阿瑞匹坦过饱和自乳化颗粒剂的制备与体内外评价

Preparation and in vivo evaluation of aprepitant supersaturated self-emulsifying drug delivery system granules

摘要

目的 制备阿瑞匹坦过饱和自乳化颗粒剂（aprepitant supersaturated self-emulsifying drug delivery systems， APR-S-SEDDSs），并系统评价其理化性质、体外溶出行为及大鼠体内药动学特征。 方法 通过溶解度实验、辅料相容性实验及伪三元相图，确定阿瑞匹坦自乳化释药系统（aprepitant self-emulsifying drug delivery systems， APR-SEDDSs）的处方组成及比例；采用喷雾干燥法将APR-SEDDSs与不同沉淀抑制剂混合制备成APR-S-SEDDSs颗粒剂，通过测定APR-S-SEDDSs颗粒剂的理化性质筛选得到最优沉淀抑制剂；观察APR-S-SEDDSs颗粒剂形成微乳的微观形态并测定其体外溶出曲线；测定APR-SEDDSs颗粒剂、APR-S-SEDDSs颗粒剂和市售制剂在大鼠体内的血药浓度，计算药动学参数并比较各组生物利用度。 结果 APR-SEDDSs的处方组成为：丙二醇单辛酸酯（capryol 90）为油相，辛酸/癸酸聚乙二醇甘油酯（labrasol）为表面活性剂，二乙二醇单乙基醚（transcutol HP）为助表面活性剂，质量比为2∶2∶1；羟丙基纤维素（hydroxypropyl cellulose， HPC-SL）为沉淀抑制剂，APR-S（HPC-SL）-SEDDSs颗粒剂水化形成的微乳呈类球状，分散性良好。APR-S（HPC-SL）-SEDDSs颗粒剂在pH 1.2盐酸介质中快速溶出，15 min即可达到80%以上，且在pH 6.8磷酸盐缓冲液中药物可在240 min内维持较高浓度；大鼠体内药动学结果显示，APR-S（HPC-SL）-SEDDSs颗粒剂可显著提高药物的口服生物利用度，是市售制剂的2.53倍。 结论 本研究将阿瑞匹坦制备成过饱和自乳化颗粒剂，可显著提高药物的溶出速度，抑制药物析出，有利于药物充分吸收。

Abstract

Objective To prepare aprepitant supersaturated self-emulsifying drug delivery systems （APR-S-SEDDSs） granules and evaluate pharmacokinetics in rats. Methods The composition and amount of APR-SEDDSs were determined by solubility test， compatibility test and pseudo-ternary phase diagram. And APR-S-SEDDSs granules were prepared by spray drying method. The optimal precipitation inhibitor was screened by determining the physicochemical properties of APR-S-SEDDSs granules. The microemulsion morphology and dissolution of APR-S_（HPC-SL）-SEDDSs granules were evaluated. The pharmacokinetic behavior of APR-SEDDSs granules， APR-S_（HPC-SL）-SEDDSs granules and commercial preparations in rats was compared. Results The formulations of APR-SEDDSs were as follows： Propylene glycol monooctanoate （capryol 90） was the oil phase， Capryol/capric acid polyethylene glycol glycerol （labrasol） was the surfactant， and Diethylene glycol monoethyl ether （transcutol HP） was the co-surfactant， with a mass ratio of 2∶2∶1. The microemulsion formed by APR-S_（HPC-SL）-SEDDSs granules was spheroidal and well dispersed. The APR-S_（HPC-SL）-SEDDSs granules dissolved quickly in pH1.2 hydrochloric acid medium， reaching over 80% within 15 minutes. And in pH6.8 phosphate salt buffer solution， the drug could maintain a relatively high concentration for 240 minutes. The pharmacokinetic results in rats showed that the APR-S_（HPC-SL）-SEDDSs granules could significantly improve the oral bioavailability of the drug， which was 2.53 times that of reference formulation. Conclusion The APR-S_（HPC-SL）-SEDDSs could significantly increase the dissolution rate， inhibit the drug precipitation and facilitate the full absorption of the drug.

