基于多指标定量结合化学计量学与加权逼近理想解排序-灰色关联度分析融合模型评价不同产地桃仁的质量

Quality evaluation of Persicae Semen from different producing areas based on multi-index quantitative analysis and chemometrics and a fusion model of weighted technique for order preference by similarity to ideal solution and grey relation analysis

摘要

目的 建立桃仁多指标成分高效液相色谱法（high performance liquid chromatography， HPLC）定量分析方法，联合化学计量学、加权逼近理想解排序（technique for order preference by similarity to ideal solution， TOPSIS）法与灰色关联度分析（grey correlation analysis， GRA）融合模型，科学评价不同产地桃仁的质量。 方法 采用Develosil ODS-UG-5 C₁₈色谱柱，以乙腈-体积分数0.2%磷酸溶液为流动相进行梯度洗脱，检测波长为210 nm（用于检测苦杏仁苷、野黑樱苷、β-谷甾醇、岩藻甾醇）和360 nm（用于检测儿茶素、山柰酚-3-O-芸香糖苷、槲皮素、柚皮素、山柰酚），柱温为30 ℃，建立HPLC多指标定量方法。采用外标法测定18批不同产地桃仁中上述9种成分的含量；参照《中华人民共和国药典》（2020年版）四部通则，测定酸值、羰基值、总灰分、酸不溶性灰分和醇浸出物含量。对检测数据进行化学计量学分析，建立加权TOPSIS与GRA融合评价模型。 结果 建立的HPLC定量方法在检测中，各成分线性关系良好，方法的重复性、准确性及仪器精密度均符合要求；体积分数70%甲醇回流提取制备的桃仁供试品溶液在24 h内稳定性良好。外标法测定结果显示，不同产地桃仁样品质量存在显著差异。化学计量学分析结果显示，18批桃仁可聚为3类，苦杏仁苷、野黑樱苷、槲皮素、β-谷甾醇和山柰酚是影响桃仁质量的关键差异性标志物。融合模型评价结果显示，18批样品的综合相对贴近度为0.284 5~0.683 5。 结论 建立的HPLC多指标定量方法操作便捷、稳定可靠，适用于桃仁多指标成分的同步测定；化学计量学联合加权TOPSIS与GRA融合模型，为不同产地桃仁的质量综合评价提供了技术支撑。

Abstract

Objective To establish a high performance liquid chromatography （HPLC） quantitative analysis method for multi-index components of Persicae Semen， to scientifically evaluate the quality of Persicae Semen from different producing areas combined chemometrics， weighted technique for order preference by similarity to ideal solution （TOPSIS） method and grey relation analysis （GRA） fusion model. Methods An HPLC multi-index quantitative method was developed by using a Develosil ODS-UG-5 C₁₈ column. The mobile phase consisted of acetonitrile and a 0.2% phosphoric acid solution. Detection wavelengths were set at 210 nm for amygdalin， prunasin， β-sitosterol， and fucosterol， and at 360 nm for catechin， kaempferol-3-O-rutinoside， quercetin， naringenin， and kaempferol. The column temperature was maintained at 30 ℃. The contents of these 9 components in 18 batches of Persicae Semen were determined using the external standard method. Additionally， the acid value， carbonyl value， total ash， acid-insoluble ash， and alcohol-soluble extract were measured according to the general principles of the Chinese Pharmacopoeia （2020 edition）. The obtained data were subjected to chemometric analysis， and a comprehensive evaluation was performed using a fusion model based on weighted TOPSIS and GRA. Results Under the established HPLC conditions， all components showed good linearity， The repeatability， accuracy and precision of the method met the requirements. The 70% methanol reflux-extracted sample solutions were stable within 24 hours. The results of external standard method showed that the purity of Persicae Semen samples from different producing areas was significantly different. The results of chemometrics analysis showed that 18 batches of Persicae Semen could be clustered into 3 categories. Amygdalin， prunasin， quercetin， β-sitosterol and kaempferol were the key differential markers affecting the quality of Persicae Semen. The evaluation results of the fusion model showed that the comprehensive relative closeness of 18 batches of samples was 0.284 5-0.683 5. Conclusion The established HPLC method is straightforward， reliable， and suitable for widespread application. The integrated approach of chemometrics with the weighted TOPSIS and GRA fusion model provides a valuable reference for evaluating the quality of Persicae Semen from different habitats.

