罗非鱼戴维斯黄杆菌实时定量PCR检测方法的建立及应用

摘要

戴维斯黄杆菌（Flavobacterium davisii）是柱形病病原之一，严重影响罗非鱼养殖产业.为了实现对其快速和准确的诊断，本研究以TonB基因为靶基因构建了重组质粒，建立了戴维斯黄杆菌的实时定量PCR检测方法，并将其应用到罗非鱼感染戴维斯黄杆菌后的载菌量测定研究.结果表明：特异性引物TonB-F/R与不同基因型的黄杆菌及罗非鱼其他常见病原无交叉反应，所建立的绝对定量检测方法是常规PCR检测方法灵敏度的100倍，其重复性和稳定性良好；罗非鱼感染戴维斯黄杆菌后其鳃组织载菌量显著高于其他组织，符合该疾病的侵染特点.综上所述，该实时定量PCR检测方法具有快速、高灵敏度和强特异性等优势，可准确评估戴维斯黄杆菌的感染程度，对柱形病的预防具有重要价值.

关键词

罗非鱼 / 戴维斯黄杆菌 / 实时定量PCR检测