Graphical abstract

关键词

阿瑞匹坦 / 过饱和自乳化释药系统 / 喷雾干燥 / 颗粒剂 / 沉淀抑制剂 / 生物利用度

Key words

aprepitant / supersaturated self-emulsifying drug delivery systems / spray drying / granules / precipitation inhibitor / bioavailability

阿瑞匹坦（aprepitant， APR）作为神经激肽1（neurokinin 1， NK1）受体特异性阻滞剂，主要用于预防化疗的初次及重复治疗过程中出现的急性与迟发性恶心呕吐症状^［1］。APR归属于生物药剂学分类系统（biopharmaceutics classification system， BCS）Ⅳ类，因其自身水溶性和渗透性均较低，导致口服后吸收不完全，生物利用度显著受限^［2］。因此，通过制剂学手段提高其溶解度，成为改善其口服生物利用度的关键策略^［3-4］。

过饱和自乳化释药系统（supersaturated self-emulsifying drug delivery systems， S-SEDDSs）是由油相、表面活性剂、助表面活性剂、药物和沉淀抑制剂组成的均一分散体系。该系统经口服后，可在胃肠道温和蠕动与体液作用下快速分散并形成纳米级水包油（以O/W表示）型微乳，药物可溶解于微乳的油相及表面活性剂界面层中，且能通过淋巴转运途径避免肝脏首过效应，从而有效提升药物口服生物利用度，作为新型给药系统近年来受到科研人员的广泛关注^［5-6］。然而，传统S-SEDDSs多为液态油状制剂，存在用药顺应性差、携带与储存不便、药物易泄漏等固有缺陷，将其转化为固体剂型是克服上述问题的有效途径^［7］。

基于此，本研究以APR为模型药物，制备过饱和自乳化释药系统并进一步固化为颗粒剂，通过动物体内药动学实验评价其口服生物利用度，旨在为APR的二次开发及临床应用拓展提供理论依据与技术支撑。

1 仪器与试药

1.1 仪器

HT-110X30型恒温水浴摇床（上海赫田科学仪器有限公司）；Zetasizer Nano ZS90型纳米粒度电位仪（英国马尔文公司）；Mini Büchi B-191型喷雾干燥器（瑞士步琦公司）；TGL16A型台式高速冷冻离心机（盐城市凯特实验仪器有限公司）；JEM-1200EX型透射式电子显微镜（日本电子株式会社）；RC-8HD型溶出试验仪（天津市精拓仪器科技有限公司）。

1.2 试药

阿瑞匹坦（质量分数为99.5%，四川青木制药有限公司）；月桂酸丙二醇酯（lauroglycol FCC）、单亚油酸甘油酯（maisine 35-1）、油酰聚氧乙烯甘油酯（labrafil M 1944 CS）、丙二醇单辛酸酯（capryol 90）、单辛酸甘油酯（imwitor 988），辛酸/癸酸聚乙二醇甘油酯（labrasol）、二乙二醇单乙基醚（transcutol HP）、薄荷油、蓖麻油、橄榄油、油酸，均购自嘉法狮贸易有限公司；聚氧乙烯氢化蓖麻油（cremophor RH 40）、聚乙烯吡咯烷酮K30（polyvinylpyrrolidone K30，PVP-K30）、泊洛沙姆188（poloxamer 188）、辛酸/癸酸甘油三酯（miglyol 812）、聚乙二醇-15羟基硬脂酸酯（solutol HS-15）、聚乙烯已内酰胺-聚醋酸乙烯酯-聚乙二醇接枝共聚物（soluplus），均购自巴斯夫应用化工有限公司；聚乙二醇200（polyethylene glycol 200，PEG 200）、聚乙二醇400（polyethylene glycol 400，PEG 400）、聚乙二醇600（polyethylene glycol 600，PEG 600）、丙二醇、吐温20（Tween 20）、吐温80（Tween 80），均购自南京威尔化工有限公司；羟丙甲基纤维素E5（hydroxypropyl methyl cellulose E5，HPMC-E5），购自美国陶氏化学公司；羟丙基纤维素SL（hydroxypropyl cellulose SL，HPC-SL），购自日本曹达株式会社。

2 方法与结果

2.1 溶解度的测定

2.1.1 APR在不同pH介质溶液中的溶解度测定

采用摇瓶法^［8］测定APR在不同pH介质溶液中的平衡溶解度。分别精密量取pH 1.2盐酸溶液、pH 4.5醋酸盐缓冲液、pH 6.8磷酸盐缓冲液及pH 7.4磷酸盐缓冲液各5.0 mL，置于具塞玻璃离心管中，加入过量APR原料药，旋紧管塞后，涡旋混匀5 min，置于25 ℃恒温水浴摇床中振摇72 h，确保达到溶解平衡。平衡后，以5 000 r·min^-1离心15 min，取上清液，经0.22 µm有机相微孔滤膜过滤，取续滤液，用甲醇稀释至适宜质量浓度，测定药物质量浓度，计算APR在各pH缓冲液中的溶解度。见表1。结果显示，APR在酸性介质溶液中溶解度较高，而随着pH值增加，药物溶解度明显降低，表明其溶解度具有pH依赖性。

