茯苓多糖通过下调lncRNA GAS5表达抑制TNF-α诱导的气道平滑肌细胞重构

摘要

目的 探究茯苓多糖（poria cocos polysaccharides,PCP）对肿瘤坏死因子α(airway smooth muscle cells,TNF-α)刺激下的气道平滑肌细胞（ASMCs）的增殖、迁移和细胞外基质（ECM）沉积的影响及长链非编码RNA生长阻滞特异性转录本5(lnc RNA GAS5)在其中的作用。方法 采用TNF-α处理ASMCs来建立哮喘细胞模型。将沉默GAS5的si RNA(si-GAS5)及阴性对照组si-NC转染入ASMCs中，并将其分为：Control组，TNF-α+si-NC组，TNF-α+si-GAS5组和TNF-α+si-NC+PCP组。CCK-8法检测各组ASMCs的增殖活力，Western blot检测细胞中增殖相关蛋白PCNA、Ki67和ECM沉积相关蛋白Collagen Ⅰ、Collagen Ⅱ、MMP-9与TIMP-1的表达，Transwell法检测各组细胞的迁移能力。结果 与Control组比较，TNF-α+si-NC组AMSCs中GAS5表达、细胞的增殖活力与迁移和细胞中PCNA、Ki67、Collagen Ⅰ、Collagen Ⅱ、MMP-9蛋白表达均显著增加（P <0.05），而细胞中TIMP-1蛋白表达明显降低（P <0.05）；与TNF-α+si-NC组比较，TNF-α+si-NC+PCP组中GAS5表达、细胞的增殖活力与迁移和细胞中PCNA、Ki67、Collagen Ⅰ、Collagen Ⅱ、MMP-9蛋白表达均显著降低（P <0.05），而细胞中TIMP-1蛋白表达明显升高（P <0.05）；与TNF-α+si-GAS5组比较，TNF-α+si-NC+PCP组的上述检测指标均无明显改变（P> 0.05）。结论 PCP可通过抑制细胞增殖、迁移和ECM沉积来改善TNF-α诱导的ASMCs功能改变，这可能与茯苓多糖降低了ASMCs中GAS5/mi R-10a表达的作用有关。

关键词

茯苓多糖 / lncRNA GAS5 / 气道平滑肌细胞 / 细胞增殖

基金资助

湖北省中医药管理局中医药科研项目(ZF2023F147)