基于PI3K/AKT/BAD信号通路探讨姜黄对肝纤维化的作用机制研究

摘要

目的 采用网络药理学技术与体内实验探讨姜黄在干预肝纤维化方面的作用机制。方法 使用TCMSP、Pub Chem、Swiss Target Predicition、Gene Card和OMIM等数据库获得姜黄中主要活性成分与肝纤维化相关潜在靶点，进行交集靶点基因富集分析。本研究以50%四氯化碳（CCl₄）橄榄油为主要成分，以大鼠为研究对象，持续8周，建立老年大鼠肝纤维化动物模型，并进行药物干预。给药结束后，检测血清中丙氨酸氨基转移酶（ALT）和天冬氨酸氨基转移酶（AST）活性及肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-6 （IL-6）水平；测定肝组织超氧化物歧化酶（SOD）活性及丙二醛（MDA）；通过肝组织油红O染色观察脂质积累；实时荧光定量逆转录聚合酶链反应（qRT-PCR）及蛋白质印迹法（Western blot法）检测肝脏组织中蛋白激酶B（AKT）、Bcl-2细胞死亡拮抗剂（BAD）、Bcl-2相关X蛋白（Bax）、B细胞淋巴瘤2（Bcl-2） 的mRNA及蛋白表达。结果 姜黄有效成分与肝纤维化交集靶点93个，核心靶点为AKT1、STAT3、EGFR、PPARG、Bcl-2等。姜黄中剂量与高剂量组对ALT、AST、IL-6、TNF-α、SOD、MDA均有显著影响。与模型组比较，各给药组大鼠肝脏中Bcl-2 mRNA表达显著降低（P<0.01），BAD、Bax mRNA表达显著升高（P<0.01）；姜黄中、高剂量组大鼠肝脏中AKT mRNA 表达显著降低（P<0.01）；各给药组肝脏组织中Bcl-2、AKT蛋白水平显著降低（P<0.01），BAD蛋白表达显著上调（P<0.01）；姜黄中、高剂量组大鼠肝脏组织中Bax蛋白表达显著上调（P<0.01）。结论 网络药理学预测姜黄可通过多种途径干预肝纤维化，体内实验结果表明姜黄可以改善CCl₄引起的大鼠肝纤维化，其机制可能与姜黄调节PI3K/AKT/BAD信号通路相关，为临床试验提供重要数据支持。

关键词

姜黄 / 网络药理学 / 肝纤维化 / 油红O染色 / PI3K/AKT/BAD