2.1.2 APR在不同辅料中的溶解度测定

采用摇瓶法测定APR在不同油相辅料（lauroglycol FCC、capryol 90、miglyol 812、maisine 35-1、imwitor 988、薄荷油、蓖麻油、橄榄油和油酸）、表面活性剂（cremophor RH40、labrasol、Tween 20、Tween 80、solutol HS15和labrafil M 1944 CS）及助表面活性剂（transcutol HP、PEG 200、PEG 400、PEG 600和丙二醇）中的平衡溶解度。精密称取上述各辅料2.0 g，分别置于具塞玻璃离心管中，加入过量APR原料药，旋紧管塞后，涡旋混匀5 min，置于25 ℃恒温水浴摇床中振摇72 h以达到溶解平衡。平衡后，以5 000 r·min^-1离心15 min，取上清液，经0.45 µm有机相微孔滤膜过滤，续滤液用甲醇稀释至适宜浓度，测定药物质量浓度，计算APR在各辅料中的溶解度。见表2。

筛选对药物溶解性较高的辅料是提高SEDDSs载药量的关键前提，可确保SEDDSs进入体内经胃肠体液稀释后，药物仍能维持溶解状态^［9］。油相辅料中，lauroglycol FCC、capryol 90、imwitor 988和薄荷油对APR的溶解能力较高，溶解度分别为（15.15±0.62）、（17.58±0.53）、（19.77±0.46）和（16.74±0.52） mg·g^-1。表面活性剂中，APR在labrasol中的溶解度较高，达（16.27±0.41） mg·g^-1。助表面活性剂中，transcutol HP对APR溶解度最高，达（47.54±0.98） mg·g^-1。

2.2 相容性考察

基于上述溶解度筛选结果，进一步通过乳化稳定性及透光率指标对油相、表面活性剂及助表面活性剂进行优化筛选。精密称取表面活性剂（labrasol）0.4 g，助表面活性剂（transcutol HP）0.2 g，置于具塞玻璃离心管中，涡旋混匀5 min，随后分别加入油相辅料（lauroglycol FCC、capryol 90、imwitor 988、薄荷油）各0.4 g，继续涡旋混匀5 min，以5 000 r·min^-1离心10 min，观察体系是否出现分层。

取离心后无分层的混合物0.2 g，加入pH 1.2盐酸溶液100 mL，在100 r·min^-1磁力搅拌条件下，记录乳化时间及乳液外观，并参照文献^［10］的自乳化等级进行目视评价。A级为1 min内快速形成透明状微乳液，外观呈淡蓝色；B级为在1 min内快速形成略透明状微乳液，外观呈蓝白色；C级为2 min内形成不透明状乳液，外观呈亮白色；D级为超过2 min形成略带油状的不透明状乳液，外观呈暗灰白色；E级为乳化效果极差，表面可见大量油滴。同时，采用紫外-可见分光光度计在最大吸收波长650 nm处测定各组乳液的透光率。见表3。

相容性实验结果显示，以capryol 90为油相，labrasol为表面活性剂，transcutol HP为助表面活性剂组成的自乳化体系，经离心后无分层现象，乳化后形成淡蓝色透明微乳液，且透光率显著高于其他组合，表明该组辅料间相容性较好。综上所述，最终确定APR-SEDDSs的最优辅料组合为：油相capryol 90、表面活性剂labrasol、助表面活性剂transcutol HP。

2.3 伪三元相图的绘制与自乳化处方的优化

将表面活性剂（labrasol）与助表面活性剂（transcutol HP）按质量比3∶1、2∶1、1∶1及1∶2分别混合，制备得到4种表面活性剂-助表面活性剂混合物（Smix）。随后将油相与各Smix按质量比1∶9、2∶8、3∶7、4∶6、5∶5、6∶4、7∶3、8∶2、9∶1依次混合，得到系列混合物。精密称取各混合物0.2 g，加入pH 1.2盐酸溶液100 mL，在100 r·min^-1磁力搅拌条件下，记录乳化时间及乳液外观，并采用紫外-可见分光光度计在650 nm波长处测定乳液透光率。以乳液透光率>90%作为自乳化体系的判定标准，利用Origin 9.1软件绘制三元相图，确定自乳化区域范围。见图1。

