避瘟解毒颗粒防治新型冠状病毒感染的机制

Mechanism of Biwen Jiedu Granules in preventing and treating novel coronavirus infection

摘要

目的 通过网络药理学和动物实验探讨避瘟解毒颗粒（Biwen Jiedu Granules，BWJD）防治新型冠状病毒感染的机制。 方法 通过TCMSP和BATMAN-TCM数据库检索组方药材的化学成分及作用靶点。用GeneCards数据库查找新型冠状病毒感染相关靶点，将二者交集靶点导入STRING数据库中构建靶点相互作用网络图，筛选核心靶点，通过DVIAD数据库对靶点进行GO功能分析和KEGG信号通络富集分析。构建环磷酰胺诱导的小鼠免疫低下模型，检测小鼠的脾脏和胸腺指数、血常规、血清及组织中免疫因子水平。 结果 获得BWJD药物靶点259个，疾病靶点2 284个，交集靶点98个，通过蛋白相互作用（protein-protein interaction，PPI）网络分析获得肿瘤坏死因子（tumor necrosis factor，TNF）、白细胞介素-1β（interleukin-1β，IL-1β）、白细胞介素-6（interleukin-6，IL-6）等核心靶点。基因GO功能、KEGG通路富集分析结果表明，药物增强免疫功能主要是通过TNF、白细胞介素-17（interleukin-17，IL-17）等信号通路发挥协同调节作用。动物实验进一步证实BWJD能显著改善免疫低下小鼠的脾脏、胸腺指数和血常规，显著提高血清中免疫球蛋白G（immunoglobulin G，IgG）、免疫球蛋白M（immunoglobulin M，IgM）、肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）、IL-1β水平和脾、胸腺中TNF-α、IL-1β的含量，提高脾和胸腺中超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）的活性。 结论 避瘟解毒颗粒可能通过免疫调节发挥防治新型冠状病毒感染的作用。

Abstract

Objective To explore the mechanism of Biwen Jiedu Granules（BWJD）in preventing and treating novel coronavirus infection based on network pharmacology and animal experiments. Methods The active constituents and targets of BWJD were retrieved through Traditional Chinese Medicine Systems Pharmacology Database and Analysis Platform （TCMSP） and A Bioinformatics Analysis Tool for Molecular Mechanism of Traditional Chinese Medicine （BATMAN-TCM） databases. Targets of novel coronavirus infection were searched from the GeneCards database， and their overlapping targets were imported into the STRING database to establish the interaction network. Furthermore， the core targets were screened out. Gene ontology （GO） function and Kyoto encyclopedia of genes and genomes （KEGG） pathway enrichment analysis were performed through the DVIAD database. An immunosuppression model of mice induced by cyclophosphamide was established， and the spleen and thymus index， hemogram， serum and tissue levels of immune factors were detected. Results A total of 259 drug targets， 2 284 disease targets and 98 overlapping targets were obtained for BWJD. Key targets such as tumor necrosis factor （TNF）， interleukin-1β （IL-1β） and interleukin-6 （IL-6） were performed through protein-protein interaction （PPI） network analysis. GO and KEGG pathway enrichment analysis revealed that BWJD could enhance immune function， mainly through synergistic regulatory effects such as TNF and IL-17 signaling pathway. Animal experiments further confirmed that BWJD could significantly improve the spleen，thymus index，and blood count levels in immunocompromised mice， and significantly increase the contents of immunoglobulin G （IgG）， immunoglobulin M （IgM）， tumor necrosis factor-α （TNF-α） and IL-1β. The contents of TNF， IL-1β and the activity of superoxide dismutase （SOD） in the spleen and thymus were significantly increased. Conclusion BWJD may play a role in preventing and treating novel coronavirus infection through immune regulation.

