天山假狼毒花的化学成分研究

Study on the chemical composition of the flowers of Stelleropsis tianschanica

摘要

目的 研究天山假狼毒花Stelleropsistianschanica（Pobed.）体积分数95%乙醇提取物中的化学成分。 方法 用硅胶、凝胶等柱色谱以及半制备高效液相色谱方法进行分离纯化，通过核磁共振、质谱等波谱技术并结合理化性质对其结构进行鉴定。 结果 从天山假狼毒花石油醚部位中分离出11个化合物，分别鉴定为3-(4-hydroxy-3-methoxy)-phenyl 1,2-propandiol（1）、(2S)-4-(4-hydroxy-3-methoxyphenyl)-2-butanol（2）、香草醇（3）、(+)-(7S,8S)-3-methoxy-3’,7-expoxy-8,4’-neolignan-4,9,9’-triol（4）、西瑞香素（5）、benzyl O-b-d-glucopyranoside（6）、squalene（7）、邻苯二甲酸二丁酯（8）、linoleic acid（9）、2,3-dihydroxypropyl de⁃canoate（10）、(+)-kusunokinin（11）。 结论 除化合物5、8和化合物11外，其余化合物均是首次从假狼毒属中分离得到。

Abstract

Objective To study the chemical composition of 95% ethanol extract of the flowers of Stelleropsis tianschanica （Pobed.）. Methods The chemical composition was studied by silica gel， gel column chromatography and semi preparative HPLC. At the same time， the chemical structures were identified by NMR， MS and other spectral techniques combined with physicochemical properties. Results The compounds were obtained and identified as 3-(4-hydroxy-3-methoxy)- phenyl 1，2-propandiol（1）， (2S)-4-(4-hydroxy-3-methoxyphenyl)-2-butanol（2）， vanillyl alcohol（3）， (+)-（7S，8S）-3-methoxy-3’，7-expoxy-8，4’-neolignan-4，9，9’-triol（4）， daphnoretin（5），benzyl O-b-d-glucopyranoside（6）， squalene （7）， dibutyl phthalate （8），linoleic acid （9），2，3-dihydroxypropyl decanoate （10）， and (+)-kusunokinin （11）. Conclusion Except for compounds 5，8 and 11， the rest were obtained from the Stelleropsis for the first time.

关键词

天山假狼毒 / 化学成分 / 香草醇

Key words

Stelleropsis tianschanica / chemical constituents / vanillyl alcohol

天山假狼毒（Stelleropsis tianschanica）为瑞香科（Thymelaeaceae）假狼毒属（Stelleropsis）植物^［1］，在我国仅分布于新疆昭苏县海拔1 700~2 000 m的山坡草地上^［2］。其以根入药，性平、味苦辛，毒性较大，有逐水祛痰、破积杀虫的功效^［3-4］。研究表明，天山假狼毒中化学成分丰富，主要含有萜类、香豆素类、木质素类、酚酸、挥发性成分等^［5-10］。为了更深入地开发和利用该植物的有效化学成分，本课题对天山假狼毒花体积分数为95%的乙醇提取物进行了研究，并从中分离得到了11个化合物，分别鉴定为3-（4-hydroxy-3-methoxy）-phenyl 1，2-propandiol（1）；（2S）-4-（4-hydroxy-3-methoxyphenyl）-2-butanol（2）；香草醇（3）；（+）-（7S，8S）-3-methoxy-3’，7-expoxy-8，4’-neolignan-4，9，9’-triol（4）；西瑞香素（5）；benzyl O-b-d-glucopyranoside（6）；squalene（7）；邻苯二甲酸二丁酯（8）；linoleic acid（9）；2，3-dihydroxypropyl decanoate（10）；（+）-kusunokinin（11）。其中化合物1~4、6、7、9、10为首次从假狼毒属中分离得到。

1 仪器与试药

1.1 仪器

BrukerAvanceⅢ 600 MHz型核磁共振波谱仪（德国Bruker公司）；Thermo Fisher LTQ-Obitrap XL型液质联用仪（美国Thermo Fisher公司）；柱色谱硅胶和薄层色谱用硅胶G、H、GF254（青岛海洋化工有限公司）；HW-40C凝胶（北京兰博利德商贸有限公司）；MCI（日本三菱化学公司）；反相材料LichroprepRp-18（赛谱锐思科技有限公司）；超声波清洗仪（昆山市超声仪器有限公司）； HPLC半制备分离色谱柱YMC- Pack ODS-A（250 mm×10 mm， 5 μm， 北京吉瑞森科技有限责任公司）。

