党参采后贮藏期间粉霉病病原菌鉴定及其生物学特性

Identification of pathogen and biological traits causing pink rot of Codonopsis pilosula during storage

摘要

目的 为探索引起新鲜党参采后贮藏期间粉霉病的病原，明确其发病规律，为新鲜党参采后病害控制提供理论依据。 方法 以采后新鲜健康党参为研究对象，通过形态学和分子生物学技术对新鲜党参采后粉霉病的病原菌进行分离、纯化、鉴定，并对影响粉霉病病原菌生长发育的因素进行分析。 结果 引起新鲜党参采后贮藏期粉霉病的病原菌为粉红单端孢菌（Trichothecium roseum）。该菌在65 ℃下10 min致死，温度25 ℃、pH中性偏酸、24 h黑暗，麦芽糖为碳源，蛋白胨为氮源时，菌落生长最好；在温度为25 ℃、pH中性偏酸、24 h光照，蔗糖为碳源，蛋白胨为氮源时，产孢量最多。 结论 确定了党参粉霉病病原为粉红单端孢菌，并明确了其最适温湿度、pH值、碳源、氮源、光照条件及致死温度等生物学特性，为进一步分析党参粉霉病的产毒种类、有效控制粉霉病的发生提供理论基础。

Abstract

Objective To study the pathogen that causes pink rot of Codonopsis pilosula during storage,to elicidate the pathogenesis of the disease，and to provide a theoretical basis for disease control of fresh C.pilosula. Method Fresh and healthy C.pilosula was selected as the material in this research and the pathogen causing pink rot of C.pilosula was isolated，purified and identified by morphological and molecular biological techniques.The factors affecting the growth and development of the pathogen were analyzed. Result Trichothecium roseum was the causal agent of pink rot of C.pilosula during storage.T.roseum was lethal at 65 ℃ for 10 min，and the colony grew best at 25 ℃，pH neutral partial acid，24 h darkness，maltose as carbon source，and peptone as nitrogen source.When the temperature was 25 ℃，pH neutral acid，24 h light，sucrose as carbon source，peptone as nitrogen source，the sporulation is the largest. Conclusion The pathogen causing pink rot of C.pilosula was identified as T.roseum，and the biological characteristics such as the optimum temperature and humidity，pH value，carbon and nitrogen sources，light conditions and lethal temperature were clarified，which provides the basis for further analysis of the toxin production causing pink rot in C.pilosula，effectively controlling of the occurrence of pink rot provides a theoretical basis.

Graphical abstract

关键词

党参 / 采后贮藏 / 粉霉病 / 粉红单端孢 / 生物学特性

Key words

Codonopsis pilosula / storage / pink rot / Trichothecium roseum / biological characteristics

党参（Codonopsis pilosula），常用药食同源的传统补益中药，隶属于桔梗科多年生草本植物^［1］。具有健脾肺、运中气、养血生津的功效，其药效可与人参相媲美^［2］。党参成分种类多样，包括糖类、多炔类、苷类、生物碱类及萜类等多种成分，据现代药理记载党参具有调节机体免疫力、抗氧化、保护胃肠道黏膜及抗溃疡抑菌、抗癌、延缓衰老等多种活性成分，在临床上应用广泛^［3-6］。

甘肃省以其独特的地理条件、生态气候条件和复杂多样的地形地貌，为中草药生长提供了先天的条件，素有“天然药库”美称^［7］。党参作为甘肃省道地药材，长期生长于特定地区的土壤中，随着生长及种植年限的增加，一些适应于本地区寄主植物以及自然环境的土传真菌、细菌、线虫逐年累积，导致道地药材的病虫害问题十分严重。病原真菌的侵染，不仅导致中药材的腐烂损失，还会在药材体内积累真菌毒素，严重降低中药材的质量，影响其治疗效果，甚至危害患者健康。

目前，关于党参病害报道：王艳等^［8］报道甘肃党参4种病害，分别是由Sphaerotheca codonopsis引起的白粉病、Septoria codonopsidis引起的霜霉病、Fusarium oxysporum引起的根腐病、Botrytis cinerea引起的灰霉病；刘兴元^［9］从湖北党参发现由Helicobasidium mompa引起的紫羽纹病；谢贤明等^［10］从川党参发现由Puccinia campanumoeae引起的锈病。而上述党参病害主要发生在田间生长阶段期间，对于新鲜党参采后贮藏期间的病害鲜见报道。采后贮藏期间，党参表面出现白粉色霉层，随着时间的延长，霉变组织处不断扩大，软腐坏死，腐坏的党参还会污染周围其他健康党参，这不仅严重影响党参的品质，还会减低党参的药用价值，甚至积累真菌毒素，严重危害消费者的身体健康。

