基于SIRT5探讨隔药灸调控结肠炎相关性结肠癌机制

摘要

目的 从沉默信息调节因子5(SIRT5)去琥珀酰化修饰观察隔药灸对结肠炎相关性结肠癌(CAC)葡萄糖代谢中丙酮酸激酶M 2(PKM2)和琥珀酸脱氢酶B(SDHB)的影响。方法 将SD大鼠随机分为空白组、CAC组、生理盐水组、SIRT5抑制剂组和隔药灸组。采用AOM/DSS制备CAC大鼠模型。生理盐水组采用0.9%氯化钠溶液灌胃，SIRT5抑制剂组采用巴柳氮钠水溶液灌胃，隔药灸组取“天枢”“气海”进行隔药灸，均干预30d。观察结肠成瘤率、肿瘤负荷和病理学改变；WB检测结肠组织SIRT5、PKM2和SDHB蛋白表达；免疫沉淀富集结肠组织PKM2和SDHB蛋白，WB检测PKM2和SDHB琥珀酰化修饰水平；ELISA检测结肠组织乳酸、琥珀酸和三磷酸腺苷(ATP)含量。结果 与空白组比较，CAC组结肠肿瘤负荷增加；结肠上皮细胞排列紊乱，高度异形增生；结肠组织SIRT5和PKM2蛋白表达升高，SDHB蛋白表达降低；结肠组织PKM2和SIRT5琥珀酰化修饰水平降低；结肠组织乳酸、琥珀酸和ATP含量升高。与CAC组比较，SIRT5抑制剂组和隔药灸组结肠肿瘤负荷降低；结肠腺体萎缩，局部可见低度异型增生；结肠组织SIRT5和PKM2蛋白表达降低，SDHB蛋白表达升高；结肠组织PKM2和SIRT5琥珀酰化修饰水平升高；结肠组织乳酸、琥珀酸和ATP含量降低。结论 隔药灸可抑制结肠炎相关性结肠癌大鼠肿瘤大小，减轻肿瘤异型增生，其机制可能与通过抑制SIRT5蛋白表达，增加PKM2和SIRT5琥珀酰化修饰水平，进而抑制PKM2蛋白表达，促进SDHB蛋白表达，调节肿瘤中紊乱的葡萄糖代谢有关。

关键词

隔药灸 / 结肠炎相关性结肠癌 / 琥珀酰化修饰 / 沉默信息调节因子5 / 丙酮酸激酶M 2 / 琥珀酸脱氢酶B

基金资助

国家自然科学基金（82205261,82105012）; 国家中医药管理局高水平中医药重点学科建设项目（zyyzdxk-2023068）