1.2 试药

石油醚、三氯甲烷、乙酸乙酯等试剂均为分析纯，购自北京化学厂。乙腈、甲醇均为色谱纯，购自Fisher公司。

天山假狼毒于2019年8月采自新疆昭苏县，经新疆中药民族药研究所贾晓光研究员鉴定为天山假狼毒（Stelleropsis tianschanica Pobed.）的花，凭证标本（编号20190817）保存于新疆维吾尔自治区中药民族药研究所标本室。

2 方法与结果

2.1 提取分离

取天山假狼毒花10 kg阴干，粉粹后用10倍量体积分数为95%的乙醇加热回流提取3次，每次2 h，合并、浓缩提取液，得总浸膏2 369 g。浸膏用水分散后，依次用石油醚、三氯甲烷（氯仿）、乙酸乙酯各萃取3次，最终得到石油醚部位浸膏338 g，氯仿部位浸膏985 g，乙酸乙酯部位浸膏347 g。取石油醚部位338 g 经硅胶（100~200 目）柱色谱，石油醚-乙酸乙酯（1∶0→0∶1）梯度洗脱得到10个流份 Fr.1~10。Fr.4（8.7 g）经硅胶柱色谱分离得3个组分Fr.4-1~Fr.4-3。Fr.4-2（2.5 g）经HPLC半制备色谱，以体积分数为60%的乙腈为流动相，分离得到化合物1（2.1 mg）。Fr.4-3（3.6 g）经反相材料柱色谱分离，TLC检测，合并相似洗脱液得到6个组分Fr.4-3-1~Fr.4-3-6。Fr.4-3-2（0.9 g）经HPLC半制备色谱，以体积分数为85%的乙腈为流动相，分离得到化合物2（2.6 mg）、3（1.8 mg）。Fr.4-3-1（0.15 g）经HPLC 半制备色谱，以体积分数为75%的甲醇为流动相，分离得到化合物4（1.7 mg）。Fr.4-3-5（0.8 g），经HPLC半制备色谱，以体积分数为68%的甲醇为流动相，分离得到化合物5（2.4 mg）。Fr.5（10.5 g）经HW-40C凝胶柱色谱分离，得到3个组分Fr.5-1~Fr5-3。Fr.5-2（0.5 g）经HPLC半制备色谱，以体积分数为80%的甲醇为流动相，分离得到化合物6（2.3 mg）、7（2.4 mg）。Fr.5-3（12.0 g）经硅胶（100~200目）柱色谱，得到5个组分Fr.5-3-1~Fr.5-3-5。Fr.5-3-2（0.3 g）经HPLC半制备色谱，以体积分数为70%的甲醇为流动相，分离得到化合物8（1.2 mg）。Fr.5-3-1（0.45 g）经HPLC半制备色谱，以体积分数为70%的甲醇为流动相，分离得到化合物9（2.2 mg）。Fr.5-3-2（78.0 mg）经HPLC半制备色谱，以体积分数为75%的甲醇为流动相，分离得到化合物10（1.6 mg）、11（1.7 mg）。

2.2 结构鉴定

从天山假狼毒花中分离出11个化合物。

化合物1：白色粉末，ESI-MS m/z 199 ［M+H］⁺，结合¹H-NMR（DMSO-d₆，600 MHz）、¹³C-NMR（DMSO-d₆，150 MHz）谱确定其分子式为C₁₀H₁₄O₄。¹H-NMR，δ_H： 7.25（1H，d，J = 1.8 Hz，H-2），7.27（1H，d，J = 8.4 Hz，H-5），7.16（1H，dd，J =1.8，8.4 Hz，H-6），4.06（2H，m，H-7），4.31（1H，m，H-8），3.09（1H，dd，J =5.4，13.8 Hz，H-9），3.71（3H，s，3-OCH₃）；¹³C-NMR，δ_C：130.6（C-1），113.4（C-2），145.6（C-3），140.4（C-4），116.7（C-5），121.1（C-6），66.6（C-7），79.1（C-8），43.5（C-9），38.3（C-10），30.6（C-11），40.3（C-12），39.1（C-13），46.6（C-14），26.9（C-15），55.4（3-OCH₃）。以上数据与文献^［11］报道一致，故鉴定化合物为3-（4- hydroxy-3-methoxy）-phenyl 1，2-propandiol。