基于此，本研究对甘肃岷县新鲜党参进行室温贮藏，待其自然发病，分析贮藏期间具有典型粉霉病的主要病原菌，将其病变组织进行分离纯化，回接验证，通过形态学和分子生物学技术对其病原菌进行鉴定，并进行生物学特性分析，该研究可为控制该病害提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 试验材料

新鲜党参样品购自甘肃省定西市岷县党参种植基地，采收后，装袋，24 h内带回甘肃农业大学理学院化学生物实验室。选取部分表面无机械损伤的新鲜健康党参置于15 ℃、50%RH的黑暗条件下储存，待其自然发病，每隔14 d观察其发病情况。

1.2 培养基制备

供试培养基：马铃薯葡萄糖培养基（PDA，马铃薯200 g，葡萄糖10 g，琼脂17 g，水1 000 mL）；察氏培养基：（NaNO₃ 3 g，KH₂PO₄ 1 g，KCl 0.5 g，MgSO₄·7H₂O 0.5 g，FeSO₄ 0.01 g，蔗糖30 g，琼脂17 g，蒸馏水1 000 mL）；碳源培养基：以葡萄糖、麦芽糖、β-环糊精、甘露醇、果糖替代察氏培养基中的蔗糖，其他相同；氮源培养基：以硫酸铵、酵母浸粉、蛋白胨、甘氨酸、尿素替代察氏培养基中的硝酸钠，其他相同。

1.3 病原菌分离纯化

选取具有典型粉霉病病害症状的党参组织，取病键交界处组织4 mm×4 mm，置于0.5%的次氯酸钠溶液中消毒5 min后，无菌蒸馏水漂洗3次，去除党参表面次氯酸钠残留，室温风干后接种于PDA培养基上，25 ℃黑暗处培养5~7 d，根据形态学特征，进行分离纯化，获得菌种，在PDA上进行反复传代纯化，直至得到单一分离菌种。

1.4 病原菌鉴定

1.4.1 形态学鉴定

将分离纯化得到的致病菌配制孢子悬浮液，接种于PDA培养基上，于25 ℃下恒温培养3~5 d，光学显微镜下观察菌丝体、菌落、及孢子梗形态，扫描电子显微镜下观察孢子形态，参照魏景超^［11］的《真菌鉴定手册》鉴定病原菌的种属。

1.4.2 分子生物学鉴定

将病原菌接种至PDA上培养7 d，收集真菌菌丝体，液氮中研磨成细粉。采用UNlQ-10柱真菌基因组DNA提取试剂盒（Sangon公司，中国上海），提取DNA，以真菌通用引物ITS1（5′-TCCGTAGGTGAACCTGCGG-3′）和ITS4（5′-TCCTCCGCTTATTGATATGC-3′）为扩增引物，进行PCR扩增。PCR反应体系为：总体积为50 μL，其中上下游引物各1 μL，模板DNA 1~2 μL，1×Taq PCR Mix 46~47 μL；PCR扩增程序为：94 ℃预变性5 min，94 ℃变性10 s，53 ℃退火10 s，72 ℃延伸30 s，3个循环，72 ℃保温5 min。扩增得到的片段由北京博迈德生物有限公司进行测序。将测得序列在NCBI的BLAST中搜索，并进行同源性分析，利用MEGA 7.0软件采用邻接法构建ITS系统发育树。

1.5 致病性测定

选取健康，表面无明显机械损伤或虫蛀的新鲜党参，0.5%的次氯酸表明消毒5 min，无菌蒸馏水漂洗3次，去除党参表面的次氯酸钠残留，室温下自然风干。将浓度为1×10⁶ CFU/mL的孢子悬浮液喷洒接种于上述消毒处理后的新鲜党参表面，黑暗处贮藏（15 ℃，50%RH）并记录其发病情况，30 d后分离出病原菌，从霉变党参组织中重新分离纯化菌种，根据柯赫氏法则，进行验证。

