化癥散积方联合顺铂对HepG2肝癌细胞的增殖和迁移的影响

摘要

目的 通过单独使用化癥散积方（HZSJ）或与顺铂（cisplatin, DDP）联合应用干预Hep G2肝癌细胞的增殖和迁移，以探讨其治疗肝癌的潜在机制。方法 将Hep G2肝癌细胞分为空白对照组、缺氧模型组、DDP组、HZSJ组、HZSJ+DDP组，采用CoCl₂法诱导缺氧环境。通过MTT法、流式细胞术和细胞划痕试验验证HZSJ联合DDP对Hep G2肝癌细胞增殖、凋亡和迁移的影响。采用酶联免疫吸附测定（ELISA）检测凋亡相关因子；网络药理学进行靶点预测；蛋白免疫印迹法（Western blot）检测HZSJ联合DDP对Hep G2肝癌细胞中低氧诱导因子（HIF-1α）和血管内皮生长因子（VEGF）表达的影响。结果 HZSJ和DDP可以显著抑制Hep G2肝癌细胞的增殖，并且HZSJ与DDP具有协同作用，降低DDP的有效浓度；当低浓度DDP和HZSJ联合应用时，Hep G2肝癌细胞的早期和晚期凋亡数量显著增加，Bax/Bcl-2的比值显著增加，Cleaved-Casp-3的表达水平也显著增加；低浓度DDP不影响Hep G2肝癌细胞的迁移，而高浓度HZSJ可抑制Hep G2的迁移，当两者联合应用时能够显著降低Hep G2肝癌细胞的迁移率；基于STRING数据库构建HZSJ潜在靶点网络图，确定了HIF信号通路是Hep G2肝癌细胞增殖和迁移的主要调节通路；Western blot结果表明，HZSJ和低浓度DDP联合应用时，HIF-1α和VEGF的表达水平显著降低。结论 HZSJ可以帮助DDP抑制Hep G2肝癌细胞的增殖和迁移，两者协同促进Hep G2肝癌细胞凋亡，并调节凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2、Cleaved-Casp-3以及迁移相关蛋白HIF-1α和VEGF。

关键词

中医药 / 细胞增殖 / 细胞凋亡 / 细胞迁移 / 肝癌

基金资助

国家自然科学基金项目（81804007）; 吉林省自然科学基金项目（20200201590JC）