化合物2：淡黄色油状物，ESI-MS m/z 197［M+H］⁺，结合¹H-NMR（DMSO-d₆，600 MHz）、¹³C-NMR（DMSO-d₆，150 MHz）谱确定分子式为 C₁₁H₁₆O₃。¹H-NMR，δ_H： 1.23（3H，d，J = 6.0 Hz，H-1），3.96（1H，m，H-2），1.76（1H，m，H-3α），1.89（1H，m，H-3β），2.76（2H，m，H-4），6.75（1H，J = 1.8 Hz，H-6），6.77（1H，d，J = 8.4 Hz，H-9），6.63（1H，d，J = 8.4 Hz，H-10），3.39（3H，s，7-OCH₃）。¹³C-NMR，δ_C： 22.5（C-1），68.0（C-2），37.8（C-3），44.9（C-4），137.6（C-5），113.2（C-6），145.8（C-7），144.8（C-8），109.4（C-9），120.6（C-10），56.1（7-OCH₃）。以上数据与文献^［12］描述一致，故鉴定为（2S）-4-（4-hydroxy-3-methoxyphenyl）-2-butanol。

化合物3：淡黄色油状物，ESI-MS m/z 155 ［M+H］⁺，结合¹H-NMR（DMSO-d₆，600 MHz）、¹³C-NMR（DMSO-d₆，150 MHz）谱确定分子式为C₈H₁₀O₃。¹H-NMR，δ_H： 6.75（1H，d，J = 1.2 Hz，H-2），6.57（1H，d，J = 8.4 Hz，H-5），6.56（1H，d，J = 8.4 Hz，H-6），4.46（2H，s，1-CH₂OH），3.81（3H，s，3-OCH₃）。¹³C-NMR，δ_C： 136.6（C-1），115.1（C-2），144.5（C-3），140.4（C-4），119.1（C-5），128.2（C-6），67.9（1-CH₂OH-），51.9（3-OCH₃）。以上数据与文献^［13］描述一致，故鉴定为香草醇。

化合物4：淡黄色油状物，ESI-MS m/z 347 ［M+H］⁺，结合¹H-NMR（DMSO-d₆，600 MHz）、¹³C-NMR（DMSO-d₆，150 MHz）谱确定分子式为C₁₉H₂₂O₆。¹H-NMR，δ_H： 6.74（1H，d，J = 1.8 Hz，H-2），6.78（1H，d，J=8.4 Hz，H-5），6.73（1H，dd，J = 1.8，8.4 Hz，H-6），5.20（1H，d，J = 3.0 Hz，H-7），4.45（1H，m，H-8），3.43（2H，m，H-9），6.83（1H，d，J = 1.8 Hz，H-1’），6.85（1H，dd，J = 8.4 Hz，1.8 Hz，H-2’），6.65（1H，d，J = 1.8 Hz，H-5’），1.79（1H，m，H-7’），2.65（2H，m，H-8’），3.55（2H，m，H-9’）。¹³C-NMR，δ_C： 113.5（C-1），117.7（C-2），136.1（C-3），137.7（C-4），116.2（C-5），115.7（C-6），74.7（C-7），75.9（C-8），65（C-9），132.5（C-1’），129.9（C-2’），126.2（C-3’），137.6（C-4’），118.2（C-5’），122.9（C-6’），34.2（C-7’），43.0（C-8’），58.9（C-9’）。以上数据与文献^［14］报道一致，故鉴定化合物为（+）-（7S，8S）-3-methoxy-3’，7-expoxy-8，4’-neolignan-4，9，9’-triol。

