抗菌药物对日本鳗鲡肠道N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶的影响

摘要

【目的】研究抗菌药物对日本鳗鲡肠道N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶（NAGase,EC3.2.1.52）的影响，探讨抗菌药物与酶之间相互作用的分子机理。【方法】利用酶促反应动力学和酶抑制作用动力学研究方法，探讨17种抗菌药物对日本鳗鲡肠道NAGase的影响；从酶蛋白荧光发射光谱变化规律，分析抗菌药物与NAGase酶蛋白的相互作用机理。【结果】磺胺、羧苄青霉素、盐酸金霉素和甲砜霉素对NAGase没有明显影响，磺胺喹噁啉、青霉素钠、盐酸强力霉素、氯霉素以及0.5 mg/mL磺胺甲基异噁唑对NAGase有激活效应，而磺胺嘧啶、恩诺沙星、盐酸四环素、土霉素、硫酸庆大霉素（GEN）、妥布霉素（TOB）、硫酸卡那霉素（KAN）和硫酸新霉素（NEO）对NAGase则有不同程度的抑制作用。其中4.0 mg/mL的TOB、KAN和NEO可分别使NAGase活力下降88.22%、84.00%和46.47%，这三种氨基糖苷类抗生素对NAGase有较强的抑制效应。KAN和NEO对NAGase的抑制均呈可逆的竞争性抑制作用，KAN、NEO各自与NAGase作用后，NAGase内源荧光发射强度均明显下降，说明NAGase空间构象发生了改变；但是，NAGase荧光发射峰没有发生位移，即酶蛋白内核的疏水性不变。【结论】不同抗菌药物对日本鳗鲡肠道NAGase的调控作用存在差异。

关键词

抗菌药物 / 日本鳗鲡 / N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶 / 抑制作用 / 构象变化