芪地糖肾方及自噬抑制对糖尿病小鼠肾小管间质纤维化的影响

摘要

目的 探讨芪地糖肾方（Qi Di Tang Shen granules,QDTS）对糖尿病（diabetes mellitus,DM）小鼠肾小管间质纤维化（tubulointerstitial fibrosis, TIF）的改善作用与自噬调节作用的相关性。方法 自发性2型DM db/db小鼠随机分为模型组、卡格列净组、中药组、中药+氯喹组，另取db/m小鼠作为对照组。卡格列净组予12.9 mg/kg卡格列净灌胃，中药组予1.3 g/kg芪地糖肾方颗粒灌胃，中药+氯喹组灌胃同中药组，同时予自噬抑制剂氯喹25 mg/kg腹腔注射，隔日1次，正常组与模型组予双蒸水灌胃，干预14周。观察小鼠尿液肾损伤分子-1(KIM-1)、中性粒细胞明胶酶相关载脂蛋白（NGAL）水平；肾脏病理变化，计算肾组织纤维化面积及Ⅰ型胶原蛋白（Col-Ⅰ）表达水平；肾脏纤维化信号通路TGF-β/Smad3蛋白表达及活性。结果 治疗14周后，与模型组比较，中药组肾小管间质纤维化程度减轻（P <0.01）,Col-Ⅰ表达水平明显降低（P <0.001）；尿KIM-1、NGAL水平显著降低（P <0.05、P <0.05），肾TGF-β1、Smad3、p-Smad3表达明显下调（P <0.05、P <0.01、P <0.05），但卡格列净组尿KIM-1、NGAL水平无显著变化（P> 0.05）；与中药组比较，中药+氯喹组肾小管间质纤维化程度加重（P <0.01）,Col-Ⅰ表达水平明显升高（P <0.001）；尿KIM-1、NGAL水平显著升高（P <0.001、P <0.05）,p-Smad3表达水平升高。结论 芪地糖肾方能够减轻DM造成的肾小管损伤，抑制TGF-β/Smad3信号通路，减轻肾小管间质纤维化，其作用优于卡格列净。自噬抑制可以逆转芪地糖肾方对DM肾脏的保护作用，表明芪地糖肾方抗肾纤维化作用与自噬调节有关。

关键词

糖尿病肾病 / 芪地糖肾方 / 肾小管间质纤维化 / 自噬 / TGF-β₁ / Smad3