参桂甲减丸对老龄甲状腺功能减退大鼠内质网应激GRP78/PERK/CHOP通路与细胞凋亡的影响

摘要

目的 研究参桂甲减丸对老龄甲状腺功能减退模型大鼠内质网应激（ERS）相关信号通路及甲状腺滤泡上皮细胞凋亡的影响。方法 60只20月龄雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、左甲状腺素钠组及参桂甲减丸低、中、高剂量组，每组10只。采用0.1%丙基硫氧嘧啶（PTU）的双蒸水自由饮用10周制备老龄甲状腺功能减退大鼠模型。各组每天以相应药物灌胃1次，持续6周。末次灌胃结束后，HE染色检测大鼠甲状腺组织病理形态；ELISA法检测血清中抗甲状腺过氧化物酶抗体（TPO-Ab）、抗甲状腺球蛋白抗体（TgAb）、促甲状腺激素（TSH）、游离三碘甲状腺原氨酸（FT3）、游离甲状腺素（FT4）水平；TUNEL染色观察甲状腺滤泡上皮细胞凋亡情况；免疫荧光法检测甲状腺组织中葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、C/EBP同源蛋白（CHOP）、甲状腺球蛋白（Tg）、半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)阳性表达；Western blot法检测甲状腺组织中GRP78、蛋白激酶RNA样内质网激酶（PERK）、激活转录因子4(ATF4)、B淋巴细胞瘤-2基因（Bcl-2）、Bcl-2关联X蛋白（Bax）相对表达量。结果 与模型组比较，参桂甲减丸各剂量组大鼠甲状腺组织病理损伤均不同程度减轻，甲状腺滤泡上皮细胞凋亡率明显降低（P<0.05）,GRP78、CHOP、Tg、Caspase-3阳性表达均不同程度降低（P<0.01）；参桂甲减丸中、高剂量组血清TSH、TPO-Ab、Tg-Ab水平下降（P<0.01）,FT3、FT4水平升高（P<0.01），甲状腺组织中GRP78、PERK、ATF4、Bax蛋白相对表达量降低（P<0.01）,Bcl-2表达增加（P<0.01）。结论 参桂甲减丸可能通过调控GRP78/PERK/CHOP信号通路缓解内质网应激，抑制甲状腺滤泡上皮细胞凋亡，减轻甲状腺病理损伤，从而一定程度上恢复甲状腺功能。

关键词

甲状腺功能减退 / 参桂甲减丸 / 内质网应激 / 细胞凋亡