Graphical abstract

关键词

避瘟解毒颗粒 / 新型冠状病毒感染 / 网络药理学 / 免疫调节

Key words

Biwen Jiedu Granules / novel coronavirus infection / network pharmacology / immunoregulation

新型冠状病毒感染由新型冠状病毒（SARS-CoV-2）引起，主要临床表现为发热、干咳、乏力，危重症者可发生呼吸困难、脓毒症休克、多脏器衰竭等^［1］。研究发现，免疫应答调控异常是导致患者病情重症化的主要原因之一，免疫反应不足会导致病毒大量复制，免疫反应过度会促进炎性细胞因子的大量释放，诱导发生细胞因子风暴，加重机体损伤。同时免疫功能紊乱对新型冠状病毒感染后综合征的发生也起到重要作用，研究表明，COVID-19导致的免疫力低下可继发持续性真菌感染，进而引发多种慢性不适，且免疫系统的长期紊乱可能伴随轻度炎症和自身免疫反应，从而增加多器官功能障碍的风险，并提高反复感染的可能性^［2-3］。因此研发针对病毒感染的免疫调节类药物缩短病程、降低重症率和死亡率、减轻后遗症均具有重要意义^［4］。

避瘟解毒颗粒（Biwen Jiedu Granules，BWJD）是西安中医脑病医院根据全国名中医刘华为主任医师的临床经验方研发的医疗机构制剂，由广藿香、紫苏叶、桔梗、薄荷、茯苓、炒白术、陈皮、厚朴、苍术、滑石、连翘、芦根、甘草组成，具有解表化湿、宣肺透热、祛风解毒、芳香避秽的功效。自2020年药品获批以来，主要用于新型冠状病毒感染证属寒湿束表、热郁津伤，症见干咳、发热恶寒、头痛、咽痛微干、胃脘痞满、倦怠乏力、胸闷呕恶、纳呆便溏等疾病人群的治疗，临床疗效良好，于2022年被列为陕西省成人新型冠状病毒感染者治疗常用中成药^［5］。本研究通过对避瘟解毒颗粒进行网络药理学和动物实验，初步揭示其治疗新型冠状病毒感染的作用机制，为临床研究和新药研发提供参考。

1 仪器与材料

1.1 仪器

NX-1R型高速台式离心机（北京鼎昊源科技有限公司）；ME55型分析天平（瑞士梅特勒托利多公司）；TL2010S型中通量组织研磨仪（北京鼎昊源科技有限公司）；Multiskan Skyhigh全波长酶标仪（赛默飞世尔科技公司）。

1.2 试药

避瘟解毒颗粒（批号20220401，规格为10 g·袋^-1，西安中医脑病医院）；环磷酰胺（批号 H2121239，上海阿拉丁生化科技股份有限公司）；免疫球蛋白G（immunoglobulin G，IgG）、免疫球蛋白M（immunoglobulin M，IgM）、肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）、白细胞介素-1β（interleukin-1β，IL-1β）检测试剂盒，均购自武汉菲恩生物科技有限公司；二辛可酸法蛋白质浓度测定（Bicinchoninic acid assay，BCA）、超氧化物歧化酶活性测定（superoxide dismutases，SOD）检测试剂盒，均购自上海碧云天生物技术有限公司。

1.3 动物

SPF清洁级KM雄性小鼠56只，体质量为（20±2） g，购自西安交通大学医学部动物实验中心，许可证号为SCXK（陕）2018-001。

2 方法

2.1 避瘟解毒颗粒潜在化学成分及其靶点的筛选预测

通过TCMSP数据库（https：//old.tcmsp-e.com/tcmsp.php）检索BWJD中广藿香、紫苏、桔梗、薄荷、连翘、芦根、白术、茯苓、陈皮、苍术、厚朴、甘草的化学成分，并结合文献补充完善BWJD组方用药的化学成分，以TCMSP平台成药性（drug-likeness，DL）≥0.18，且口服生物利用度（oral bioavailability，OB）≥30%为条件筛选BWJD的潜在活性成分。通过TCMSP数据库和BATMAN-TCM数据库（http：//bionet.ncPsb.org.cn/batman-tcm/）进行潜在活性成分的相关靶点预测。