结果显示，当Smix质量比为2∶1时，体系可获得最大的自乳化区域（图1B）；当Smix质量比为1∶1时，形成的微乳液呈乳白色，自乳化区域面积显著减小（图1C）；当Smix质量比为1∶2时，自乳化区域进一步缩减（图1D）。这一现象提示，表面活性剂比例增加有助于减小微乳粒径，而助表面活性剂比例过高时，其强水溶性会导致界面膜膨胀，破坏界面膜稳定性，进而增大微乳粒径^［11］。此外，当Smix质量比提高至3∶1时，自乳化区域未进一步扩大，反而呈轻微缩小趋势（图1A），推测原因是过量表面活性剂会在界面单层膜上聚集形成多层膜结构，影响自乳化效率^［12］。

综合伪三相图分析结果，最终确定Smix的最佳质量比为2∶1，确定APR-SEDDSs的处方组成及比例为油相（capryol 90）∶表面活性剂（labrasol）∶助表面活性剂（transcutol HP）=2∶2∶1（质量比）。

2.4 APR-SEDDSs的制备

精密称取表面活性剂labrasol 10.0 g与助表面活性剂transcutol HP 5.0 g，依次加入具塞玻璃试管中，涡旋混匀5 min；再精密称取油相capryol 90 10.0 g加入上述体系中，继续涡旋混匀5 min，得到均匀透明的均一液体。另精密称取APR原料药400 mg，加入该混合体系中，持续涡旋混匀至药物完全溶解，即得APR-SEDDSs。将其密封后置于阴凉干燥处保存，用于后续实验研究。

2.5 沉淀抑制剂的筛选

选取HPC-SL、HPMC-E5、PVP-K30、 oloxamer 188和soluplus作为潜在沉淀抑制剂，采用溶剂置换法进行筛选^［13］。精密称取APR 200.0 mg，加入10 mL无水乙醇中，磁力搅拌使药物完全溶解，制备成质量浓度为20.0 mg·mL^-1的APR乙醇溶液；分别配制含上述不同沉淀抑制剂的pH 6.8磷酸盐缓冲液，各取200 mL，置于溶出杯中，维持溶出介质温度为（37±1） ℃，搅拌转速为100 r·min^-1。取上述APR乙醇溶液1.0 mL，快速加入溶出杯中，分别于给药后15、30、45、60、90、120、180、240、360 min时，取样2 mL，立即经0.22 µm有机相微孔滤膜过滤，取续滤液适当稀释后，测定药物质量浓度，计算各时间点的药物质量浓度。见图2。

实验结果显示，未添加沉淀抑制剂的溶出介质中，药物质量浓度维持在较低水平，提示APR几乎完全沉淀析出；而添加不同沉淀抑制剂的各组溶出介质中均能稳定检测到药物，其沉淀抑制效果排序为：HPC-SL>PVP-K30≈HPMC-E5>poloxamer 188>soluplus。其中，HPC-SL、PVP-K30及HPMC-E5可显著抑制APR的沉淀析出，使体系中APR的质量浓度维持在4 µg·mL^-1以上长达360 min，推测其机制可能为：HPC-SL、PVP-K30与HPMC-E5均属于水溶性亲水性聚合物，分子结构中富含羟基，可与APR分子中的氨基形成分子间氢键相互作用，从而延长APR在溶出介质中的过饱和维持时间；而poloxamer 188和soluplus均为非离子型表面活性剂，分子中羟基基团数量较少，难以通过氢键作用稳定APR的过饱和状态，故沉淀抑制效果较弱^［14］。结合上述实验结果，最终筛选HPC-SL、PVP-K30、HPMC-E5作为候选沉淀抑制剂，用于后续处方的进一步优化研究。