化合物5：淡黄色无定形粉末，ESI-MS m/z 353 ［M+H］⁺，结合¹H-NMR （DMSO-d₆，600 MHz）、¹³C-NMR（DMSO-d₆，150 MHz）谱确定分子式为C₁₉H₁₂O₇。¹H-NMR，δ_H：7.90（1H，s，H-4），7.23（1H，s，H-5），6.88（1H，s，H-8），6.40（1H，d，J = 9.6 Hz，H-3’），8.07（1H，d，J = 9.0 Hz，H-4’），7.74（1H，d，J = 8.4 Hz，H-5’），7.14（1H，dd，J = 8.4，2.4 Hz，H-6’），7.21（1H，d，J = 3.6 Hz，H-8’），3.83（3H，s，6-OCH₃）。¹³C-NMR，δ_C： 160.5（C-2），130.2（C-3），114.4（C-4），104.4（C-5），144.4（C-6），155.5（C-7），100.5（C-8），146.1（C-9），110.6（C-10），160.1（C-2’），114.8（C-3’），131.2（C-4’），113.9（C-5’）， 109.8（C-6’），157.4（C-7’），103.2（C-8’），147.9（C-9’），136.1（C-10’），56.4（6-OCH₃）。以上数据与文献^［15］报道一致，故鉴定化合物为西瑞香素。

化合物6：淡黄色油状物，ESI-MS m/z 271 ［M+H］⁺，结合¹H-NMR（DMSO-d₆，600 MHz）、¹³C-NMR（DMSO-d₆，150 MHz）谱确定分子式为C₁₃H₁₈O₅。¹H-NMR，δ_H： 7.39（1H，m，H-2），7.31（3H，m，H-3，4，5），7.39（1H，m，H-6），4.82（1H，d，J = 12.6 Hz，H-7α），4.57（1H，d，J = 12 Hz，H-7β），4.22（1H，d，J =7.8 Hz，H-1’），3.01~3.15（5H，m，H-2’，3’，4’，5’，6’）。¹³C-NMR，δ_C： 138.1（C-1），128.3（C-2），128.8（C-3），128.1 （C-4），171.5（C-5），88.7（C-6），70.2（C-7），102.5（C-1’），74.0（C-2’），77.3（C-3’），70.7（C-4’），77.1（C-5’），61.7（C-6’）。以上数据与文献^［16］描述一致，故鉴定为benzyl O-b-d-glucopyranoside。

化合物7：无色油状物，ESI-MS m/z 411 ［M+H］⁺，结合¹H-NMR（DMSO-d₆，600 MHz）、¹³C-NMR（DMSO-d₆，150 MHz）谱确定分子式为C₃₀H₅₀。¹H-NMR，δ_H：1.61（3H，s，H-1），1.53（3H，s，H-2），5.08（1H，m，H-4），1.89（2H，m，H-5），1.90（2H，m，H-6），5.05（1H，m，H-8），1.92（2H，m，H-9），1.93（2H，m，H-10），5.04（1H，m，H-12），1.94（2H，m，H-13），1.95（2H，m，H-14），5.03（1H，m，H-15），1.97（2H，m，H-17），1.99（2H，m，H-18），5.01（1H，m，H-19），2.00（2H，m，H-21），2.01（2H，m，H-22），5.01（1H，m，H-23），1.61（3H，s，H-25），1.53（3H，s，H-26），1.53（3H，s，H-27），1.53（3H，s，H-28），1.53（3H，s，H-29），1.53（3H，s，H-30）。¹³C-NMR，δ_C： 16.7（C-1），24.7（C-2），130.3（C-3），123.3（C-4），25.7（C-5），38.7（C-6），133.9（C-7），123.2（C-8），25.6（C-9），38.7（C-10），134.1（C-11），123.2（C-12），23.2（C-13， 14），123.2（C-15），134.1（C-16），38.7（C-17），25.6（C-18），123.2（C-19），133.9（C-20），38.7（C-21），25.7（C-22），23.3（C-23），130.3（C-24），16.7（C-25），24.7（C-26），14.9（C-27，30），15.0（C-28，29）。以上数据与文献^［17］描述一致，故鉴定为squalene。

化合物8：淡黄色油状物，ESI-MS m/z 253 ［M+H］⁺，结合¹H -NMR（DMSO-d₆，600 MHz）、¹³C-NMR（DMSO-d₆，150 MHz）谱确定分子式为 C₁₆H₂₈O₂。¹H-NMR，δ_H：7.72（1H，dd，J = 3，5.4 Hz，H-3，6），7.54（2H，dd，J = 3，5.4 Hz，H-4，5），4.31（2H，t，J = 7.2 Hz，H-8，8’），1.72（2H，m，H-9，9’），1.43（2H，m，H-10，10’），0.96（3H，t，J = 8.4 Hz，H-11，11’）。¹³C-NMR，δ_C： 132.3（C-1，2），128.8（C-3，6），130.9（C-4，5），160.7（C-7，7’），65.5（C-8，8’），30.5（C-9，9’），19.1（C-10，10’），13.8（C-11，11’）。以上数据与文献^［18］描述一致，故鉴定为邻苯二甲酸二丁酯。

