淫羊藿苷介导TNC/Wnt/β-catenin信号通路干预NRK-49F细胞对肾纤维化的研究

摘要

目的 探讨淫羊藿苷是否具有缓解Tenascin-c(TNC)诱导肾纤维化模型的作用以及对Wnt/β-catenin 信号通路的影响。方法 用CCK8法检测不同浓度淫羊藿苷对 NRK-49F细胞干预，比较各组细胞生长情况。TNC诱导肾成纤维细胞制作肾纤维化模型，干预48 h后，采用 RT-qPCR 法检测Wnt/β-catenin 信号通路相关基因α-SMA、MMP-7、Collagen Ⅲ的 mRNA 相对表达量以及采用 Western blot 法检测Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白α-SMA、Vimentin、Collagen Ⅲ 的蛋白相对表达量。结果 CCK8法结果显示，在作用24 h 、48 h、72 h时，各浓度组细胞活力与对照组比较差异均具有统计学意义。通过计算，后续实验淫羊藿苷选取的作用时间为48 h，干预浓度为1.938 mmol/L。RT-qPCR法结果表明，在模型组中，Collagen Ⅲ、MMP-7、α-SMA的mRNA含量比对照组要高，治疗组Collagen Ⅲ，MMP-7，α-SMA mRNA水平较模型组降低，具有统计学意义。Western blot法结果表明，在模型组中，Collagen Ⅲ、Vimentin、α-SMA的蛋白质含量明显高于对照组，治疗组的Collagen Ⅲ、Vimentin、α-SMA与模型组比蛋白含量下降，差异有统计学意义。结论 淫羊藿苷在TNC诱导的肾纤维化中具有肾保护作用，这可能主要与抑制细胞增殖和纤维化基因表达有关。

关键词

淫羊藿苷 / 急性肾损伤 / 慢性肾脏病 / Wnt/β-catenin / 肾纤维化 / Tenascin-c(TNC)

基金资助

广西壮族自治区中医药局自筹经费科研课题(GZZC2019107)