柿叶总黄酮双层渗透泵控释片处方的优化及体外释药的研究

Study on the formulation optimization and in vitro release characteristics of bi-layer osmotic pump controlled-release tablets of total flavonoids from persimmon leaves

摘要

目的 制备柿叶总黄酮双层渗透泵控释片，采用单因素考察结合正交实验设计，优化其处方工艺。 方法 建立柿叶总黄酮体外释放度测定方法，以累积释放度为评价指标，考察片芯和包衣膜主要处方组分对药物释放行为的影响；以f₂相似因子对各因素水平下的释放曲线进行评价，采用正交实验设计对片芯主要影响因素进行优化，并对优选处方进行验证。 结果 优选处方为片芯采用处方F16；包衣液由1.5 g·L^-1 聚乙二醇（polyethylene glycol，PEG）-4000和30 g·L^-1醋酸纤维素组成；包衣增质量为11%；释药孔径为0.6 mm。优选处方2 h内无突释效应；12 h内累积释放率达85%以上，药物体外释放呈零级释药特征。 结论 经正交实验优化所得的柿叶总黄酮双层渗透泵控释片处方工艺的重复性良好，体外释药性能符合预期设计目标。

Abstract

Objective To prepare bi-layer osmotic pump controlled-release tablets of total flavonoids from persimmon leaves， and optimize the formulation process using single-factor investigation combined with orthogonal experimental design. Methods A method for determining the in vitro release rate of total flavonoids from persimmon leaves was established. Taking cumulative release as the evaluation index， the effects of main formulation components of the tablet core and coating film on drug release behavior were investigated. The release curves under various factor levels were evaluated using the f₂ similarity factor. Orthogonal experimental design was employed to optimize the main influencing factors of the tablet core， and the optimized formulation was verified. Results The optimized formulation was as follows： Formulation F16 was used for the tablet core； the coating solution consisted of 1.5 g·L^-1 polyethylene glycol （PEG）-4000 and 30 g·L^-1 cellulose acetate； the coating weight gain was 11%； and the drug release pore size was 0.6 mm. The optimized formulation showed no burst release effect within 2 hours； the cumulative release rate reached over 85% within 12 hours， and the drug release in vitro exhibited zero-order release characteristics. Conclusion The optimized formulation process of double-layer osmotic pump controlled-release tablets of total flavonoids from persimmon leaves obtained through orthogonal experiment has good reproducibility， and the in vitro release performance meets the expected design goals.

Graphical abstract

关键词

柿叶总黄酮 / 双层渗透泵控释片 / 正交实验 / 处方优化 / 体外释药

Key words

total flavonoid from persimmon leaf / bi-layer osmosis pump tablet / orthogonal experiment / formulation optimization / in vitro release characteristics

柿叶是柿树科柿树属植物柿（Diospyros kaki Thunb.）的新鲜或干燥叶片。传统中医理论认为，柿叶具有清肺止咳、凉血止血的功效^［1］。以柿叶提取物为原料制成的中成药脑心清片，临床常用于冠心病、脑动脉硬化等心脑血管疾病的治疗^［2］。药理研究发现，柿叶中黄酮类化合物是脑心清片治疗心脑血管疾病的主要活性成分，可改善心肌功能、保护神经细胞、抑制动脉粥样硬化进展、抑制血小板聚集^［3-4］。目前市售柿叶提取物制剂均为常释制剂，成人每日服用3次，单次给药剂量为200~300 mg，服药后血药浓度峰谷差值大，不适用于老年人群长期用药。鉴于柿叶总黄酮是柿叶提取物的主要有效成分，已有研究者开发出口腔崩解片^［5］、分散片^［6］、普通缓释片^［7］等剂型，以期改善常规剂型的不足。

渗透泵控释片是一种新型释药系统，依靠半透膜内外渗透压差实现药物释放；根据药物溶解性能，将其分为适用于水溶性药物的单室渗透泵控释片和适用于难溶性药物的双层渗透泵控释片^［8］。该类制剂可稳定维持零级释药动力学特征，释药行为不受胃肠道pH值、胃肠蠕动等生理因素影响，能够显著减少或避免血药浓度波动，提升用药安全性与治疗稳定性，同时减少给药频次、提高患者的用药依从性^［9-10］。因此，开发柿叶总黄酮渗透泵控释片具有重要的临床应用价值。