1.6 生物学特性分析

1.6.1 温度对病原菌生长及产孢量的影响

将分离纯化的孢子悬浮液分别接种于PDA上，分别置于温度为10、15、20、25、30、35 ℃的恒温培养箱培养7 d，观察菌落生长，采用十字交叉法测定菌落直径，并记录菌丝生长速率^［12］。分别加入10 mL无菌水于上述PDA平板中，用玻璃棒刮取其孢子，再加入无菌水，将孢子悬浮液浓度稀释至1×10⁶ CFU/mL，在血球计数板上测定产孢量，重复3次。

1.6.2 致死温度

配制浓度为1×10⁶ CFU/mL的孢子悬浮液，接种于PDA上，分别置于35、40、45、50、55、60、65 ℃水浴加热，恒温处理10 min。取2 μL孢子悬浮液接种于PDA中心处，恒温培养7 d。观察菌落生长，用十字交叉法测定菌落直径，记录其生长速率。重复3次。

1.6.3 光照对病原菌生长及产孢量的影响

取2 μL浓度为1×10⁶ CFU/mL的孢子悬浮液接种于PDA中心处，分别置于12 h光照12 h黑暗交替、24 h连续黑暗、24 h连续光照3个不同条件下培养7 d，观察其菌落，用十字交叉法测定菌落直径。用玻璃棒刮取其孢子，并加入无菌水，稀释孢子悬浮液浓度至1×10⁶ CFU/mL，用血球计数板法测定产孢量。重复3次。

1.6.4 pH对病原菌生长及产孢量的影响

用HCL和NaOH溶液调节PDA的pH值，取2 μL浓度为 1×10⁶ CFU/mL^{的孢子悬浮液，分别接种于pH值为4、5、6、7、8、9、10、11的PDA中心处，25 ℃恒温培养7 d，采用十字交叉法测定菌落直径。取10 mL无菌水于上述PDA平板中，用玻璃棒刮取其孢子，再加入无菌水，将孢子悬浮液浓度稀释至1×106 CFU/mL，以血球计数板测定产孢量。重复3次。}

1.6.5 碳、氮源对病原菌生长及产孢量的影响

以察氏培养基为对照组，将麦芽糖、蔗糖、β-环糊精、甘露醇、葡萄糖和果糖设为不同碳源，分别接种2 μL 浓度为1×10⁶ CFU/mL的孢子悬浮液于上述不同碳源的察氏培养基，恒温培养7 d，观察其菌落生长，用十字交叉法测定菌落直径。加入10 mL无菌水洗下孢子，用玻璃棒刮取其孢子，再加入无菌水，稀释浓度为1×10⁶ CFU/mL的孢子悬浮液，在血球计数板上测定产孢量。重复3次。

以察氏培养基为对照组，将蛋白胨、酵母、硫酸铵、甘氨酸和硝酸钠设为不同氮源，分别接种2 μL 浓度为1×10⁶ CFU/mL的孢子悬浮液，恒温培养7 d。观察其菌落生长，用十字交叉法测定菌落直径。加入10 mL无菌水洗下孢子，用玻璃棒刮取其孢子，再加入无菌水，将孢子悬浮液稀释至1×10⁶ CFU/mL，在血球计数板上测定产孢量。重复3次。

1.7 相对湿度对孢子萌发的影响

取2 μL 1×10⁶ CFU/mL^{孢子悬浮液接种于PDA培养基上，然后置于相对湿度为23%、33%、43%、53%、63%、73%、83%、93%的培养箱，于25 ℃恒温培养7 d，观察其菌落生长。加入10 mL无菌水洗下孢子，用玻璃棒刮取其孢子，再加入无菌水，将孢子悬浮液稀释至1×106 CFU/mL，用血球计数板测定产孢量。重复3次。}

2 结果与分析

2.1 病害症状

贮藏期间，党参出现不同程度的病变，发病初期，党参表面组织出现分散的白粉状毛絮；发病中期，毛絮不断扩大并相互连结成白色粉状霉层；发病后期，粉状霉层进一步扩大遍布整株党参组织，霉层下的组织出现褶皱、软塌，颜色加深。