2.6 固体APR-S-SEDDSs的制备

采用喷雾干燥法制备固体APR-S-SEDDSs^［15］。精密量取“2.4”项下制备的APR-SEDDSs 20.0 g，分散于1 000 mL纯化水中，搅拌形成均一微乳，将该微乳均分成4份。分别精密称取HPC-SL、PVP-K30、HPMC-E5各0.5 g，分别溶于50 mL纯化水中，制备得到3种沉淀抑制剂溶液；另取50 mL纯化水作为空白对照组。将上述4种溶液分别加入对应微乳中，分别标记后充分搅拌均匀，再向各体系中加入甘露醇，搅拌至完全溶解，使甘露醇终质量分数达到10%。

采用喷雾干燥机对4种样品分别进行喷雾干燥，工艺参数设定如下：进风温度105 ℃，出风温度55~60 ℃，进液速率4~5 mL·min^-1，进气量301~414 L·h^-1，干燥气体流量75%~80%。收集喷雾干燥后的颗粒，即得含不同沉淀抑制剂的APR-S-SEDDSs颗粒剂，密封后置于干燥环境中保存备用。

2.6.1 复溶效果评价

精密称取含不同沉淀抑制剂的APR-S-SEDDSs颗粒剂喷雾干燥后各1.0 g，分别加入100 mL pH 6.8磷酸盐缓冲液中，在100 r·min^-1磁力搅拌下至完全分散，静置后取上清液，采用马尔文激光粒度仪测定微乳的粒径分布、多分散性指数（polydispersity index，PDI）和Zeta电位，并与固化前的APR-SEDDSs微乳的自乳化性能进行对比分析。见表4。

复溶效果评价结果表明，APR-S_（HPC-SL）-SEDDSs颗粒剂复溶后形成的微乳，其粒径、PDI和Zeta电位与喷雾干燥前的APR-SEDDSs微乳均保持高度一致性；而含其他沉淀抑制剂的APR-S-SEDDSs颗粒剂复溶后形成的微乳，粒径均较固化前明显增大。该结果提示，不同类型的沉淀抑制剂对APR-S-SEDDSs的复溶后自乳化特性具有显著调控作用。

2.6.2 复溶稳定性评价

精密称取含不同沉淀抑制剂的APR-S-SEDDSs颗粒剂各1.0 g，分别加入100 mL pH 6.8磷酸盐缓冲液中，在100 r·min^-1磁力搅拌下至完全分散，静置后分别于0、6 h观察体系外观变化，并取样测定微乳的粒径分布；同时各取2 mL溶液，立即经0.22 µm有机相微孔滤膜过滤，取续滤液适当稀释后，测定药物含量。见表5。

实验结果显示，5组样品（含HPC-SL、PVP-K30、HPMC-E5的APR-S-SEDDSs颗粒剂，空白对照颗粒剂及固化前APR-SEDDSs）复溶后放置6 h内均未出现相分离现象；但不含沉淀抑制剂的2组样品（空白对照颗粒剂及固化前APR-SEDDSs）复溶后静置6 h，玻璃瓶底部均出现明显药物沉淀析出，溶液中药物质量浓度显著降低；而含3种沉淀抑制剂的APR-S-SEDDSs颗粒剂复溶后静置6 h，药物沉淀现象不明显，溶液中药物质量浓度轻微降低。此外，5组样品复溶后6 h的粒径与初始0 h相比未发生明显变化。

综合复溶后自乳化特性及物理稳定性评价结果，本研究最终确定选用HPC-SL作为沉淀抑制剂制备APR-S_（HPC-SL）-SEDDSs颗粒剂，用于后续实验研究。

2.7 透射电镜（transmission electron microscopy，TEM）观察

采用TEM观察APR-S_（HPC-SL）-SEDDSs颗粒剂复溶后形成微乳的微观形貌。取APR-S_（HPC-SL）-SEDDSs颗粒剂适量，用pH 1.2盐酸溶液稀释至100倍体积，磁力搅拌使其充分分散形成均一微乳液。取1滴上述微乳液滴加到碳涂层的铜网格表面，自然铺展形成均匀液膜，随后用2%（w/v）磷钨酸溶液进行负染色处理，在室温下晾干，置于TEM下观察并记录微乳的微观形态。见图3。

电镜结果显示，复溶后形成的微乳颗粒呈类球形结构，在视野中呈灰黑色反差，颗粒分散均匀，无明显聚集现象，且视野内未发现明显药物沉淀颗粒，表明该固体自乳化系统复溶后可形成稳定的微乳体系。

