野黄芩苷通过调控PDPN抑制AT2细胞上皮间质转化促进肺泡修复改善肺纤维化

摘要

目的 探讨野黄芩苷对肺纤维化的干预作用，分析野黄芩苷对II型肺泡上皮（AT2）细胞中平足蛋白（PDPN）介导上皮-间质转化（EMT）及再生修复能力的影响。方法 采用气管内滴注博莱霉素建立肺纤维化小鼠模型，设对照组、模型组、野黄芩苷低剂量组、野黄芩苷高剂量组和醋酸泼尼松龙组。测定肺功能及肺系数；采用苏木精-伊红（HE）、马松（Masson）染色法观察肺组织病理改变。采用RT-qPCR法检测PDPN mRNA水平，Western blot法检测E-钙黏蛋白（E-cadherin）、波形蛋白（vimentin）、PDPN蛋白质水平。采用免疫荧光染色法检测α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、增殖标志物（Ki-67）与AT2细胞标志物表面活性蛋白C（SPC）细胞共定位情况，评估AT2细胞的EMT程度及增殖能力。利用谱系追踪技术观察AT2细胞分化形态，结合转录组测序分析PDPN表达。体外构建TGF-β₁诱导MLE-12细胞EMT模型，采用CCK-8分析筛选野黄芩苷干预浓度，验证野黄芩苷对PDPN过表达致细胞表型异常调控作用。结果 野黄芩苷可显著减轻纤维化，修复肺泡结构，抑制AT2细胞EMT并促进其增殖与分化，机制与调控PDPN水平相关。野黄芩苷在体外可逆转TGF-β₁或PDPN过表达诱导的EMT表型。结论 野黄芩苷通过调控PDPN抑制AT2细胞EMT并增强其再生修复能力，为肺纤维化提供潜在治疗策略。

关键词

野黄芩苷 / 肺纤维化 / AT2细胞 / 上皮-间质转化 / 再生阻滞

基金资助

国家自然科学基金项目（8220143109）; 北京市自然科学基金项目（7252239）; 中央高校基本科研业务费专项资金项目（2024-JYB-JBZD-057）