湿润烧伤膏联合光子治疗仪对糖尿病足溃疡愈合的影响

Effects of Moist Exposed Burn Ointment combined with photon therapeutic apparatus on healing of diabetic foot ulcer

摘要

目的 考察湿润烧伤膏（Moist Exposed Burn Ointment，MEBO）联合光子治疗仪对糖尿病足（diabetic foot，DF）溃疡患者创面愈合及对血清碱性成纤维细胞生长因子（basic fibrblast growth factor，bFGF）、血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）及转化生长因子β₁（transforming growth factor-β₁，TGF-β₁）水平的影响。 方法 选取接受治疗的110例DF溃疡患者作为研究对象，根据治疗方法不同分为联合治疗组（n=54）和光子治疗仪组（n=56）。光子治疗仪组用光子治疗仪治疗，联合治疗组应用MEBO联合光子治疗仪治疗，比较2组患者创面愈合情况［创面愈合时间、创面缩小面积和创面愈合率］、创面氧化应激指标［超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）、丙二醛（malondialdehyde，MDA）、晚期蛋白氧化产物（advanced oxidation protein products，AOPP）］、创面渗液指标［血清基质金属蛋白酶2（matrix metalloproteinase-2，MMP-2）、蛋白Samd-3（sterile alpha motif domain-containing protein 3，Samd-3）和金属蛋白酶组织抑制剂‍-2（tissue inhibitor of metalloproteinase-2，TIMP-2）］和bFGF、VEGF和TGF-β₁水平及不良反应发生率情况。 结果 治疗后，联合治疗组创面愈合时间短于光子治疗仪组，创面缩小面积大于光子治疗仪组，创面愈合率高于光子治疗仪组（P<0.05）。治疗后，2组SOD水平均有所升高，且联合治疗组高于光子治疗仪组（P<0.05），2组AOPP、MDA水平均有所下降，且联合治疗组低于光子治疗仪组（P<0.05）。2组MMP-2、Samd-3水平均有所降低，联合治疗组低于光子治疗仪组（P<0.05），2组TIMP-2有所上升，且联合治疗组高于光子治疗仪组（P<0.05）。2组血清指标TGF-β₁、VEGF和bFGF均有所升高，联合治疗组高于光子治疗仪组（P<0.05）。2组不良反应发生率比较差异无统计学意义（P>0.05）。 结论 湿润烧伤膏能够降低氧化应激水平，抑制炎症反应，提高血清bFGF、TGF-β₁水平，缩短创面愈合时间，加速创面愈合速度。

Abstract

Objective To explore the effects of Moist Exposed Burn Ointment （MEBO） combined with photon therapeutic apparatus on wound healing， serum basic fibroblast growth factor （bFGF）， vascular endothelial growth factor （VEGF） and transforming growth factor β₁ （TGF-β₁） in patients with diabetic foot （DF） ulcer. Methods A total of 110 patients with DF ulcer were enrolled as the research objects. According to different treatment methods， they were divided into combined treatment group （n=54） and photon therapeutic apparatus group （n=56）. The photon therapeutic apparatus group was treated with photon therapeutic apparatus， while the combined treatment group was additionally treated with MEBO. The wound healing （wound healing time，wound reduction area， wound healing rate）， oxidative stress indexes of wound ［superoxide dismutase （SOD）， malondialdehyde （MDA）， advanced oxidation protein products （AOPP）］， wound exudation indexes ［matrix metalloproteinase-2 （MMP-2）， sterile alpha motif domain-containing protein 3 （Samd-3）， tissue inhibitor of metalloproteinase-2 （TIMP-2）］， bFGF， VEGF， TGF-β₁ and the incidence of adverse reactions were compared between the 2 groups. Results After treatment， the wound healing time in combined treatment group was shorter than that in photon therapeutic apparatus group， the wound reduction area was larger than that in photon therapeutic apparatus group， and the wound healing rate was higher than that in photon therapeutic apparatus group （P<0.05）. After treatment， the SOD levels was increased in both groups， which was higher in combined treatment group than in photon therapeutic apparatus group （P<0.05）， while the AOPP and MDA levels were decreased， which were lower in combined treatment group than in photon therapeutic apparatus group （P<0.05）. After treatment， the MMP-2 and Samd-3 in both groups were decreased， which were lower in combined treatment group than in photon therapeutic apparatus group （P<0.05）， while the TIMP-2 was increased， which was higher in combined treatment group than in photon therapeutic apparatus group （P<0.05）. After treatment， the levels of serum TGF-β₁， VEGF and bFGF were increased in both groups， which were higher in combined treatment group than in photon therapeutic apparatus group （P<0.05）. There was no significant difference in the incidence of adverse reactions between the 2 groups （P>0.05）. Conclusion MEBO can reduce oxidative stress level， inhibit inflammation response，increase the levels of serum bFGF and TGF-β₁， shorten wound healing time and accelerate wound healing.