Graphical abstract

关键词

桃仁 / 高效液相色谱法 / 化学计量学 / 加权逼近理想解排序法 / 灰色关联度分析法 / 质量评价

Key words

Persicae Semen / high performance liquid chromatography / chemometrics / weighted technique for order preference by similarity to ideal solution / grey relation analysis / quality evaluation

桃仁是《中华人民共和国药典》（以下简称《中国药典》）（2020年版）一部收录的传统常用活血类中药材，是蔷薇科植物桃Prunus persica （L.） Batsch或山桃Prunus davidiana （Carr.） Franch.的干燥成熟种子^［1］，主产于河北、山东、四川、陕西、湖北等地^［2-3］。该药材具有活血祛瘀、润肠通便、止咳平喘的功效，临床常用于经闭痛经、癥瘕痞块、肺痈肠痈、跌扑损伤、肠燥便秘、咳嗽气喘等病症的治疗^［4-5］，具有重要的研究与应用价值。现代药理研究证实，桃仁还具有抗凝血、抗血栓、抗炎、降血脂、抗肿瘤等多种生物活性^［6-7］。桃仁的化学成分复杂，主要含苷类、甾醇类、黄酮类、油脂类等多种类型化合物^［8］，但现行标准仅对苦杏仁苷进行定量控制。由于气候、地形、土壤等因素可造成不同产地桃仁品质存在差异，单一成分难以全面反映桃仁的整体质量，更不能保障其临床疗效。桃仁中的主要药效成分具有明确药理活性：苷类成分中，苦杏仁苷、野黑樱苷具有抗肿瘤、抗炎、抗动脉粥样硬化、抗纤维化等作用^［9］。甾醇类成分中，β-谷甾醇抗炎、抗氧化、抗菌、抗肿瘤、降血脂活性显著^［10］，岩藻甾醇可发挥抗动脉粥样硬化、抗肥胖、抗锥虫和抗结核作用^［11］。黄酮类成分中，儿茶素具有抗菌、抗癌、抗氧化、抗病毒、预防糖尿病和心血管疾病等功效^［12］；槲皮素具有抗氧化、抗肿瘤、抗炎、抗菌活性，并具有降血糖、降血压、降血脂、抗动脉粥样硬化、抗血栓、防止冠心病等心血管保护作用^［13］；柚皮素具有抗菌消炎、抗氧化、抗肿瘤、抗损伤及防治骨质疏松的作用^［14］；山柰酚和山柰酚-3-O-芸香糖苷对结肠癌、乳腺癌、白血病等多种癌症具有明显的预防和抑制作用^［15］。

化学识别模式可通过降维对多变量进行系统分析，具有聚类清晰、结果直观的优势^［16-17］；加权逼近理想解排序（technique for order preference by similarity to ideal solution， TOPSIS）法能将多指标转化为综合评价指标，通过对各指标进行合理赋权，以评价对象与理想目标的欧氏距离为判定依据，准确性较高^［18］。灰色关联度分析（grey relation analysis， GRA）则通过分析各因素间的关联程度，明确指标成分对药材质量的影响，评价结果直观可靠^［19-20］。

本研究采用外标法建立高效液相色谱法（high performance liquid chromatography， HPLC）定量检测方法，测定产自7个省份的18批桃仁样品中苦杏仁苷、野黑樱苷、β-谷甾醇、岩藻甾醇、儿茶素、山柰酚-3-O-芸香糖苷、槲皮素、柚皮素、山柰酚的含量；同时参照《中国药典》（2020年版）四部通则，测定酸值、羰基值、总灰分、酸不溶性灰分和醇浸出物等指标。通过化学计量学方法结合加权TOPSIS与GRA融合模型，对所有检测数据进行系统分析，实现不同产地桃仁质量的综合评价，保证评价结果的准确性、客观性和科学性。