2.2 病原菌分离和致病性测定

通过组织分离法从发病的新鲜党参组织进行分离纯化，得到2株病原菌，其中一株的病情指数较高，为55%，命名为LBY-3。将病原菌孢子悬浮液喷洒回接至健康党参表面，黑暗条件下（15 ℃，50%RH）培养。结果表明LBY-3病原菌回接的党参呈现不同程度的病变，发病期出现白色粉状霉层，霉层下的组织逐渐变褐、软腐坏死（图2-C），与自然发病症状相似（图2-B）。再从该发病党参上取病健交界处组织于PDA上培养，分离纯化，得到了相同的菌株。

2.3 形态学鉴定

通过多次分离纯化，在PDA培养基上培养，得到单一菌落，菌落呈橘粉色（图3-A），背面呈粉红色（图3-B），菌落呈年轮状。分生孢子梗直立不分支，无色，顶端膨大，大小为（2~3.5） μm×（100~160）μm；分生孢子疏松地聚集在孢子梗顶端，倒卵形或梨形，无色，双胞，大小为（5.8~7） μm×（10~14） μm。根据形态学结果，初步鉴定为Trichothecium roseum（图3）。

2.4 分子生物学鉴定

扩增所得产物经2%琼脂糖凝胶电泳发现，在500~750 bp之间得到1条清晰的条带，经测序分析得知，该序列的长度为589 bp。将该序列在NCBI中的BLAST进行搜索，得到250个同源序列，选取合适的序列，用MEGA7软件构建ITS系统发育树（图5）。由图可见，病原菌LBY-3与MW478332.1，MW478331.1，MW478330.1，在同一个分支上，且同源性为99%。结合形态学和分子生物学结果，鉴定该病原菌LBY-3为Trichothecium roseum。

2.5 粉红单端孢的生物学特性分析

2.5.1 温度对粉红单端孢菌落生长和产孢的影响

粉红单端孢在10~35 ℃均能生长，温度为10 ℃ 和35 ℃时，菌落生长较慢，最适生长温度为20~25 ℃，且25 ℃时菌落直径达到最大，温度达到30 ℃时，菌丝生长变慢（图6）。粉红单端孢在10 ℃和35 ℃时不产孢，在20~25 ℃时，产孢量明显升高，25 ℃时产孢量最高，30 ℃时，产孢量下降。由此表明，粉红单端孢的最适生长和产孢温度均为25 ℃。

2.5.2 致死温度

将粉红单端孢在35~60 ℃均能生长，温度大于55 ℃时，病原菌生长速率明显降低，在60 ℃时，菌落直径为1.67 mm，生长速率为0.24 mm/d，在65 ℃时，菌落直径为0 mm，这表明65 ℃处理10 min可使该病原菌致死（图7）。

2.5.3 光照对粉红单端孢菌落生长和产孢的影响

不同光照条件对粉红单端孢菌落的生长和产孢具有显著的影响（图8）。病原菌在24 h连续黑暗、12 h光照12 h黑暗、24 h连续光照3个不同光照条件下均能生长，菌落直径分别为70.8、68.6、64 mm，24 h连续黑暗条件下的菌落生长最快，12 h光照12 h黑暗条件下的菌落生长次之，24 h连续光照下菌落直径最小；3个不同光照条件下产孢量分别为：2.2×10⁶、1.9×10⁶、1.38×10⁶ CFU/mL，24 h连续光照条件下该病原菌的产孢量最高，12 h黑暗12 h光照条件下该病原菌产孢量最低。这说明黑暗条件有利于粉红单端孢菌落的生长，而光照条件有利于该病原菌的产孢。

2.5.4 pH对粉红单端孢菌落生长和产孢的影响

粉红单端孢在pH 4~11范围内均能生长及产孢，这说明该病原菌对pH的适应范围较宽（图9）。pH=7时，菌落直径最大，pH=6时菌落直径次之，分别为：76.5、72.63 mm；pH=6时，该病原菌产孢量最高，pH=7时次之，产孢量分别为：为4.13×10⁶、2.75×10⁶ CFU/mL。因此，粉红单端孢在中性偏酸的环境中更容易生长和产孢。

2.5.5 碳源对粉红单端孢菌落生长和产孢的影响

粉红单端孢在以察氏培养基为基础的不同碳源的培养基上均能生长，菌落直径大小：麦芽糖>蔗糖>β-环糊精>甘露醇>葡萄糖>果糖，当碳源为麦芽糖时，菌落直径最大，蔗糖次之，果糖菌落直径最小（图10）。该病原菌在4种碳源（蔗糖、葡萄糖、麦芽糖、甘露醇）条件下均能产孢，产孢量大小：蔗糖>葡萄糖>麦芽糖>甘露醇，即当碳源为蔗糖时，粉红单端孢产孢量最高，葡萄糖次之，该病原菌在以β-环糊精和果糖为碳源的培养基上不产孢。由此可见，麦芽糖利于粉红单端孢的生长，而蔗糖利于该病原菌产孢。

