苦丁冬青苷D通过THUMPD3-AS1/miR-150-5p分子轴对膀胱癌细胞增殖和侵袭的影响

摘要

目的 探讨苦丁冬青苷D通过调控THUMPD3-AS1/miR-150-5p分子轴对膀胱癌细胞增殖及侵袭的作用。方法 取人膀胱癌T24细胞，分别给予不同浓度苦丁冬青苷D(0、5、10、20、40、80μmol/L)孵育，MTT法检测T24细胞存活率。将T24细胞随机分为对照组（0μmol/L苦丁冬青苷D孵育）和苦丁冬青苷D组（80μmol/L苦丁冬青苷D孵育）。集落形成实验和Transwell实验分别检测苦丁冬青苷D对T24细胞增殖和侵袭的影响。Western blot检测苦丁冬青苷D对T24细胞中增殖蛋白Cyclin B、CDK1和侵袭蛋白Vimentin、ZLF8表达的影响。实时荧光定量PCR法检测苦丁冬青苷D对T24细胞中THUMPD3-AS1和miR-150-5p表达的影响。双荧光素酶活性实验验证THUMPD3-AS1和miR-150-5p的作用靶点。结果 不同浓度的苦丁冬青苷D均能降低T24细胞的存活率（均P<0.05）。与对照组比较，苦丁冬青苷D组T24细胞集落数量明显减少（t=4.26,P<0.01）。与对照组比较，苦丁冬青苷D组T24细胞穿膜细胞数明显减少（t=7.38,P<0.01）。与对照组比较，苦丁冬青苷D能够下调T24细胞中增殖蛋白Cyclin B、CDK1和侵袭蛋白Vimentin、ZLF8表达。苦丁冬青苷D能下调T24细胞中THUMPD3-AS1表达（t=5.99,P<0.01），上调miR-150-5p表达（t=3.89,P<0.01）。THUMPD3-AS1和miR-150-5p能够靶向结合（t=7.95,P<0.01）。结论 苦丁冬青苷D可抑制膀胱癌细胞增殖和侵袭，其作用机制可能与抑制THUMPD3-AS1表达、上调miR-150-5p表达有关。

关键词

苦丁冬青苷D / 膀胱癌 / 增殖 / 侵袭

基金资助

国家自然科学基金项目（82103284）