化合物9：淡黄色油状物，ESI-MS m/z 281 ［M+H］⁺，结合¹H -NMR（DMSO-d₆，600 MHz）、¹³C-NMR（DMSO-d₆，150 MHz）谱确定分子式为C₁₈H₃₂O₂。¹H-NMR，δ_H： 2.34（2H，t，J = 6.6 Hz，H-2），1.63（2H，m，H-3），1.25（2H，m，H-4），1.38（2H，m，H-5），1.21（2H，m，H-6），1.24（2H，m，H-7）。¹³C-NMR，δ_C：179.9（C-1），34.8（C-2），24.7（C-3），29.0（C-4），29.1（C-5），29.2（C-6），29.6（C-7）。以上数据与文献^［19］描述一致，故鉴定为linoleic acid。

化合物10：白色粉末，ESI-MS m/z 247 ［M+H］⁺，结合¹H -NMR（DMSO-d₆，600 MHz）、¹³C-NMR（DMSO-d₆，150 MHz）谱确定分子式为C₁₃H₂₆O₄。¹H-NMR，δ_H： 0.85（3H，t，J = 6.5 Hz，H-1），1.11（2H，m，H-2），1.12（2H，m，H-3），1.15（2H，m，H-4），1.21（2H，m，H-5），1.25（2H，m，H-6），1.24（2H，m，H-7），1.53（2H，q，J = 6.0 Hz，H-8），2.24（2H，t，J = 7.2 Hz，H-9），3.92（1H，dd，J = 6.6 Hz，H-11α），3.98（1H，dd，J = 4.8 Hz，H-11β），3.45（1H，m，H-12），4.52（2H，d，J = 6.0 Hz，H-13）。¹³C-NMR， δ_C： 11.8（C-1），21.8（C-2），24.8（C-3），25.3（C-4），28.8（C-5），28.4（C-6），29.1（C-7），31.1（C-8），33.3（C-9），174.5（C-10），65.1（C-11），69.1（C-12），63.5（C-13）。以上数据与文献^［20］描述一致，故鉴定为2，3-dihydroxypropyl decanoate。

化合物11：黄色油状物，ESI-MS m/z 371 ［M＋H］⁺，结合¹H -NMR（DMSO-d₆，600 MHz）、¹³C-NMR（DMSO-d₆，150 MHz）谱确定分子式为C₂₁H₂₂O₆。¹H-NMR，δ_H： 6.78（1H，d，J = 1.8 Hz，H-2），6.53（1H，dd，J = 8.4，1.8 Hz，H-6），6.54（1H，d，J = 8.4 Hz，H-5），6.75（1H，d，J = 8.4 Hz，H-5’），6.70（1H，d，J = 1.8 Hz，H-2’），6.57（1H，dd，J = 8.4，1.8 Hz，H-6’），5.83（2H，d，J = 4.8 Hz，-OCH₂O-），4.14（1H，d，J = 2.4 Hz，H-9’α），3.77（1H，m，H-9’β），3.85（3H，s，3’-OCH₃），3.84（3H，s，4’-OCH₃）。¹³C-NMR，δ_C： 129.0（C-1），111.1（C-2），146.9（C-3），145.8（C-4），113.1（C-5），119.4（C-6），38.9（C-7），47.3（C-8），179.4（C-9），132.5（C-1’），110.6（C-2’），145.7（C-3’），144.2（C-4’），106.1（C-5’），119.2（C-6’），32.5（C-7’），37.1（C-8’），69.0（C-9’），55.6（3’-OCH₃），54.7（4’-OCH₃-），101.9（-OCH₂O-）。以上数据与文献^［21］描述一致，故鉴定为（+）-kusunokinin。

3 结论

本研究通过硅胶柱色谱，凝胶色谱和半制备液相色谱等，且结合NMR、MS等波谱技术从天山假狼毒花中分离并鉴定得到11个化合物，其中有8个化合物是首次从该属植物中分离得到。该研究丰富了天山假狼毒的化学成分库，为进一步开发和利用天山假狼毒奠定理论基础。

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基金资助

国家自然科学基金项目(81860759)