2.8 体外溶出考察

采用《中国药典》（2020年版）通则0931溶出度与释放度测定法第一法（转篮法），对APR-SEDDSs颗粒剂、APR-S_（HPC-SL）-SEDDSs颗粒剂和市售APR制剂的体外溶出行为进行对比研究。将APR-SEDDSs颗粒剂与APR-S_（HPC）-SEDDSs颗粒剂分别精密装入“0”号空心胶囊中，每粒含阿瑞匹坦40 mg；分别取上述两种自制胶囊和市售制剂置于溶出仪转篮内，启动溶出实验。

初始溶出介质采用经脱气处理的pH 1.2盐酸溶液（模拟人体胃液环境），体积为450 mL；持续溶出120 min后，向溶出杯中加入450 mL 0.5 mol·L^-1磷酸氢二钠溶液，调节体系pH值至6.8（模拟人体肠液环境）^［16］。实验过程中维持溶出介质温度为（37±0.5） ℃，转篮转速为100 r·min^-1。分别于规定时间点（5、10、15、30、60、120、130、150、180、240、300、360 min）精密量取5 mL溶出介质，同时补充等温等体积的空白溶出介质以维持体系体积恒定。取出的样品立即经0.22 µm微孔滤膜过滤，取续滤液适当稀释后，测定药物含量，计算累计溶出度，以时间为横坐标、累计溶出度为纵坐标绘制溶出曲线。

体外溶出实验结果显示，在pH 1.2盐酸介质中，APR-SEDDSs颗粒剂和APR-S_（HPC-SL）-SEDDSs颗粒剂的溶出行为表现出高度一致性，二者均能在30 min内实现累计溶出度达85%以上，60 min时基本达到完全溶出。而市售制剂的溶出速率显著滞后，60 min时累计溶出度仅为18%，至120 min仍不足25%，该结果证实，将APR制备为自乳化颗粒剂可有效突破其溶解性限制，显著提升药物的溶出速率。当溶出介质转换成pH 6.8磷酸盐缓冲液后，进一步可以观察到，不含沉淀抑制剂的APR-SEDDSs颗粒剂和市售制剂在转换介质10 min后，溶液中药物含量均出现明显下降趋势；而以HPC-SL为沉淀抑制剂的APR-S_（HPC-SL）-SEDDSs颗粒剂，药物含量下降趋势显著减缓，至360 min时仍能维持80%以上的药物含量。体外溶出度结果表明，采用HPC-SL作为沉淀抑制剂制备的APR-S_（HPC-SL）-SEDDSs颗粒剂，不仅能显著加快药物的溶出速度，还能有效抑制药物在肠液环境中的沉淀析出，为维持体内有效血药浓度提供了保障。

2.9 体内药动学研究

采用SD大鼠评价APR-SEDDSs颗粒剂、APR-S_（HPC-SL）-SEDDSs颗粒剂和市售制剂的口服生物利用度。选取18只SD大鼠，雌雄各半，体质量为（200±20） g，随机分为A、B、C组，每组6只。实验前大鼠禁食12 h，自由饮水。A组灌胃给予APR-SEDDSs颗粒剂，B组灌胃给予APR-S_（HPC-SL）-SEDDSs颗粒剂，C组灌胃给予市售制剂，给药剂量均为150 mg·kg^-1［17］，给药后4 h恢复自由饮水。分别于给药后0.5、1、2、3、4、5、6、8、12、24 h，从大鼠眼眶后静脉丛穿刺采血0.3~0.5 mL，置于肝素钠抗凝离心管内，立即以4 000 r·min^-1离心15 min，分离血浆，置于-80 ℃冰箱冷冻保存，备用。

血浆样品室温缓慢解冻后，精密移取100 μL至离心管中，加入10 μg·mL^-1地西泮溶液20 μL，涡旋混匀5 min；再加入乙酸乙酯300 μL，涡旋混匀5 min，以10 000 r·min^-1离心10 min，取上清液转移至尖底离心管中，40 ℃下氮气吹干有机溶剂。残渣加入流动相100 μL，旋涡混匀5 min复溶，以10 000 r·min^-1离心10 min，取上清液20 μL注入到高效液相色谱系统检测药物浓度。