2.2 药物作用于新冠病毒感染的靶点筛选与预测

以“Novel coronavirus infection”“SARS-CoV-2”为关键词，通过GeneCards数据库（https：//www.genecards.org/）检索并去重后作为新冠病毒感染相关疾病靶点。将BWJD潜在成分相关靶点与疾病相关靶点取交集，获得交集靶点。

2.3 靶点蛋白互作网络构建与核心靶点筛选

将上述交集靶点导入STRING数据库（https：//cn.string-db.org/）进行靶点蛋白间相互作用（protein Protein interaction，PPI）分析，最低相互作用阈值设为0.400。将上述Tsv格式的结果导入Cytoscape 3.7.2软件，构建靶点-信号通路网络图，并通过CentiScaPe插件计算点度中心性（degree）、接近中心性（closeness）、中介中心性（betweenness）参数，将数值高于各自中位数的靶点筛选为药物作用于SARS-CoV-2的核心靶点。

2.4 GO功能和KEGG通路富集分析

将上述交集靶点导入DAVID数据库（https：//david.ncifcrf.gov/），进行GO（gene ontology）功能和KEGG（kyoto encycloPedia of genes and genomes）通路富集分析。

2.5 动物实验验证

2.5.1 给药方案

将56只SPF级小鼠适应性喂养7 d后，随机分为4组：空白组、模型组、BWJD低剂量组、BWJD高剂量组，均连续灌胃14 d。空白组和模型组灌胃生理盐水0.1 mL·d^-1，BWJD低剂量组、BWJD高剂量组分别灌胃BWJD水溶物4.5、9.0 g·kg^-1·d^-1（相当于临床单日用药量的1、2倍）；除空白组外，模型组、BWJD低剂量组、BWJD高剂量组均在灌胃第9~11日腹腔注射环磷酰胺80 mg·kg^-1·d^-1［6］，空白组小鼠按体质量腹腔注射等量生理盐水，于末次给药隔日，取血，处死，分离脾脏和胸腺。

2.5.2 免疫指标的测定

小鼠免疫器官指数测定：用滤纸吸干表面血液后称定质量，计算胸腺指数及脾脏指数。脾脏指数=脾脏质量/体质量（mg·g^-1）；胸腺指数=胸腺质量/体质量（mg·g^-1）。血常规检测：小鼠眼球取全血收集于肝素钠抗凝管中，全自动血细胞分析仪检测血常规。小鼠血清、脾脏和胸腺组织的免疫因子水平检测：小鼠经眼球取血后，置于1.5 mL离心管中，静置2 h，在4 ℃下以3 500 r·min^-1离心15 min，取上清，测定血清中IgG、IgM、TNF-α和IL-1β含量。取小鼠脾脏和胸腺组织称定质量，加入适量生理盐水制成100 g·L^-1的脾脏和胸腺组织匀浆液，离心取上清，测定脾脏和胸腺组织的SOD、TNF-α、IL-1β含量。

3 结果

3.1 避瘟解毒颗粒与新型冠状病毒感染潜在靶点

符合DL≥0.18和OB≥30%的BWJD成分共298个，其中广藿香33个，紫苏39个，桔梗7个，薄荷18个，连翘27个，芦根2个，白术14个，茯苓15个，陈皮7个，苍术18个，厚朴17个，甘草101个。上述化学成分查询靶点并去重后共得到859个相关靶点。通过GeneCards数据库中筛选得到2 284个SARS-CoV-2相关靶点。

3.2 避瘟解毒颗粒与新型冠状病毒感染核心蛋白相互作用网络

绘制BWJD潜在化学成分与新型冠状病毒感染相关靶点韦恩图，得到98个交集靶点，即为BWJD可能作用于SARS-CoV-2的相关靶点。用STRING数据平台输入上述98个交集靶点，构建药物和疾病靶点蛋白相互作用关系图，得到98个关键节点（节点代表靶点）和449条边（边代表靶点间相互作用），平均节点值9.16，导入Cytoscape软件构建PPI网络，以degree≥43.327、closeness≥0.007、betweenness≥56.245筛选获得32个核心靶点，其中包括TNF、IL-1β、IL-6、IL-10等，并构建网络互作图，见图1。