本研究采用渗透泵控释技术制备柿叶总黄酮双层渗透泵控释片，借助稳定的体外零级释药模式减少血药浓度峰谷波动，提高用药安全性与依从性，为柿叶总黄酮新型缓控释制剂的临床推广提供实验依据。

1 仪器与试药

1.1 仪器

PP-120型单冲压片机（湖南省衡阳市药械设备厂）；Labcoating-3型高效薄膜包衣机（深圳信宜特科技有限公司）；SDK-I-02型激光打孔机（天津市工业自动化仪表研究所）；DHG9146A型电热恒温鼓风干燥箱（上海精宏实验设备有限公司）；RCZ-8型药物溶出仪（上海黄海药检仪器有限公司）；UV2000型紫外-可见光分光光度计（日本岛津公司）；AX324ZH型电子分析天平［奥豪斯仪器（上海）有限公司］；JSM-6510LV型扫描电镜（日本JEOL公司）。

1.2 试药

柿叶黄酮（批号K20984，以芦丁计，总黄酮质量分数≥80%，西安开来生物工程有限公司）；芦丁对照品（批号100080-202012，质量分数为91.6%，中国食品药品检定研究院）；聚氧乙烯（polyethylene oxide，PEO） N10（批号D682J3SRH4）、PEO WSR-303（批号D682J57RR3），均购自美国陶氏公司；硬脂酸镁（批号200701，安徽山河药用辅料股份有限公司）；氧化铁红（批号20200309，上海一品颜料有限公司）；氯化钠（批号20220725，江苏省勤奋药业有限公司）；醋酸纤维素（批号AC-02080NF，美国ESTMAN公司）；聚乙二醇（polyethylene glycol，PEG）-4000（批号20190107B-1，南京威尔化工有限公司）；丙酮（批号20220702，江苏强盛功能化学股份有限公司）；亚硝酸钠（批号20210510，上海化学试剂有限公司）。

2 方法与结果

2.1 双层渗透泵控释片的制备工艺

双层渗透泵控释片主要由双层片芯和带释药孔的半透性衣膜构成，其中双层片芯包括含药层和助推层。含药层处方组成包括柿叶总黄酮、低分子PEO（助悬剂）、氯化钠（促渗剂）、氧化铁红（色素）、硬脂酸镁（润滑剂）；助推层处方组成包括高相对分子质量PEO（助推剂）、氯化钠（促渗剂）、硬脂酸镁（润滑剂）。包衣液以醋酸纤维素为膜材、PEG为增塑剂兼致孔剂，溶于丙酮体系制备而成，其中醋酸纤维素质量浓度为30 g·L^-1，PEG用量通过后续实验筛选，溶剂为体积分数95%丙酮水溶液^［11］。

2.1.1 片芯的制备

2.1.1.1 含药层颗粒的制备

取处方量的柿叶总黄酮、氯化钠和低相对分子质量PEO混合研磨，过80目筛，加入适量体积分数95%乙醇制备软材，经20目筛制粒后，置于40 ℃烘箱干燥6 h，每1 h翻动1次，干燥后采用18目筛整粒，加入处方量硬脂酸镁混匀，得到含药层颗粒A。

2.1.1.2 助推层颗粒的制备

将高相对分子质量PEO WSR-303、氯化钠和氧化铁红混合均匀，过80目筛，加入适量体积分数95%乙醇制软材，经20目筛制粒后，置于40 ℃烘箱干燥4 h，每1 h翻动1次，干燥后采用18目筛整粒，加入硬脂酸镁混匀，得到助推层颗粒B。

2.1.1.3 片芯压制

采用9 mm浅凹冲头，将含药层颗粒A与助推层颗粒B压制成双层片芯，控制片芯硬度为70~80 N。

2.1.2 包衣的制备

取适量丙酮，置于烧杯中，启动搅拌装置并设定转速为50 r·min^-1，加入处方量醋酸纤维素和PEG-4000水溶液，持续搅拌4 h制得包衣液。设定包衣工艺参数：进液速度为15 mL·min^-1；进风温度为65 ℃；出风温度为30 ℃；锅转速为20 r·min^-1。待片剂包衣增质量至预设值后，将包衣片置于40 ℃烘箱干燥24 h，完成衣膜老化处理。