色谱系统检测条件：色谱柱为Diamonsil C₁₈（4.6 mm×150 mm，5 μm）；流速为1.0 mL·min^-1；柱温为35 ℃；以乙腈-0.1mol·L^-1磷酸二氢钾缓冲液（磷酸调节pH至3.0）（体积比为45∶55）为流动相；检测波长为210 nm。方法学验证结果：线性范围为0.1~20.0 μg·mL^-1，相关系数R²=0.998 5；线性范围内3个质量浓度水平的精密度和准确度RSD均<15%（n=6）；加样回收率为85%~115%，RSD均<15%（n=6）；检测限（信噪比为3）为0.02 μg·mL^-1，定量限（信噪比为10）为0.04 μg·mL^-1。

采用WinNonlin药代动力学软件计算主要药动学参数，结果见表6，血药浓度-时间曲线见图5。采用SPSS 19.0软件对数据进行处理，计量资料以（\overline{x}±s）表示，比较采用t检验。P<0.05为差异有统计学意义。

结果显示，与市售制剂比较，APR-SEDDSs颗粒剂和APR-S_（HPC-SL）-SEDDSs颗粒剂的药-时曲线下面积（area under the curve，AUC）均显著提高（P<0.05），分别为市售制剂的1.55、2.53倍，提示APR-SEDDSs颗粒剂和APR-S_（HPC-SL）-SEDDSs颗粒剂均能够显著提高APR的口服生物利用度。进一步组间比较发现，APR-S_（HPC-SL）-SEDDSs颗粒剂的AUC显著高于APR-SEDDSs颗粒剂（P<0.05），为其1.63倍，表明添加HPC-SL作为沉淀抑制剂的制剂在改善生物利用度方面更具优势。该结果的核心机制在于，沉淀抑制剂可有效维持APR在胃肠道体液中的过饱和状态，减少药物沉淀析出，利于药物在肠道内的充分吸收，从而进一步提升生物利用度。

3 讨论

本研究通过系统考察APR在不同油相、表面活性剂和助表面活性剂中的平衡溶解度，并结合辅料配伍相容性实验结果，初步筛选出潜在的处方组分；进一步通过伪三元相图绘制优化处方比例，最终确定APR-SEDDSs的最优处方组成：Capryol 90为油相，Labrasol为表面活性剂，Transcutol HP为助表面活性剂，三者质量比为2∶2∶1。

SEDDSs遇水形成微乳后，难溶性药物通常处于过饱和状态，易发生晶体析出，因此需引入沉淀抑制剂抑制药物晶体生长或干扰成核过程^［18］。本研究系统评价了HPC-SL、HPMC-E5、PVP-K30、Poloxamer 188和Soluplus等5种潜在沉淀抑制剂对APR的沉淀抑制效果，综合筛选出抑制作用最优的HPC-SL作为最终处方的沉淀抑制剂。

在辅料相容性考察和伪三元相图绘制过程中，选择pH 1.2盐酸溶液进行处方筛选，主要基于制剂进入体内后与胃液接触并发生自乳化的生理过程，故体外采用该介质模拟胃肠道的酸性环境；而沉淀抑制剂筛选时选用pH 6.8磷酸盐缓冲液，主要由于APR的溶解度具有显著的pH依赖性（高pH环境下溶解度显著降低），该介质可更精准地模拟药物在肠道环境中的溶解行为，从而筛选出能有效维持药物过饱和状态的沉淀抑制剂。

液态SEDDSs的固化技术包括喷雾干燥、固体载体吸附、熔体挤出、熔融造粒及超临界流体技术等。其中，喷雾干燥技术具有生产效率高、所得颗粒流动性良好且可直接与辅料混合后装胶囊或压片的优势，已成为SEDDSs固化的主流技术路径。基于此，本研究采用喷雾干燥技术实现APR-S-SEDDSs的固化，为后续制剂开发提供了便利。

参考文献

[1] 顾秋君，陈志高.阿瑞匹坦治疗肿瘤化疗所致恶心呕吐的研究进展［J］.中国医药科学，2020，10（19）：48-51．

[2] GU Qiujun， CHEN Zhigao. Progress on clinical research of aprepitant in treating nausea and vomiting caused by tumor chemotherapy［J］. China Medicine and Pharmacy，2020，10（19）：48-51．

[3] NAZLı H， MESUT B， AKBAL-DAĞıSTAN Ö， et al. A novel semi-solid self-emulsifying formulation of aprepitant for oral delivery：An in vitro evaluation［J］.Pharmaceutics，2023，15（5）：1509．

[4] LIU J， LI S， AO W， et al. Fabrication of an aprepitant nanosuspension using hydroxypropyl chitosan to increase the bioavailability［J］. Biochem Biophys Res Commun，2022，631：72-77．