3.3 避瘟解毒颗粒治疗新型冠状病毒感染的富集分析

GO富集分析（P<0.05）结果包括163个生物过程（biological process，BP）、16个细胞组成（cellular component，CC）和20个分子功能（molecular function，MF），选出-lgP居前10位的GO富集分析结果并绘制柱状图，见图2。BP主要涉及对外源性刺激的反应（response to xenobiotic stimulus）、脂多糖介导的信号通路（lipopolysaccharide-mediated signaling pathway）、蛋白质磷酸化的正调控（positive regulation of protein phosphorylation）等；CC主要包括高分子复合物（macromolecular complex）、质膜穴样内陷（caveola）、膜筏（membrane raft）等；MF主要涉及相同蛋白质结合（identical protein binding）、酶结合（enzyme binding）、蛋白磷酸酶结合（protein phosphatase binding）等。KEGG 通路富集分析（P<0.05）结果见图3，与新型冠状病毒感染相关的潜在通路主要涉及人巨细胞病毒感染（human cytomegalovirus infection）、卡波西肉瘤相关疱疹病毒感染（Kaposi sarcoma-associated herpesvirus infection）、TNF信号通路、IL-17信号通路等。

3.4 实验验证

3.4.1 对免疫低下模型小鼠脾脏和胸腺指数的影响

与空白组比较，模型组小鼠的脾脏指数和胸腺指数均显著降低（P<0.01）；与模型组比较，BWJD低剂量组的胸腺指数显著升高（P<0.01），高剂量组脾脏、胸腺指数均显著升高（P<0.01），表明BWJD可改善由环磷酰胺所致的脾脏指数和胸腺指数降低。见表1。

3.4.2 对免疫低下模型小鼠血常规的影响

模型组白细胞、中性粒细胞、淋巴细胞和单核细胞量均显著低于空白组（P<0.01），表明免疫低下小鼠造模成功。与模型组比较，BWJD低剂量组仅白细胞数量显著增多（P<0.01），中性粒细胞、淋巴细胞、单核细胞数量虽有增多，但差异无统计学意义（P>0.05）；BWJD高剂量组的白细胞、中性粒细胞、单核细胞数量显著升高（P<0.01），淋巴细胞数量上升，但差异无统计学意义（P>0.05），表明BWJD可改善由环磷酰胺引起的血细胞水平降低。见表2。

3.4.3 对免疫低下模型小鼠血清、脾脏和胸腺指标的影响

与空白组比较，模型组小鼠血清中的IgG、IgM、TNF-α和IL-1β水平均显著降低（P<0.01）；与模型组比较，BWJD低剂量组仅IL-1β水平显著增高（P<0.05），IgG、IgM和TNF-α也有增高，但差异无统计学意义（P>0.05）；BWJD高剂量组的IgG、IgM、TNF-α和IL-1β水平均显著升高（P<0.01， P<0.05），表明BWJD可改善由环磷酰胺引起的IgG、IgM、TNF-α和IL-1β的分泌减少。见表3。

与空白组比较，模型组小鼠脾脏、胸腺中TNF-α、IL-1β和SOD水平均显著降低（P<0.01）。与模型组比较，BWJD低剂量组、BWJD高剂量组的脾脏TNF-α、IL-1β和SOD分泌量均增加，其中BWJD低剂量组中的IL-1β和SOD水平与模型组比较差异有统计学意义（P<0.01），BWJD高剂量组的TNF-α和SOD与模型组比较差异有统计学意义（P<0.01）。与模型组比较，BWJD低剂量组、BWJD高剂量组的胸腺TNF-α、IL-1β和SOD分泌量均增加，其中BWJD低剂量组中的IL-1β和SOD水平与模型组比较差异有统计学意义（P<0.01），BWJD高剂量组的TNF-α、IL-1β和SOD与模型组比较差异有统计学意义（P<0.01， P<0.05）。结果见表4和表5。以上结果表明，BWJD可能通过调节脾脏和胸腺的TNF-α、IL-1β和SOD水平而发挥免疫调节作用。