1 仪器与试药

1.1 仪器

PL203型和XSR105DU型分析天平［梅特勒-托利多仪器（上海）有限公司］；Waters e2695型高效液相色谱仪（美国Waters公司）。

1.2 试药

对照品：槲皮素（批号100081-201610，质量分数为99.1%）、山柰酚（批号110861-202214，质量分数为97.4%）、山柰酚-3-O-芸香糖苷（批号112007-202304，质量分数为97.2%）、儿茶素（批号110877-202306，质量分数为96.6%）、苦杏仁苷（批号110820-202410，质量分数为94.9%）、β-谷甾醇（批号110851-201909，质量分数为92.7%），均购自中国食品药品检定研究院；野黑樱苷（批号CFS202201，质量分数为98.3%）、岩藻甾醇（批号CFS202201，质量分数为98.0%）、柚皮素（批号CFS202202，质量分数为98.2%），均购自武汉天植生物技术有限公司；乙腈（色谱纯，南京诺唯赞生物科技股份有限公司）；磷酸（色谱纯，天津市科密欧化学试剂有限公司）；实验用桃仁按照《中国药典》（2020年版）一部“桃仁”项下规定进行前处理，除去果肉和核壳，取出种子，晒干后除去杂质并去皮。所有样品经达州市食品药品检验所王育主任中药师鉴定确认为蔷薇科植物桃Prunus persica（L.）Batsch的干燥成熟种子，系正品药材。样品按《中国药典》（2020年版）一部规定的药材储存条件，存放于达州市中西医结合医院标本存放室，样品信息见表1。

2 方法与结果

2.1 溶液的制备

2.1.1 供试品溶液

取桃仁粉末（过4号筛）约0.5 g，精密称定，置于具塞锥形瓶中，精密加入体积分数70%甲醇25 mL，密塞后精密称定体积，回流提取60 min，放冷至室温后，再精密称定质量，用体积分数70%甲醇补足减失的质量，摇匀，过滤，取续滤液作为供试品溶液。

2.1.2 混合对照品溶液

精密称取儿茶素13.452 mg、柚皮素7.128 mg，置于50 mL量瓶中，加入体积分数70%甲醇溶解并定容至刻度，摇匀，得混合溶液Ⅰ；精密称取山柰酚-3-O-芸香糖苷8.644 mg，置于20 mL量瓶中，加入体积分数70%甲醇溶解并定容至刻度，摇匀，得溶液Ⅱ；精密称取岩藻甾醇12.569 mg、槲皮素11.706 mg、山柰酚8.047 mg，置于10 mL量瓶中，加入体积分数70%甲醇溶解并定容至刻度，摇匀，得混合溶液Ⅲ；精密称取β-谷甾醇10.031 mg，置于5 mL量瓶中，加入体积分数70%甲醇溶解并定容至刻度，摇匀，得溶液Ⅳ；精密称取苦杏仁苷18.462 mg、野黑樱苷5.933 mg，置于2 mL量瓶中，分别精密加入0.2 mL混合溶液Ⅰ、0.2 mL溶液Ⅱ、0.5 mL混合溶液Ⅲ、1.0 mL溶液Ⅳ，用体积分数70%甲醇定容至刻度，摇匀，过滤，制成折干折纯后每mL含苦杏仁苷8.760 mg、野黑樱苷2.916 mg、β-谷甾醇0.930 mg、岩藻甾醇0.308 mg、儿茶素0.026 mg、山柰酚-3-O-芸香糖苷0.042 mg、槲皮素0.290 mg、柚皮素0.014 mg和山柰酚0.196 mg的混合储备液。精密吸取上述混合储备液适量，用体积分数70%甲醇准确稀释20倍，摇匀，即得混合对照品溶液，其中苦杏仁苷、野黑樱苷、β-谷甾醇、岩藻甾醇、儿茶素、山柰酚-3-O-芸香糖苷、槲皮素、柚皮素、山柰酚的质量浓度分别为438.0、145.8、46.5、15.4、1.3、2.1、14.5、0.7、9.8 µg·mL^-1。