2.1.3 激光打孔

取干燥后的包衣片剂，在含药层片面圆心处采用激光设备打孔，设定激光器功率55 W；功率占空比35%；运行速度为1 300 mm·s^-1，即得目标双层渗透泵控释片。

2.2 体外释放度的测定

2.2.1 检测波长的确定

采用紫外-可见光分光光度计，在200~800 nm波长范围内，分别对空白辅料溶液、芦丁对照品溶液，以及经硝酸铝体系处理后的两种溶液铝络合物进行光谱扫描。结果显示，空白辅料溶液、空白辅料铝络合物溶液、芦丁对照品溶液在510 nm波长处均无紫外吸收，仅芦丁对照品铝络合物溶液在510 nm波长处存在特征吸收峰，因此选择510 nm为本次实验的检测波长。

2.2.2 芦丁标准曲线的制备

取芦丁对照品约20 mg，精密称定，置于100 mL量瓶中，加入体积分数50%乙醇溶液定容，摇匀至完全溶解，配制得到质量浓度为203 μg·mL^－1的芦丁对照品储备液。分别精密吸取对照品储备液1.0、2.0、3.0、4.0、5.0 mL，分别置于10 mL具塞试管中，加入体积分数50%乙醇溶液补足至5.0 mL，混匀。各试管依次加入质量分数5%亚硝酸钠溶液0.3 mL，混匀后静置6 min；再加入质量分数10%硝酸铝溶液0.3 mL，混匀后静置6 min；最后加入质量分数1%氢氧化钠溶液4 mL，混匀后静置15 min，制备系列待测溶液^［7］。

以未添加芦丁对照品的溶液作为空白对照，在510 nm波长处测定各待测溶液的吸光度值。以芦丁质量浓度为横坐标（x），吸光度值为纵坐标（y），进行线性回归。得到回归方程：y=121.36x-0.57（r=0.999 3）。结果表明，芦丁对照品质量浓度在20.3~101.5 μg·mL^-1范围内，与吸光度值线性关系良好。

2.2.3 精密度实验

精密吸取芦丁对照品储备液3 mL，共5份，分别置于5支10 mL具塞试管中，按照2.2.2项下方法测定溶液的吸光度值。结果显示，吸光度值相对标准偏差（relative standard deviation， RSD）为0.9%，表明该检测方法的精密度良好。

2.2.4 稳定性实验

精密吸取芦丁对照品储备液3 mL，置于10 mL具塞试管中，按照2.2.2项下方法，每30 min测定1次溶液吸光度值。结果显示，120 min内供试溶液吸光度RSD为1.9%，表明显色后溶液在120 min内稳定性良好。

另取同批次对照品储备液室温放置6、12、24 h后测定吸光度值，计算得RSD为2.1%，表明未显色的样品溶液在24 h内稳定性良好。

2.2.5 加样回收率实验

取等量于单片片芯的空白控释片辅料，分散于250 mL释放介质中作为稀释介质，加入适量芦丁对照品，分别配制20、60、100 μg·mL^-1的低、中、高质量浓度的供试品溶液，各浓度平行制备3份。分别取各质量浓度供试品溶液5.0 mL，按照2.2.2项下方法测定吸光度值，并计算回收率。结果显示，平均加样回收率为98.3%，RSD为1.4%，表明分析方法的准确性和可靠性良好。

2.2.6 释放度测定方法

取柿叶总黄酮双层渗透泵控释片6片，按照《中华人民共和国药典》（以下简称《中国药典》）（2025年版）四部通则0931第三法开展体外释放度实验。以250 mL脱气质量分数1%十二烷基硫酸钠水溶液为释放介质，设溶出仪转速为100 r·min^-1，介质温度控制在（37.5±0.5） ℃^［7］。分别在0.5、1.0、2.0、4.0、6.0、8.0、10.0、12.0 h取样5 mL，同时即时补充等体积、同温度的空白释放介质。取得的样品溶液经0.45 μm微孔滤膜滤过，精密吸取3 mL续滤液，置于10 mL具塞试管中，按照2.2.2项下方法测定吸光度值，计算各时间点芦丁的累积释放度。