关键词

湿润烧伤膏 / 光子治疗仪 / 糖尿病足溃疡 / 创面愈合 / 血清碱性成纤维细胞生长因子

Key words

Moist Exposed Burn Ointment / photon therapeutic apparatus / diabetic foot ulcer / wound healing / serum basic fibroblast growth factor

糖尿病足（diabetic foot，DF）是糖尿病患者在长期高糖状态下，发生的与周围神经病变及周围血管病变相关的足部感染，导致深层足部组织破坏，出现足部坏疽、溃疡等症状^［1］。光子治疗仪能够利用光化学作用减轻创面炎症和减少创面组织液渗出，促进肉芽组织生长，加快创面愈合^［2］。湿润烧伤膏（Moist Exposed Burn Ointment，MEBO）包含黄芩等中药成分，具有解毒生肌的作用，常用于烧伤等伤口的外敷^［3-4］。本研究考查MEBO联合光子治疗仪治疗DF溃疡的效果及对患者相关血清指标变化的影响，为DF溃疡的治疗寻找新的有效方法。

1 一般资料

将110例DF溃疡患者纳入研究。根据治疗方式分为联合治疗组（54例）和光子治疗仪组（56例）。联合治疗组：男29例，女25例；年龄为44~56岁，平均（50.14±3.24） 岁；平均病程为（3.25±0.49） 年；足溃疡面积为（6.21±0.32） cm²；Wagner 1级34例，2级20例；光子治疗仪组：男27例，女29例；年龄为44~57岁、平均（50.25±3.38） 岁；平均病程为（3.13±0.57） 年，足溃疡面积为（6.25±0.23） cm²，Wagner 1级29例，2级27例。2组患者一般资料比较差异无统计学意义（P>0.05），具有可比性。

纳入标准：①均符合《中国糖尿病足诊治指南》^［5］中对DF的诊断标准；②Wagner分级1~2级者。

排除标准：①对MEBO过敏；②合并足癣、湿疹等其他足部疾病；③非糖尿病引起的足部溃疡。

2 方法

2.1 治疗方法

2组均给予控制血糖、改善血液循环等常规治疗。

联合治疗组：充分暴露患处，用安尔碘（Ⅲ型）对创面及周围进行消毒，用生理盐水多次冲洗创面，清除足部坏死组织，用镊子夹无菌纱布擦拭患处至清洁干燥。将Carnation-11糖尿病型光子治疗仪（深圳普门科技股份有限公司）对准创面溃疡处，调整角度及高度，使其与皮肤距离为（12.5±2.5） cm，将波长设置为650~750 nm，照射时间为15~20 min，每日2次，连续治疗14 d，时刻观察患肢反应以避免灼伤；以无菌纱块浸润MEBO（规格为40 g，汕头市美宝制药有限公司）涂抹创面，覆盖整个创面，厚度以<1 mm为宜，用无菌纱布及绷带包扎。根据患者溃疡面恢复情况每4~6 h进行换药，每次换药前需将溃疡面残余药物及液化物全部清除，以保证新涂药膏被充分吸收。连续治疗14 d。

光子治疗仪组：仅用光子治疗仪照射糖尿病足溃疡创面，照射方法同联合治疗组。

2.2 观察指标

2.2.1 创面愈合率

每日观察并记录创面愈合情况，创面达到上皮化即为愈合，记录创面缩小面积、创面愈合时间及创面愈合率等。

2.2.2 创面组织氧化应激指标

治疗前后，清晨空腹状态下采集患者静脉血3 mL，用羟胺法对患者超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）、丙二醛（malondialdehyde，MDA）、晚期蛋白氧化产物（advanced oxidation protein products，AOPP）水平进行测定。

2.2.3 血清指标

治疗前后，采集患者空腹静脉血3 mL，以3 000 r·min^-1离心15 min，取上清液，置于-80 ℃保存，用ELISA对血清转化生长因子-β₁（transforming growth factor-β₁，TGF-β₁）、碱性成纤维细胞生长因子（basic fibro-blast growth factor，bFGF）、血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）水平进行测定。

2.2.4 创面渗液检测

治疗前后，于清晨空腹状态下收集患者创面渗液，以3 000 r·min^-1离心15 min分离渗液，取上清液，置于-80 ℃保存，用ELISA对血清基质金属蛋白酶2（matrix metalloproteinase，MMP-2）、Samd-3（sterile alpha motif domain-containing protein 3，Samd-3）蛋白和金属蛋白酶组织抑制剂-2（tissue inhibitor of metalloproteinase-2，TIMP-2）水平进行测定。

2.2.5 不良反应

比较2组治疗过程中过敏、灼伤等不良反应的发生情况。

2.3 统计学方法

采用SPSS 22.0统计学软件对数据进行分析，对数据进行正态性检验，计量资料以（\overline{x}±s）表示，比较行t检验，计数资料以率表示，比较用χ²检验。P<0.05为差异有统计学意义。

3 结果

3.1 创面愈合率的比较

治疗后，联合治疗组创面愈合时间短于光子治疗仪组，创面缩小面积大于光子治疗仪组，创面愈合率高于光子治疗仪组（P<0.05）。见表1。

3.2 创面组织氧化应激指标的比较

治疗后，2组SOD水平均有所升高，且联合治疗组高于光子治疗仪组（P<0.05）；AOPP、MDA水平均有所下降，且联合治疗组低于光子治疗仪组（P<0.05）。见表2。

