临床型奶牛乳房炎乳腺组织中LDHA和PFKP的表达定位及功能分析

摘要

【目的】探究临床型奶牛乳房炎乳腺组织中乳酸脱氢酶A(Lactate dehydrogenase A,LDHA)和血小板型磷酸果糖激酶（Platelet phosphofructose kinase,PFKP）的分布、表达规律及其潜在功能。【方法】采集泌乳期健康（Control,C,n=3）和患临床型乳房炎（clinical mastitis,CM,n=3）荷斯坦奶牛乳腺组织，通过苏木精-伊红（Hematoxylin-eosin,H&E）染色观察奶牛乳腺组织病理变化；免疫组织化学（immunohistochemical,IHC）染色、免疫荧光（Immunofluorescence,IF）染色和实时荧光定量聚合酶链式反应（quantitative real-time PCR,qRT-PCR）分析奶牛乳腺组织中LDHA和PFKP的分布和表达规律；基于非依赖型模式（data-independent acquisition,DIA）蛋白质组学数据，通过生物信息学分析LDHA和PFKP潜在功能。【结果】H&E染色结果表明，C组乳腺结构完整，腺泡充盈，CM组乳腺结构模糊，腺泡塌陷，且有炎性细胞浸润；IHC和IF结果显示LDHA和PFKP蛋白主要定位于乳腺上皮细胞的胞质；qRT-PCR结果显示，与C组相比，CM组乳腺中LDHA和PFKP基因表达水平显著上调（P<0.01）；生信预测分析发现LDHA和PFKP可能通过酸代谢、糖代谢等生物学途径参与奶牛临床型乳房炎的发生。【结论】LDHA与PFKP参与奶牛乳房炎的发病过程，其高表达可加剧乳房炎症反应，这为深入研究奶牛乳腺组织中LDHA和PFKP的功能及机制提供参考。

关键词

临床型奶牛乳房炎 / 糖酵解途径 / LDHA / PFKP / DIA蛋白质组学