4 讨论

“正气存内，邪不可干”，中医药在防治新型冠状病毒感染方面往往从机体整体状态出发，充分考量“正气”的调控作用，通过增强机体免疫力达到治疗作用^［7］。避瘟解毒颗粒可以理气和中、恢复脾胃气机正常的升降功能，从中医理论的角度来看，其具有“扶正”作用。同时现代药理研究发现，BWJD中多种成分已被证实具有免疫调节作用，如茯苓多糖可提高NK细胞和巨噬细胞活性及血清TNF-α的含量^［8］；连翘苷能提高免疫功能抑制小鼠的免疫器官指数、巨噬细胞吞噬能力和血清中免疫因子含量，降低外周血淋巴细胞中c AMP含量等^［9］。结合网络药理学结果与中医药理论，本研究开展动物实验进一步研究了BWJD对环磷酰胺致免疫低下小鼠的影响，并验证了相关通路的关键靶点。在给予颗粒提取物后，免疫功能低下小鼠脾脏、胸腺指数明显上升，血液中白细胞、中性粒细胞、单核细胞数量显著增多，血清中IgG、IgM、TNF-α、IL-1β和脾脏、胸腺中TNF-α、IL-1β含量显著提高，脾脏和胸腺中SOD活性增强。以上结果表明，BWJD可能通过作用TNF-α、IL-1β等靶点改善免疫功能。

KEGG通路富集分析结果显示，BWJD可能通过TNF和IL-17信号通路发挥防治新型冠状病毒感染的作用，二者均为经典的炎症反应信号通路，能够特异性调控炎症因子的表达。TNF信号通路在细胞凋亡、存活及免疫等方面发挥重要作用，文献报道BWJD中来源于陈皮的橘皮素可以显著下调慢性肾炎小鼠肾组织TNF-α和NF-κB p65的表达水平，同时下调磷酸化IKKα、IKKβ和IκBα的表达水平^［10］；来源于薄荷的大黄素可以显著上调人神经胶质瘤细胞U251的TNF-α蛋白表达水平^［11］；来源于甘草的刺芒柄花素可以降低溃疡性结肠炎小鼠结肠组织匀浆中TNF-α和IL1B的表达水平，减少TNF信号通路上SELE、ICAM1、VCAM1、IL1B、JUN、TNF、PTGS2和AKT1 mRNA的表达水平^［12］。IL-17信号通路受胞内关键信号转导分子Act1与TRAF6的调节^［13］，有报道称BWJD中，来源于紫苏叶和薄荷的木犀草素可以显著促进免疫损伤小鼠IL-17A和TRAF6的蛋白表达^［14］；来源于苍术的汉黄芩素可以显著降低肥胖诱导的心脏损伤小鼠中IL-17A、TRAF6等蛋白在心脏组织中的表达水平及p-NK-κB/NK-κB的比例^［15］。上述研究结果表明，BWJD可能通过调节TNF和IL-17信号通路等发挥免疫调节及防治新型冠状病毒感染的作用，具体的机制验证有待开展进一步研究。

尽管目前世界卫生组织宣布 COVID-19疫情不再构成“国际关注的突发公共卫生事件”，我国也将其划归“乙类乙管”，但是病毒持续突变，目前仍然存在突破性感染及多次重复感染风险^［16-17］。感染诱发的过度炎症反应所介导的免疫损伤是患者重症化的重要原因，基于流感、SARS及MERS的治疗经验，在应用广谱抗病毒治疗基础上联合糖皮质激素、干扰素、炎症因子抗体、甘草酸苷、连花清瘟胶囊、胸腺肽、康复期血浆等免疫调节类药物对改善患者预后有很大益处^［18-20］。本研究围绕BWJD治疗新型冠状病毒感染的作用机制展开研究，旨在为感染患者提供免疫调节类救治药物的有效补充。

参考文献

[1] 中华人民共和国国家卫生健康委员会. 新型冠状病毒感染诊疗方案（试行第十版）‍‍［J］. 中国合理用药探索， 2023， 20（1）： 1-11.