3.3 创面渗液的比较

治疗后，2组MMP-2、Samd-3水平均有所降低，且联合治疗组低于光子治疗仪组（P<0.05）；TIMP-2有所上升，且联合治疗组高于光子治疗仪组（P<0.05）。见表3。

3.4 血清指标的比较

治疗后，2组TGF-β₁、VEGF、bFGF均有所升高，且联合治疗组均高于光子治疗仪组（P<0.05）。见表4。

3.5 不良反应的比较

治疗过程中，联合治疗组患者出现全身性荨麻疹1例、过敏性皮炎1例，灼伤1例，不良反应发生率为5.56%；光子治疗仪组出现灼伤1例，不良反应发生率为1.79%。2组不良反应发生率比较差异无统计学意义（χ² =0.291，P=1.115）。

4 讨论

DF溃疡发病机制复杂，其机制之一在于创面成纤维细胞生长因子活性降低，外基质细胞异常，导致创面溃疡迁延不愈^［6］。有研究发现，MEBO对难以愈合的创面具有良好的治疗效果^［7-8］。本研究结果显示，联合治疗组创面愈合率更高，愈合面积更大，且创面愈合时间更短，表明MEBO联合光子治疗仪治疗的效果优于单一使用光子治疗仪治疗。推测原因为：MEBO不但能够清热解毒，还能改善胰岛素抵抗及糖脂代谢^［9］；敷于创面能够形成隔离膜，保持创面湿润，创造适宜皮肤修复的环境；渗入组织后能促进成纤维细胞增长及毛细血管新生，促进肉芽组织生长^［10］。因此，二者联合使用效果更佳。

DF溃疡与创面氧化应激关系密切，MDA和SOD是反映氧化应激情况的重要指标。氧自由基生成氧化产物MDA，引起蛋白质变性，损伤细胞。而SOD能够催化还原反应，维持氧化还原平衡，阻断氧自由基对病足局部组织细胞的损害^［11-12］。本研究结果显示，治疗后2组SOD水平均升高，且联合治疗组高于光子治疗仪组，MDA水平显著下降，且联合治疗组低于光子治疗仪组。表明联合治疗能减轻创面组织损伤。

创面愈合是成纤维细胞、内皮细胞、炎性细胞、外基质细胞等多种细胞共同作用的结果^［13］。而MMP-2/TIMP-2平衡与细胞外基质代谢及上皮细胞形成具有密切关系，对创面肉芽组织的新生及结缔组织的形成至关重要。MMP是一种蛋白水解酶，具有细胞外基质降解功能，MMP-2能够降解上皮细胞基底膜Ⅳ型胶原，以此抑制创面修复和瘢痕形成。TIMP能够通过抑制MMP水平，调节细胞外基质代谢，二者结合对细胞外基质合成、降解起到共同调节的作用。MMP-2/TIMP-2失衡，会破坏细胞外基质降解重塑过程，破坏病足创面上皮细胞，不利于血管新生，从而抑制创面愈合^［14］。TGF-β₁是成纤维细胞的趋化因子，具有促进上皮组织生成，加速细胞组织修复等功能，能够促进创面愈合。Samd-3蛋白是TGF-β₁信号转导通路的下游蛋白，对TGF-β₁信号通路具有调节作用，是现阶段公认的“修复相关基因”。Samd-3活化后形成磷酸化Smad3（P-Samd3），可接收TGF-β₁信号的刺激，促进内皮细胞转化，细胞外基质聚集，加速创面愈合。TGF-β₁不仅能通过TGF-β₁/Smad3信号通路调控创面愈合，还能够通过提高TIMP-2水平，抑制MMP-2基因的表达^［15-17］。而bFGF是一种活性多肽，能够上调细胞中生长因子受体的活性，趋化炎症细胞和成纤维细胞等修复细胞向创面聚集，加快肉芽组织的生长^［18-19］。本研究结果显示，治疗后，2组MMP-2、Samd-3水平均有所降低，且联合治疗组低于光子治疗仪组，TIMP-2、TGF-β₁、VEGF和bFGF均有所上升，且联合治疗组高于光子治疗仪组。表明联合治疗能使DF溃疡创面愈合，能够有效促进创面微血管生成，加快创面愈合速度，提高创面愈合效果。有研究结果显示，MEBO能够降低糖尿病溃疡MMP-2 mRNA的表达水平，提高TIMP-1的表达水平，促进新生毛细血管的形成，加快肉芽组织的生长，进而促进创面愈合，与本研究的结果一致^［20］。

综上所述，湿润烧伤软膏联合光子治疗仪治疗DF溃疡有利于提升血清TGF-β₁、bFGF水平，调节创面MMP-2/TIMP-2平衡，提高局部Samd-3水平，促进创面愈合。

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基金资助

海南省医药卫生科研项目(15032071A2001)