2.2 色谱条件与系统适应性实验

采用Develosil ODS-UG-5 C₁₈色谱柱（250 mm×4.6 mm，5 μm）；检测波长为210 nm（0~30 min，用于检测苦杏仁苷、野黑樱苷、β-谷甾醇和岩藻甾醇）^［21-22］、360 nm（30~60 min，用于检测儿茶素、山柰酚-3-O-芸香糖苷、槲皮素、柚皮素和山柰酚）^［23-24］；以体积分数0.2%磷酸（A）-乙腈（B）为流动相，梯度洗脱（0~12 min，15% B；12~20 min，15% B→22% B；20~30 min，22% B→36% B；30~51 min，36% B→82% B；51~60 min，82% B→15% B）；进样体积为10 µL；柱温为30 ℃，流速为1.0 mL·min^-1。

按照上述色谱条件检测混合对照品溶液和供试品溶液，典型色谱图见图1。结果显示，供试品溶液中各指标成分的出峰时间、顺序与混合对照品溶液一致，各成分色谱峰分离度良好，理论板数按各指标成分计算均不低于3 500，符合系统适应性实验的要求。

2.3 线性关系的考察

精密吸取2.1.2项下制备的混合对照品储备液，分别稀释8、10、20、40、100、200倍，得到苦杏仁苷、野黑樱苷、β-谷甾醇、岩藻甾醇、儿茶素、山柰酚-3-O-芸香糖苷、槲皮素、柚皮素、山柰酚系列质量浓度的混合对照品溶液。按照2.2项下色谱条件进样测定，以各成分的质量浓度（x）为横坐标，对应峰面积（y）为纵坐标进行线性回归，得9种成分的回归方程、线性范围和相关系数r。见表2。结果显示，9种成分在各自检测质量浓度范围内线性关系良好^［25］。

2.4 精密度实验

取同一供试品溶液，按照2.2项下色谱条件连续进样6次，测定得各成分的峰面积相对标准偏差（relative standard deviation， RSD）依次为0.27%、0.65%、0.92%、1.17%、1.59%、1.51%、1.19%、1.61%、1.26%，表明仪器的精密度良好。

2.5 稳定性实验

取同一供试品溶液，于室温放置0、2、6、10、16、20、24 h后，按照2.2项下色谱条件进样测定，各成分峰面积的RSD依次为0.34%、1.01%、1.15%、1.30%、1.91%、1.56%、1.28%、1.76%、1.43%，表明供试品溶液在24 h内稳定性良好。

2.6 重复性实验

取同一批次桃仁药材（S1）粉末6份，精密称定，按照2.1.1项下方法平行制备供试品溶液，按照2.2项下色谱条件进样测定9种成分的含量。结果显示，各成分含量的RSD依次为0.72%、1.21%、1.58%、1.64%、1.87%、1.80%、1.57%、1.94%、1.66%，结果表明该方法的重复性良好。

2.7 加样回收率实验

取已知含量的S1号桃仁药材（苦杏仁苷、野黑樱苷、β-谷甾醇、岩藻甾醇、儿茶素、山柰酚-3-O-芸香糖苷、槲皮素、柚皮素、山柰酚含量分别为27.189、8.752、2.536、0.959、0.054、0.097、0.839、0.038、0.561 mg·g^-1）粉末9份，每份约0.25 g，精密称定，分别加入相当于样品中9种成分含量80%、100%、120%的对照品溶液，按照2.1.1项下方法制备供试品溶液并测定。结果显示，9种成分的平均加样回收率为96.75%~100.10%，RSD均<2.0%（n=9），表明该方法的准确度良好。