[2] National Health Commission of the People’s Republic of China. Diagnosis and treatment plan for novel coronavirus infection （tenth edition on trial）‍‍［J］. Chinese Journal of Rational Drug Use， 2023， 20（1）： 1-11.

[3] 陈志南， 边惠洁， 王珂. 新型冠状病毒感染免疫机制及干预策略‍［J］. 空军军医大学学报， 2023， 44（7）： 577-581.

[4] CHEN Zhinan， BIAN Huijie， WANG Ke. Immune response and intervention strategies of SARS-CoV-2 infection‍［J］. Journal of Air Force Medical University， 2023， 44（7）： 577-581.

[5] 韩宁， 杜凌遥， 严丽波. 新型冠状病毒介导炎症反应的机制及治疗策略‍［J］. 生物医学工程学杂志， 2020， 37（4）： 572-578.

[6] HAN Ning， DU Lingyao， YAN Libo. The mechanism and treatment strategies of SARS-CoV-2 mediated inflammatory response‍［J］. Journal of Biomedical Engineering， 2020， 37（4）： 572-578.

[7] 江晶晶， 冯富娟， 高春， 等. 新型冠状病毒肺炎的药物治疗研究进展‍［J］. 实用医学杂志， 2022， 38（7）： 786-790.

[8] JIANG Jingjing， FENG Fujuan， GAO Chun， et al. Research progress in drug therapy for COVID-19‍［J］. The Journal of Practical Medicine， 2022， 38（7）： 786-790.

[9] 马战平， 白丽君， 雷根平， 等. 陕西省新型冠状病毒肺炎中医药治疗方案（试行第三版）‍［J］. 陕西中医， 2022， 43（5）： 547-549.

[10] MA Zhanping， BAI Lijun， LEI Genping， et al. Traditional Chinese medicine treatment plan for novel coronavirus pneumonia in Shaanxi province （trial version 3）‍［J］. Shaanxi Journal of Traditional Chinese Medicine， 2022， 43（5）： 547-549.

[11] 伍梦玲， 欧阳林旗， 龙远雄， 等. 基于“扶正培本”研究鼻咽解毒胶囊免疫调节作用‍［J］. 中南药学， 2023， 21（4）： 945-952.

[12] WU Mengling， YANG Linqi OU， LONG Yuanxiong， et al. Mechanism of Biyan Jiedu Capsules in immunoregulation based on “Fuzheng Peiben”‍［J］. Central South Pharmacy， 2023， 21（4）： 945-952.

[13] 高昕， 孙文军， 高芳， 等. 基于治未病思想运用中医体质学说探讨预防新型冠状病毒肺炎‍［J］. 西北药学杂志， 2022， 37（1）： 168-171.

[14] GAO Xin， SUN Wenjun， GAO Fang， et al. Discussion about the prevention of coronavirus disease 19 based on the thought of treating non-disease and the theory of constitution of traditional Chinese medicine‍［J］. Northwest Pharmaceutical Journal， 2022， 37（1）： 168-171.

[15] 刘琪彧， 穆泓宇， 高源， 等. 中医药防治COVID-19的直接和间接调控作用研究进展‍［J］. 药学研究， 2023， 42（7）： 475-480.

[16] LIU Qiyu， MU Hongyu， GAO Yuan， et al. Progress of research on preventing and treating COVID-19 with traditional Chinese medicine based on direct and indirect actions‍［J］. Journal of Pharmaceutical Research， 2023， 42（7）： 475-480.

[17] 于晓东， 王立辛. 连翘苷拮抗环磷酰胺所致小鼠免疫抑制的实验研究‍［J］. 中国免疫学杂志， 2017， 33（8）： 1177-1180.

[18] YU Xiaodong， WANG Lixin. Experimental study on phillyrin resist mice immunosuppression induced by cyclophosphamide‍［J］. Chinese Journal of Immunology， 2017， 33（8）： 1177-1180.

[19] WU J， ZHAO Y M， DENG Z K. Tangeretin ameliorates renal failure via regulating oxidative stress， NF-κB-TNF-α/iNOS signalling and improves memory and cognitive deficits in 5/6 nephrectomized rats‍［J］. Inflammopharmacology， 2018， 26（1）： 119-132.