2.5.6 氮源对粉红单端孢菌落生长和产孢的影响

粉红单端孢在以察氏培养基为基础的不同氮源条件下均能生长，菌落直径大小：蛋白胨>酵母>硫酸铵>甘氨酸>硝酸钠>尿素，分别为：65.33、54.33、50、41.5、39.67、14.83 mm，蛋白胨为氮源时菌落直径最大，酵母次之，尿素的菌落直径最小（图11）。该病原菌在5种氮源（蛋白胨、硫酸铵、酵母、甘氨酸、硝酸钠）条件下均能产孢，产孢量：蛋白胨>硫酸铵>酵母>甘氨酸>硝酸钠，即当氮源为蛋白胨时，产孢量最高，硫酸铵次之，而当氮源为尿素时其不产孢。因此可见，蛋白胨适合粉红单端孢的生长与产孢，而尿素不适合该病原菌的生长及产孢。

2.5.7 相对湿度对粉红单端孢孢子萌发的影响

粉红单端孢在相对湿度小于53%时，孢子萌发率较低，小于35%，相对湿度在53%~65%时，孢子萌发率显著提高，当相对湿度为65%时，孢子萌发率为60.3%；当相对湿度为93%时，孢子萌发率达90.6%（图12）。由此可见，不同的相对湿度对粉红单端孢分生孢子的萌发具有显著的影响，相对湿度越高，孢子萌发率越高。

3 讨论

本文对甘肃岷县新鲜党参采后储存期间粉霉病的主要致病菌进行分离纯化及致病性检测，并结合形态学和分子生物学技术分析，确定引起新鲜党参采后储存期间粉霉病的主要致病菌为粉红单端孢霉（Trichothecium roseum）。

粉红单端孢霉（Trichothecium roseum）是一种世界性分布的病原菌，广泛存在于腐烂的果蔬、土壤和空气中^［13］。本研究首次从采后贮藏期间粉霉病的中药材党参组织中分离纯化得到。该病原菌主要在采后运输、储存期间，通过产品伤口或自然孔口侵入，造成产品感病腐烂^［14］。目前国内外关于粉红单端孢引起病害的报道主要在果蔬上，且病害严重程度逐年增加。如T.roseum可引起甜瓜粉霉病^［15］、山桃红粉病^［16］、苹果霉心病^［17］、辣椒粉腐病^［18］、番茄红粉病^［19］等，该真菌具有很强的环境适应能力、产孢速度快，产孢量大。T.roseum通过果实伤口侵染果实，造成果肉变苦，影响果实风味物质的释放，且其产生的次级代谢产物单端孢霉烯毒素具有致癌、致畸、致突变作用^［20-21］。T.roseum的侵染可经空气、风雨、昆虫及田间操作感病在田间残体上^［22］，引发农作物感病，进而影响农作物的品质。目前关于T.roseum侵染的报道主要发生在果蔬上，然而，T.roseum侵染采后中药材鲜见报道，因此有必要对新鲜党参采后发粉霉病进一步分析研究。

通过形态学和分子生物学技术对新鲜党参采后贮藏期间粉霉病的粉红单端孢（T.roseum）进行分析。分生孢子梗直立，无色，不分枝，有分隔，无色，顶端稍膨大，分生孢子顶生成团，无色双胞，长圆至梨形，大小为5.8~7.7 μm×10~17.5 μm。这与高智谋^［23］从棉铃分离出的T.roseum，分生孢子梗细长直立，顶端略弯曲，不分枝，有2~3个分隔，分生孢子单生或丛生于分生孢子梗顶端，梨形或卵圆形，无色或淡红色，双胞，分隔处略缢缩，大小8.9~27.5 μm×6.1~12.2 μm基本相一致。张忠明^［24］从甜瓜分离出的T.roseum，分生孢子梗直立，不屈曲，不分枝，顶生分生孢子多数为1个，分生孢子长圆形或洋梨形，双细胞，无色，分生孢子大小长18.0~19.2 μm（平均18.5 μm），也与本研究结果基本一致。由此表明，从不同寄主植物分离得到的相同病原菌，其孢子的形态结构上基本相同，但也存在略微的差异。

