，但差异不显著（P>0.05）；与对照组相比，胆汁酸组G6P活性显著降低（P<0.05），PC、PEPCK、PFK、HK和PK活性无显著变化（P>0.05），但与黄连素组相比，胆汁酸组以上酶活性都有显著性降低（P<0.05）。

2.4 黄连素和胆汁酸对大口黑鲈肠道理化指标的影响

与对照组相比，黄连素组和胆汁酸组CAT活性和MDA含量显著降低（P<0.05）；黄连素组和胆汁酸组GSH－PX活性升高，但差异不显著（P>0.05）；与对照组和胆汁酸组相比，黄连素组LZM活性显著升高（P<0.05）。

2.5 黄连素和胆汁酸对大口黑鲈肝脏和肠道的影响

不同处理组大口黑鲈肝脏HE染色结果如图1-A所示，对照组大口黑鲈肝脏明显可见空泡，肝脏细胞肿大。黄连素组与胆汁酸组肝脏组织脂泡数量减少，肝脏空泡化明显改善，肝脏细胞形态大小正常，细胞核数量增加，核圆、大、居中，细胞胞质充盈。

不同处理组大口黑鲈肝脏油红染色结果如图1-B所示，对照组大口黑鲈肝细胞明显肿大、变圆，明显可见细胞内有大小不等的红色脂滴，呈弥漫状。黄连素组与胆汁酸组大口黑鲈肝细胞仅有少许红色小脂滴，肝脏细胞脂肪减少，脂肪蓄积情况改善，肝细胞形态大小正常，肝脏脂肪明显减少。

不同处理组大口黑鲈中肠HE染色结果如图1-C所示，对照组大口黑鲈肠道绒毛短且有清晰可见糜烂。胆汁酸组和黄连素组大口黑鲈肠壁较厚，肠道绒毛长度较长，光滑平坦，杯状细胞数量增加，嗜酸性颗粒细胞较少。

2.6 肠道微生物α-多样性分析

高通量测序结果显示，3组18个样本中，每组获取到了至少（53 251.33±8 208.51）条高质量的细菌16S rRNA基因reads。经过97%相似度的聚类后，每组样本至少得到（327.33±145.93）个OTUs。所有样本Coverage指数大于0.99，说明测序序列几乎覆盖所有的类型，测序结果具有可靠性和代表性。Chao 1、Shannon、Simpson等指标评价的肠道菌群α-多样性如表5所示。从表中可以发现，黄连素组大口黑鲈肠道微生物Chao 1指数显著增加（P<0.05），说明物种群落丰富度增加；与对照组相比，黄连素组Shannon和Simpson指数升高，说明群落多样性提高，但差异不显著（P>0.05）；胆汁酸组Shannon和Simpson指数显著降低（P<0.05），说明群落多样性降低。

2.7 大口黑鲈肠道微生物群落构成

通过分析各类群在门水平上的相对丰度（图2）发现，各组的优势菌群在结构组成上有一定的相似性，包括：变形菌门（Proteobacteria）、蓝细菌门（Cyanobacteria）、厚壁菌门（Firmicutes）、拟杆菌门（Bacteroidota）和放线菌门（Actinobacteria）等，但其相对丰度具有差异。以上优势菌门在对照组的相对丰度分别为37.2%、28.7%、15.1%、6.8%、3.4%；与对照组相比，黄连素组变形菌门、蓝细菌门、放线菌门分别降低至24%、19.8%、1.8%，拟杆菌门、厚壁菌门分别增加至17.1%、16.3%；胆汁酸组变形菌门、拟杆菌门分别降低至24.6%、0.2%，厚壁菌门、蓝细菌门、放线菌门分别增加至37.3%、30%、4.7%。

在属水平上进一步分析各类群的相对丰度（图3）发现，对照组的优势菌属为Chloroplast （28.5%）、假单胞菌属（Pseudomonas，18.5%）、鞘氨单胞菌属（Sphingomonas，2.6%）、拟杆菌属（Bacteroides，2.1%）；与对照组相比，黄连素组的优势菌属发生改变，Chloroplast降低至19%、假单胞菌属降低至8.7%，拟杆菌属增加至5.5%；胆汁酸组假单胞菌属降低至15.6%，Chloroplast增加至30%。

3 讨论

一般来说，鱼类的生长性能通过增重率、特定生长率等指标来反应^［21-25］。与对照组相比，添加黄连素和胆汁酸后，大口黑鲈增重率增加，肝体比显著降低，说明适量添加黄连素和胆汁酸能提高大口黑鲈的生长性能，这可能与添加黄连素和胆汁酸能调节大口黑鲈机体内糖代谢，促进肠道健康等有关。这与张亚伟等^［21］的研究结果一致。肝体比也是反应生长状况的指标之一^［21-25］，本次试验发现，添加黄连素和胆汁酸后，肝体比显著降低，说明添加两种添加剂均可以改善大口黑鲈的生长状况。研究发现，AKP过高，常伴随一些肝胆疾病^［26］，GOT、GPT与肝脏损伤有关^［27］，本试验结果发现黄连素组AKP、GPT显著降低，胆汁酸组GOT、GPT显著降低，这表明，添加黄连素和胆汁酸对大口黑鲈的肝脏有保护作用。血清总胆固醇是指血液中所有脂蛋白所含胆固醇之总和，其血清浓度可作为脂代谢的指标^［28-29］；血糖是血液中的葡萄糖的含量，其主要是反应机体糖的代谢是否存在异常^［30-31］。黄连素组和胆汁酸组大口黑鲈的血清总胆固醇和血糖均显著降低，血清中总胆汁酸显著升高，黄连素组HDL-C、LDL-C显著降低，胆汁酸组LDL-C显著降低，说明黄连素和胆汁酸能够降低大口黑鲈的血糖，促进脂肪代谢。这与Jadhav等的研究结果一致^{［10-11，13］}。并且本次研究的切片结果显示，饲料中添加黄连素和胆汁酸后，肝脏组织脂泡数量减少，空泡化明显改善，细胞脂肪减少，脂肪蓄积情况改善，与大口黑鲈的血清总胆固醇、LDL-C降低结果一致。黄连素组PC、PEPCK、G6P、PFK、HK、PK有显著升高，说明添加黄连素改善了大口黑鲈的血糖代谢。