2.8 桃仁中9种成分含量的测定

取18批桃仁样品（S1~S18），按照2.1.1项下方法制备供试品溶液，外标法计算样品中苦杏仁苷、野黑樱苷、β-谷甾醇、岩藻甾醇、儿茶素、山柰酚-3-O-芸香糖苷、槲皮素、柚皮素、山柰酚的含量。结果显示，不同产地桃仁样品中各成分含量差异显著，其中苦杏仁苷含量为（27.776±4.722） mg·g^-1，野黑樱苷含量为（9.030±1.506） mg·g^-1，其余成分含量也存在明显批次间差异。见表3。

2.9 酸值、羰基值、浸出物、总灰分和酸不溶性灰分及醇浸出物含量的检测

参照《中国药典》（2020年版）四部通则2303（酸败度测定法）、2201（浸出物测定法）、2302（灰分测定法）^［26］，分别测定18批样品的酸值、羰基值、总灰分、酸不溶性灰分及醇浸出物含量。见表4。

2.10 检测数据的化学计量学分析

以18批样品中9种成分含量、酸值、羰基值、总灰分、酸不溶性灰分和醇浸出物为变量，构建18×14数据矩阵，采用SIMCA 14.1软件进行分析。主成分分析（principal component analysis， PCA）结果显示，18批桃仁样品大致聚为3类，相邻产区样品散点集中，不同产区分散，推测与产地的地理环境有关。所有数据点均位于95%置信区间内，无异常值，见图2。正交偏最小二乘判别分析（orthogonal partial least squares discriminant analysis， OPLS-DA）结果显示，模型参数R²X＝0.966、R²Y＝0.844、Q²＝0.808，表明模型预测能力和区分度良好^［27］，见图3。进一步对变量重要性投影（variable importance for projection， VIP）进行分析，结果见图4，以VIP>1为标准^［28］，筛选出对桃仁分类和质量贡献较大的成分有5个：分别为苦杏仁苷（成分1，VIP＝2.403 2）、野黑樱苷（成分2，VIP＝1.350 7）、槲皮素（成分7，VIP＝1.317 0）、β-谷甾醇（成分3，VIP＝1.106 0）、山柰酚（成分9，VIP＝1.085 0）。

2.11 检测数据的加权TOPSIS与灰色关联度融合模型

运用Excel 2016软件对18批桃仁的14项数据指标进行处理，构建融合评价模型。

2.11.1 加权TOPSIS分析

苦杏仁苷、野黑樱苷、β-谷甾醇、岩藻甾醇、儿茶素、山柰酚-3-O-芸香糖苷、槲皮素、柚皮素、山柰酚的含量及醇浸出物为正向指标，酸值、羰基值、总灰分和酸不溶性灰分为负向指标，由于各指标的量纲不统一，需对原始数据进行同向化处理。同向化公式如下^［29］。

正向指标：Y_{bc}=\frac{X_{bc}-min(x_c)}{max(x_c)-min(x_c)}

负向指标：Y_{bc}=\frac{max(x_c)-X_{bc}}{max(x_c)-min(x_c)}

同向化后数值结果见表5。

同向化后数据与化学计量学分析中各指标的VIP值相乘，得加权矩阵（Z_bc ）。以加权矩阵中各指标最大值为正理想解（Z_c^{+}），最小值为负理想解（Z_c^{-}），按以下公式计算正理想解距离（D_b^{+}）、负理想解距离（D_b^{-}）、相对贴近度（J_b ）^［30］。

D_b^{+}=\sqrt[]{{\sum }_{c=\mathrm{1}}^{\mathrm{14}}(Z_{bc}-Z_c^{+}{)}^{\mathrm{2}}}

D_b^{-}=\sqrt[]{{\sum }_{c=\mathrm{1}}^{\mathrm{14}}(Z_{bc}-Z_c^{-}{)}^{\mathrm{2}}}