生物学特性试验表明，粉红单端孢（T.roseum）致死温度为65 ℃，处理10 min；生长的最适宜温度为25 ℃、最适宜pH值为7，最适产孢温度为25 ℃，最适宜pH为6。这与张娜娜^［25］从板栗红粉病中分离得到的T.roseum的生长特性相似，T.roseum病原菌在10 ℃~30 ℃范围内均能生长，但低温下菌丝生长缓慢，5 ℃停止生长，适宜生长温度为25 ℃；pH 5~12环境中菌丝均能生长，pH 8最适生长，在pH 7时产孢量最多。杨济徽^［26］报道分离自龙眼红粉病中的粉红单端孢，菌落致死温度为54 ℃、10 min，分生孢子致死温度为52 ℃、10 min； 菌落生长适宜pH值为3~12，最适pH值为4~6。由此可见，T.roseum最适生长温度为25 ℃，对pH的适应范围较宽，致死温度由于不同寄主和地区略有差异。

本研究发现，蔗糖作为碳源时最适该菌生长和产孢，麦芽糖作为碳源时最适该菌生长；最佳的氮源是蛋白胨和硫酸铵。高智谋等^［23］的报道表明，T.roseum病原菌在以甘油为碳源的培养基上生长速率最快，其次为蔗糖和葡萄糖，该病菌在以蛋白胨为氮源的培养基上生长和产孢最佳。本试验在全黑暗条件下有利于该菌生长，在全光照条件下有利于该菌产孢。黎鸿慧等^［27］的报道中从棉铃分离出T.roseum，病原菌孢子在完全黑暗、完全光照和光暗交替的条件下均可萌发，完全黑暗最适萌发，完全黑暗和光暗交替有利生长和产孢。王军节等^［28］的报道中从甜瓜分离出T.roseum，病原菌孢子在全黑暗条件下最适菌丝生长，全黑暗和光暗交替条件下最适产孢，黑暗的高湿环境条件下最适宜孢子萌发。由此表明，从不同病害的寄主体内分离得到的病原菌，其最适碳、氮源，光照条件均存在显著差异。

此外，不同的相对湿度对粉红单端孢分生孢子的萌发也具有显著的影响，相对湿度越高，孢子萌发率越高。而甘肃省党参主要种植在岷县，岷县地处甘肃省南部、青藏高原边缘，气候属温带半湿润向高寒湿润气候过渡带，高寒阴湿^［29］。该地区10月下旬，天气情况是低温高湿，降雨增多，这给病原菌孢子的萌发，及对寄主植物的入侵提供了便利的条件，因此，为了防治党参霉病，应该尽可能降低党参组织内部含水量，控制病原菌孢子的萌发和菌落的生长。同时，提供干燥、通风的环境进行贮藏。

4 结论

通过形态学和分子生物学技术分析，确定引起新鲜党参采后粉霉病的主要致病菌为粉红单端孢霉（Trichothecium roseum）。该病原菌的分生孢子的致死温度为65 ℃、10 min；最适合生长条件：25 ℃、pH=7、24 h连续黑暗、麦芽糖为碳源、氮源为蛋白胨的条件下最适合生长，最适合产孢条件：25 ℃、pH=7、24 h连续光照、蔗糖为碳源、蛋白胨为氮源的条件下最适合产孢。霉变党参在贮藏过程中，其组织中是否存在真菌毒素的积累以及是否会影响党参的主要功能成分尚需进一步研究。

参考文献

[1] 徐雪芬，倪春辉，李惠霞，等.党参白粉病新病原鉴定及其分生孢子的萌发特性［J］.北方园艺，2020（15）：111-117.

[2] 王超楠，高军，王隶书，等.中药党参药效活性成分的质量控制研究进展［J］.中国药师，2021，24（1）：127-132.

[3] 张涛，杨婉羚，曹喻，等.党参多糖的分离纯化及抗衰老作用研究［J］.江苏农业科学，2018，46（23）：235-237.

[4] Zhao X， Liang Y， Yang L，et al.First report of root rot caused by the Fusarium oxysporum species complex on Codonopsis pilosula in China［J］.Plant Disease，2021，105（11）：3742.