[5] LALE A S， SIRVI A， DEBAJE S， et al. Supersaturable diacyl phospholipid dispersion for improving oral bioavailability of brick dust molecule： A case study of Aprepitant［J］. Eur J Pharm Biopharm，2024，197：114241．

[6] PARK H， HA E S， KIM M S. Current status of supersaturable self-emulsifying drug delivery systems［J］. Pharmaceutics，2020，12（4）：365．

[7] GAO P， MOROZOWICH W. Development of supersaturatable self-emulsifying drug delivery system formulations for improving the oral absorption of poorly soluble drugs［J］. Expert Opin Drug Deliv，2006，3（1）：97-110．

[8] KUMAR M， CHAWLA P A， FARUK A， et al. Spray drying as an effective method in the development of solid self-emulsifying drug delivery systems［J］. Curr Drug Deliv，2023，20（5）：508-525．

[9] 王萌.和厚朴酚自乳化释药系统的制备与药动学评价［J］.西北药学杂志，2023，38（5）：84-91．

[10] WANG Meng. Preparation and pharmacokinetic evaluation of honokiol self-emulsifying drug delivery systems［J］. Northwest Pharmaceutical Journal，2023，38（5）：84-91．

[11] KARWAL R， GARG T， RATH G， et al. Current trends in self-emulsifying drug delivery systems （SEDDSs） to enhance the bioavailability of poorly water-soluble drugs［J］. Crit Rev Ther Drug Carrier Syst，2016，33（1）：1-39．

[12] 巨鲜婷，王颖.头孢托仑匹酯超饱和自乳化颗粒剂的制备及质量评价［J］.药物评价研究，2023，46（10）：2165-2171．

[13] JU Xianting， WANG Ying. Preparation of cefditoren pivoxil supersaturated self-emulsifying drug delivery systems granules［J］. Drug Evaluation Research，2023，46（10）：2165-2171．

[14] ALOISIO C， BUENO M S， PONTE M P， et al. Development of solid self-emulsifying drug delivery systems （SEDDS） to improve the solubility of resveratrol［J］. Ther Deliv，2019，10（10）：626-641．

[15] GAO S， CHEN J， PENG W， et al. The preparation and relative bioavailability of an artemisin in self-emulsifying drug delivery system［J］. Drug Deliv，2023，30（1）：2168794．

[16] JEDE C， WAGNER C， KUBAS H， et al. Improved prediction of in vivo supersaturation and precipitation of poorly soluble weakly basic drugs using a biorelevant bicarbonate buffer in a gastrointestinal transfer model［J］. Mol Pharm，2019，16（9）：3938-3947．

[17] PLUM J， BAVNHØJ C G， ELIASEN J N， et al. Comparison of induction methods for supersaturation：Amorphous dissolution versus solvent shift［J］. Eur J Pharm Biopharm，2020，152：35-43．

[18] AUNG W T， KOPONGPANICH P， BOONKANOKWONG V. Supersaturable solid self-microemulsifying delivery systems of astaxanthin via spray drying： Effects of polymers and solid carriers［J］. AAPS PharmSciTech，2023，24（8）：218．

[19] 孙经宽，刘晶红.木犀草素过饱和自乳化释药系统的制备与大鼠药动学的研究［J］.沈阳药科大学学报，2023，40（10）：1277-1283．

[20] SUN Jingkuan， LIU Jinghong. Preparation and in vivo pharmacokinetics of luteolin supersaturated self-microemulsifying drug delivery systems［J］. Journal of Shenyang Pharmaceutical University，2023，40（10）：1277-1283．

[21] 李倩，张晓燕，段月晓，等.不同粒径阿瑞匹坦大鼠药代动力学比较［J］.国际药学研究杂志，2013，40（4）：464-469．

[22] LI Qian， ZHANG Xiaoyan， DUAN Yuexiao， et al. Pharmacokinetics study of aprepitant with different particle size in rat［J］. Journal of International Pharmaceutical Research，2013，40（4）：464-469．

[23] 刘挺峰.桂利嗪过饱和自乳化释药系统的制备与质量评价［J］.西北药学杂志，2022，37（5）：81-86．

[24] LIU Tingfeng. Preparation and quality evaluation of cinnarizine supersaturated self-emulsifying drug delivery system［J］. Northwest Pharmaceutical Journal，2022，37（5）：81-86．