[20] ZHOU J， LI G， HAN G， et al. Emodin induced necroptosis in the glioma cell line U251 via the TNF-α/RIP1/RIP3 pathway‍［J］. Invest New Drugs， 2020， 38（1）： 50-59.

[21] ZHANG D， DUAN S， HE Z， et al. Sijunzi decoction targets IL1B and TNF to reduce neutrophil extracellular traps （NETs） in ulcerative colitis： Evidence from Silicon prediction and experiment validation‍［J］. Drug Des Devel Ther， 2023， 17： 3103-3128.

[22] 史艳丽， 王云超， 杨震， 等. 宣肺止嗽方对COPD模型大鼠IL-17信号通路的影响‍［J］. 中国实验方剂学杂志， 2024， 30（9）： 28-39.

[23] SHI Yanli， WANG Yunchao， YANG Zhen， et al. Effect of Xuanfei Zhisou Prescription on IL-17 signaling pathway in COPD model rats‍［J］. Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae， 2024， 30（9）： 28-39.

[24] WANG T， JIANG G， LV S， et al. Avian safety guardian： Luteolin restores mycoplasma gallisepticum-induced immunocompromise to improve production performance via inhibiting the IL-17/NF-kB pathway‍［J］. Int Immunopharmacol， 2023， 124（Pt B）： 110946.

[25] ZHOU C， YIN X. Wogonin ameliorated obesity-induced lipid metabolism disorders and cardiac injury via suppressing pyroptosis and deactivating IL-17 signaling pathway‍［J］. Am J Chin Med， 2022， 50（6）： 1553-1564.

[26] NARANJE P， BHALLA A S， JANA M， et al. Imaging of pulmonary superinfections and Co-infections in COVID-19‍［J］. Curr Probl Diagn Radiol， 2022， 51（5）： 768-778.

[27] NADEEM R， ALJAGHBER H M， ELGOHARY D， et al. Procalcitonin testing with secondary coinfection in patients with COVID-19‍［J］. Cureus， 2022， 14（9）： e28898.

[28] 张鼎， 梁栋. 复方甘草酸苷治疗新型冠状病毒肺炎的机理‍［J］. 临床合理用药， 2023， 16（19）： 173-175.

[29] ZHANG Ding， LIANG Dong. Mechanism of compound glycyrrhizin in treating novel coronavirus pneumonia‍［J］. Chinese Journal of Clinical Rational Drug Use， 2023， 16（19）： 173-175.

[30] 任超， 姚咏明. 新型冠状病毒肺炎： 重症肺炎与免疫紊乱‍［J］. 中国实用内科杂志， 2022， 42（3）： 177-181.

[31] REN Chao， YAO Yongming. COVID-19： Severe pneumonia and immune dysfunction‍［J］. Chinese Journal of Practical Internal Medicine， 2022， 42（3）： 177-181.

[32] 张波， 陆静尔， 姜昊， 等. 营养干预和免疫调节治疗在奥密克戎变异株感染重症肺炎中的疗效观察‍［J］. 现代实用医学， 2023， 35（3）： 316-318.

[33] ZHANG Bo， LU Jinger， JIANG Hao， et al. Efficacy observation of nutritional intervention and immunomodulatory therapy in severe pneumonia caused by omicron variant infection‍［J］. Modern Practical Medicine， 2023， 35（3）： 316-318.

基金资助

国家中医药管理局—宋虎杰全国名老中医药专家传承工作室建设项目

陕西省中医药管理局“秦药”开发重点科学研究项目(2021-02-ZZ-002)

陕西省中医药管理局“秦药”开发重点科学研究项目(2021-02-ZZ-019)

陕西省重点研发计划项目(2021ZDLSF04-06)

陕西省重点研发计划项目(2022ZDXM-SF-06)

陕西省“秦药”研发重点实验室项目(2021-QYPT-001)

秦创原中医药创新研发转化项目(2022-QCYZH-006)

西安市科技计划项目(23YXYJ0175)