J_b=\frac{D_b^{-}}{D_b^{+}+D_b^{-}}

2.11.2 GRA分析

按照公式Y_ik =X_ik /X_k 对原始数据进行无纲量化处理^［31］，结果见表6。以无量纲化后各指标的最大值为最优参考序列，最小值为最差参考序列，按照公式C_{kb}^i=\frac{{\mathrm{\Delta }}_{\mathrm{m}\mathrm{i}\mathrm{n}}+\rho {\mathrm{\Delta }}_{\mathrm{m}\mathrm{a}\mathrm{x}}}{\left|Y_{\mathrm{i}\mathrm{k}}-\right.Y_{\mathrm{b}\mathrm{k}}\left|+\right.\rho {\mathrm{\Delta }}_{\mathrm{m}\mathrm{a}\mathrm{x}}}、C_{k\mathrm{s}}^i=\frac{{\mathrm{\Delta }}_{\mathrm{m}\mathrm{i}\mathrm{n}}^{\mathrm{\text{'}}}+\mathrm{\rho }{\mathrm{\Delta }}_{\mathrm{m}\mathrm{a}\mathrm{x}}^{\mathrm{\text{'}}}}{\left|Y_{\mathrm{i}\mathrm{k}}-Y_{\mathrm{s}\mathrm{k}}\left|+\right.\right.\mathrm{\rho }{\mathrm{\Delta }}_{\mathrm{m}\mathrm{a}\mathrm{x}}^{\mathrm{\text{'}}}}（式中Δ_min＝min|Y_ik －Y_bk |、Δ_max＝max|Y_ik －Y_bk |、{\mathrm{\Delta }}_{\mathrm{m}\mathrm{i}\mathrm{n}}^{\mathrm{\text{'}}}＝min|Y_ik －Y_sk |、{\mathrm{\Delta }}_{\mathrm{m}\mathrm{a}\mathrm{x}}^{\mathrm{\text{'}}}＝max|Y_ik －Y_sk |，ρ为分辨系数，取值0.5）计算各评价单元相对于最优、最差参考序列关联系数C_{k\mathrm{b}}^i和C_{k\mathrm{s}}^i。再按公式R_{ib}=\frac{\mathrm{1}}{\mathrm{14}}{\displaystyle \sum _{k=\mathrm{1}}^{\mathrm{14}}}{C}_{kb}^{\mathrm{i}}、R_{is}=\frac{\mathrm{1}}{\mathrm{14}}{\displaystyle \sum _{k=\mathrm{1}}^{\mathrm{14}}}{C}_{k\mathrm{s}}^i及R_{\mathrm{i}}=\frac{R_{ib}}{R_{ib}+R_{is}}，分别计算被评价对象相对于最优参考序列的关联度（R_ib ）为0.467 8、0.520 1、0.542 3、0.503 3、0.513 1、0.520 8、0.488 7、0.492 7、0.487 5、0.514 2、0.571 8、0.483 8、0.590 5、0.634 2、0.616 4、0.677 0、0.608 9、0.564 2，最差参考序列的关联度（R_is ）为0.551 7、0.521 5、0.526 4、0.539 3、0.522 7、0.525 3、0.545 5、0.591 0、0.655 6、0.631 6、0.709 0、0.765 4、0.572 9、0.560 4、0.557 7、0.527 4、0.556 4、0.541 0，被评价对象的相对关联度（R_i ）为0.458 9、0.499 3、0.507 4、0.482 7、0.495 4、0.497 8、0.472 5、0.454 6、0.426 5、0.448 8、0.446 4、0.387 3、0.507 6、0.530 9、0.525 0、0.562 1、0.522 5、0.510 5。