溶菌酶有杀菌免疫功能，是生物体内重要的非特异性免疫因子，能催化水解细菌细胞壁致细菌溶解死亡而避免机体受细菌感染^［32］，黄连素组肠道LZM显著增加，说明添加黄连素对大口黑鲈的肠道免疫有积极作用。促炎因子（TNF-α、IL-6）所参与的炎症反应与糖尿病等疾病有密切联系^［33］，TNF-α是主要由巨噬细胞和单核细胞产生的促炎细胞因子，参与正常炎症反应和免疫反应。TNF-α在许多病理状态下产生增多，包括败血症、恶性肿瘤、心脏衰竭和慢性炎性疾病。机体有肠炎，促炎细胞因子TNF-α的表达量可能会增加。IL-6是促炎细胞因子，病毒性暴发型肝衰竭外周血细胞诱生TNF，IL-1活性升高^［34-35］，添加黄连素和胆汁酸，机体的TNF-α、IL-6减少，说明饲料中添加黄连素和胆汁酸减少了机体的炎症反应。与对照组相比，黄连素组和胆汁酸组肠壁较厚，肠道绒毛长度较长，光滑平坦，杯状细胞数量增加，嗜酸性颗粒细胞较少。研究表明，许多炎症性疾病与嗜酸性粒细胞增多有关^［36］，其越多炎症反应越严重，嗜酸性颗粒细胞减少，进一步印证了机体的炎症反应减少。SOD是氧清除剂，清除体内自由基，防御机体衰老和分子损伤，其生物活性与水产动物的免疫能力密切相关^［37-38］。GSH－PX可清除脂类氢过氧化物，减轻其对机体的损伤，预防脂类氧化，缓解细胞衰老^［39］。MDA是衡量氧化胁迫程度的常用指标之一，是膜脂过氧化最重要的产物之一，会引起蛋白质、核酸等生命大分子的交联聚合，且具有细胞毒性，它的产生还能加剧膜的损伤^［40-41］。本试验结果发现，与对照组相比，胆汁酸组SOD增加，黄连素组和胆汁酸组GSH－PX升高，CAT、MDA降低。因此，饲料中添加黄连素和胆汁酸可增强大口黑鲈的抗氧化能力和免疫能力。

肠道菌群是调节肠道健康的关键，参与各种代谢，在维持肠道稳定健康方面有重要的作用^［42-43］，一旦受到外界刺激，极易发生变化，肠道菌群失调会引起各种疾病的发生^［44-46］。胆汁酸可促进肝肠循环，改变肠道微生物菌群^［47］。肠道菌群在初级胆汁酸到次级胆汁酸的转化中起着重要作用，肠道菌群紊乱可能会导致胆汁酸代谢异常。胆汁酸-肠道菌群途径调节宿主肠道健康^［48-49］。3组大口黑鲈肠道微生物在门水平上主要由变形菌门、蓝细菌门、厚壁菌门、拟杆菌门和放线菌门等组成。与对照组相比，黄连素组和胆汁酸组厚壁菌门占比增加，厚壁菌门是一大类细菌，多数为革兰氏阳性。厚壁菌门很多厚壁菌可以产生芽孢，它可以抵抗脱水和极端环境。厚壁菌门与碳水化合物和蛋白质的吸收有关^［50］，厚壁菌门占比增高，表明对碳水化合物，蛋白质等吸收增多。与对照组相比，黄连素组和胆汁酸组变形菌门占比降低，变形菌门是细菌中最大的一门，包括很多病原菌^［51］，如大肠杆菌、沙门氏菌、霍乱弧菌、幽门螺杆菌等常见的种类。在哺乳动物中，肠道菌群失调通常伴随着变形菌门的升高，在某些肠道环境下，变形菌门可能会引起肠道炎症，与肠道健康程度密切相关^［52-53］。属水平上，黄连素组和胆汁酸组假单胞菌属占比降低，假单胞菌属感染被认为是鱼类中最常见的细菌感染^［54-55］，其中的荧光假单胞菌和铜绿假单胞菌在水产养殖中被视为病原微生物^［56］，与赵粉琴等^［57］的研究结果一致。本试验结果表明，添加黄连素和胆汁酸能够降低肠道致病菌的相对丰度，推测可能促进了大口黑鲈的机体健康，提高了其生长性能。

4 结论

在饲料中添加2 g/kg的黄连素或300 mg/kg的胆汁酸均能提高大口黑鲈的生长性能，改善其糖代谢性能，减少肝脏脂肪蓄积，有效降低因长期饲喂高含糖量饲料对其肝脏的损伤，增强机体免疫力，同时还能够降低其肠道致病菌群的相对丰度，改善肠道菌群结构组成。

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基金资助

广东省基础与应用基础研究基金项目(2020A1515110249)

国家自然科学基金青年科学基金项目(32002401)

广东省省级农业科技创新及推广项目(2022KJ150)