[5] 詹梦茹，李贵花，郭旭春.党参属植物的化学成分及药理活性研究进展［J］.山东化工，2021，50（19）：79-82.

[6] 刘付松，陈翠莎，孙佩，等.不同品种及采收期党参药材中5种有效成分含量的比较研究［J］.中国药房，2020，31（14）：1677-1682.

[7] 柳娜，刘越敏，张旭东，等.甘肃道地药材当归、党参及黄芪农药使用现状分析及解决对策［J］.甘肃科技，2019，35（24）：1-3.

[8] 王艳，陈秀蓉，王引权，等.甘肃省党参病害种类调查及病原鉴定［J］.山西农业科学，2011，39（8）：866-868.

[9] 刘兴元.党参紫纹羽病的发生与防治［J］.安徽农业科学，2006（14）：3392.

[10] 谢贤明，杨成前，刘燕琴，等.川党参锈病防治技术［J］.现代中药研究与实践，2012，26（6）：14-15.

[11] 魏景超.真菌鉴定手册［M］.上海：科学技术出版社，2004.

[12] 杨琴，刘明军，张桂香，等.野生絮缘蘑菇ITS鉴定及其生物学特性［J］.甘肃农业大学学报，2020，55（6）：104-110.

[13] 王鹏，王军节，李贞彪.适用于蛋白质组分析的粉红单端孢菌蛋白提取方法的建立［J］.华北农学报，2019，34（3）：209-216.

[14] 邓惠文，毕阳，葛永红，等.采后BTH处理及粉红单端孢（Trichothecium roseum）挑战接种对厚皮甜瓜果实苯丙烷代谢活性的诱导［J］.食品工业科技，2013，34（1）：323-326.

[15] Gong D， Bi Y， Li S G，et al. Trichothecium roseum infection promotes ripening of harvested muskmelon fruits and induces the rel ease of specific volatile compound［J］.Journal of Plant Pathology，2019，101（3）：529-538.

[16] Li Y B， Zhang Z P， Luo L X，et al.First report of Trichothecium roseum causing pink fruit rot of Prunus davidiana in China［J］.Plant Disease，2020，104（9）：2520.

[17] Dai P B， Jiang Y Y， Liang X F，et al. Trichothecium roseum enters ‘Fuji’ apple cores through stylar fissures［J］.Plant Disease，2020，104（4）：1060-1068.

[18] Lin S H， Wang J H， Wu A B.A post-harvest pink rot of pepper caused by Trichothecium roseum in China［J］.Plant Disease，2016，100（10）：2164.

[19] 刘文钰，刘丽，李竑阳.番茄红粉病病菌的生物学特性研究［J］.上海蔬菜，2016，（6）：36-38.

[20] 杨波.海南芒果采后真菌病害调查及病原鉴定［D］.海口：海南大学，2013.

[21] 侯佳宝，李灿婴，魏美林，等.磷酸钠对粉红单端孢的离体抑菌作用研究［J］.保鲜与加工，2020，20（2）：1-6.

[22] 于荣利，文景芝，秦旭升.中草药根部腐烂病害研究现状及展望［J］.东北农业大学学报，2003（1）：95-99.

[23] 潘月敏，高智谋，纪文飞，等.培养基营养条件对棉铃红粉病菌菌丝生长和孢子形成的影响［J］.西北农林科技大学学报（自然科学版），2005（S1）：68-72.

[24] 张忠明，毕阳.粉红聚端孢菌的生物学特性研究［J］.甘肃农业大学学报，2006（4）：86-90.

[25] 张娜娜，李双民，温晓蕾，等.板栗红粉病病原菌鉴定及其生物学特性研究［J］.中国农业科技导报，2021，23（7）：145-152.

[26] 杨济徽.一种龙眼新病害：红粉病的病原菌鉴定、致病性与防治技术［D］.海口：海南大学，2016.

[27] 黎鸿慧，王兆晓，赵贵元.棉铃红粉病在河北中南部的发生规律及防治［J］.中国棉花，2011，38（8）：45.

[28] 王军节，赵鲁迺克，范春霞，等.甜瓜粉霉病病原菌生物学特性及其寄主范围测定［J］.中国瓜菜，2021，34（10）：20-25.

[29] 刘光龙.1997-2016年岷县气候变化特征及周期分析［J］.现代农业科技，2020（11）：215-217.

基金资助

国家自然科学基金项目(32060566)