2.11.3 加权TOPSIS法与灰色关联度融合

对加权TOPSIS法中正、负理想解距离（D_b^{+}、D_b^{-}）和GRA分析中最优、最差参考序列的关联度（R_ib 、R_is ）按公式d_i^{+}=D_b^{+}/max（D_b^{+}）、d_i^{-}=D_b^{-}/max（D_b^{-}）、r_{ib}=R_ib/max（R_ib ）、r_is =Ris/max（R_is ）进行无纲量化处理，计算融合无纲量化后的欧氏贴近度（d_i^{+}、d_i^{-}）和灰色关联度（r_{ib}、r_{is}）。由公式E_i^{+}=αd_i^{-}+βr_{ib}，E_i^{-}=αd_i^{+}+βr_{is}得到融合无量纲化后的欧氏距离和灰色关联度E_i^{+}、E_i^{-}，其中取α=β=0.5。再按照公式γ_i ＝E_i⁺/（E_i⁺＋E_i^-）计算综合相对贴近度（γ_i ），并根据γ_i 值对样品质量进行排序^［32］。结果显示，18批桃仁样品的综合相对贴近度为0.284 5~0.683 5，进一步印证不同产地桃仁质量存在显著差异。见表7。

3 讨论

3.1 提取条件的选择

本研究选择苦杏仁苷、野黑樱苷、β-谷甾醇、岩藻甾醇、儿茶素、山柰酚-3-O-芸香糖苷、槲皮素、柚皮素、山柰酚的提取率为评价指标，系统考察提取方式（超声提取、加热回流）、甲醇体积分数（30%、50%、70%、100%）及提取时间（30、45、60 min）对提取效率的影响。结果显示，采用体积分数70%甲醇加热回流提取60 min得到的供试品溶液，杂质干扰少，色谱基线平稳，且9种指标成分的提取率达到最大值，故确定该条件为最优提取方案。

3.2 流动相的选择

以乙腈为有机相，考察不同水相组成（纯水、乙腈-质量分数0.05%磷酸溶液、乙腈-质量分数0.1%磷酸溶液、乙腈-质量分数0.2%磷酸溶液）对分离效果的影响。结果显示，乙腈-质量分数0.2%磷酸溶液作为流动相时，9种指标成分的色谱峰分离效果最好，峰形对称且基线平稳，可满足多指标同步定量分析的要求。

3.3 评价结果分析

本研究通过外标法实现了7个省份18批桃仁中苦杏仁苷、野黑樱苷、β-谷甾醇、岩藻甾醇、儿茶素、山柰酚-3-O-芸香糖苷、槲皮素、柚皮素、山柰酚的定量测定，同时参照《中国药典》（2020年版）四部通则检测了酸值、羰基值、总灰分、酸不溶性灰分和醇浸出物等质量相关指标，结果显示，不同产地桃仁在化学成分含量及常规质量指标上均存在显著差异。

为明确质量差异的核心驱动因子，采用化学计量学方法对检测数据进行分析，PCA与OPLS-DA结果一致，18批桃仁可明显聚为3类，且筛选出苦杏仁苷、野黑樱苷、槲皮素、β-谷甾醇和山柰酚是影响桃仁质量的关键差异性标志物。针对各指标量纲不统一的问题，先对数据进行同向化处理，再结合化学计量学分析中各指标的VIP值进行加权TOPSIS分析，最终与GRA构建融合评价模型，得到18批桃仁的综合相对贴近度为0.284 5~0.683 5，进一步印证不同产地桃仁质量的差异显著，推测该差异与产区地理环境、气候等生态因素密切相关。其中S16批次综合相对贴近度最高（0.683 5），表明该批次的质量最优。

综上所述，本研究建立的多指标定量结合化学计量学与加权TOPSIS-GRA融合模型的评价方法，操作简便、科学可靠，评价结果直观，为桃仁优质种源筛选、产地质量评价及后续质量标准完善提供了重要参考。

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基金资助

四川省中央引导地方科技发展专项项目(2023ZYD0283)

四川省中医药管理局中医药科研专项课题(2023MS261)

四川省中医药管理局中医药科研专项课题(2024MS040)