采用相似因子法评价不同处方释药曲线的相似度，计算公式如下^［12］：f_{\mathrm{2}}=\mathrm{50}\times \mathrm{l}\mathrm{o}\mathrm{g}\left\{{\left[\mathrm{1}+\frac{\mathrm{1}}{n}\sum (R_{\mathrm{t}}-T_{\mathrm{t}}{)}^{\mathrm{2}}\right]}^{-\mathrm{0.5}}\times \mathrm{100}\right\}，式中，n表示样品数量，R_t和T_t分别表示参比制剂和受试制剂在t时间点的累积释放度。当相似因子（f₂）≥50时，判定两条体外释放曲线具有相似性。

2.3 单因素考察与优化

对制剂含药层、助推层、包衣液、激光打孔等因素水平进行考察与优化，实验所用片芯处方（编号F1~F16）见表1。

2.3.1 含药层

2.3.1.1 促渗剂种类

固定其余处方与工艺参数，分别选取乳糖、氯化钠、甘露醇作为含药层促渗剂（参照处方F2，各促渗剂用量均为6 mg·片^-1）。释放结果显示，促渗剂种类对药物释放行为具有一定影响。以氯化钠为促渗剂制备的药物释放曲线平缓，符合零级释药动力学特征，且12 h累积释放度最高，同时用该处方制备的颗粒流动性更好，因此优选氯化钠作为含药层和助推层的共用促渗剂。见图1。

2.3.1.2 促渗剂用量

固定其余处方与工艺参数，设置含药层氯化钠用量为2、6、10 mg·片^-1（对应处方F1~F3）。释放结果显示，氯化钠用量6 mg·片^-1与10 mg·片^-1对应的释放曲线差异无统计学意义（f₂=83）。结合降低辅料用量原则，最终确定含药层氯化钠的最优用量为6 mg·片^-1。见图2。

2.3.1.3 助悬剂PEO种类

固定其余处方与工艺参数，分别选用相对分子质量为100、200、300的PEO N-10、PEO N-80、PEO N-750作为含药层助悬剂（对应处方F4~F6）。释放结果显示，PEO相对分子质量对药物释放速率有显著影响，随着PEO相对分子质量增加，药物释放速率逐渐降低。为获得较优的释药速率，最终选择低相对分子质量PEO N-10作为含药层助悬剂。见图3。

2.3.1.4 助悬剂用量

固定其余处方与工艺参数，设置PEO N-10用量为15、30、45 mg·片^-1（对应处方F7-F9）。释放结果显示，15~45 mg用量范围内，各处方释放曲线差异无统计学意义（各组两两间f₂均>70）。基于辅料精简原则，选择PEO N-10最优用量为15 mg·片^-1。见图4。

2.3.2 助推层

2.3.2.1 促渗剂用量

固定其余处方与工艺参数，设置助推层氯化钠用量为10、20、30 mg·片^-1（对应处方F10~F12）。释放结果显示，氯化钠用量为10 mg·片^-1时药物的释放速率偏慢，20、30 mg·片^－1对应的释放曲线高度相似（f₂=88）。综合释放特性与辅料成本，最终选择助推层氯化钠的用量为20 mg·片^-1。见图5。

2.3.2.2 助推剂用量

参照相关文献，选择水膨胀性能优异的PEO WSR-303（相对分子质量7 000）作为助推层助推剂^［9，11］。固定其余处方与工艺参数，考察60、70、80 mg·片^－1的PEO WSR-303对药物释放行为的影响（对应处方F13~F15）。结果显示，随着PEO WSR-303用量增加，药物的释放速率无明显提高，70 mg·片^-1与80 mg·片^-1处方释放曲线相似度良好（f₂=84）。为平衡控释效果和辅料用量，确定PEO WSR-303最优用量为70 mg·片^-1。见图6。

2.3.3 包衣液

2.3.3.1 增塑剂PEG 4000质量浓度

基于固定处方与工艺参数（处方F16），配制PEG 4000质量浓度为0.5、1.0、1.5 g·L^-1的包衣液，包衣液基础体系为质量浓度30 g·L^-1醋酸纤维素溶液，溶剂为体积分数95%丙酮水溶液。释放曲线结果显示，PEG 4000用量与药物释放度呈正相关，随着PEG 4000质量浓度的升高，药物释放度逐渐提高。当PEG 4000质量浓度为1.5 g·L^-1时，药物12 h释放完全，因此确定该质量浓度为包衣液中增塑剂最优质量浓度。见图7。

2.3.3.2 包衣增质量

基于固定处方与工艺参数（处方F16），设置包衣增质量为5%、8%、11%。结果显示，包衣增质量与药物释放速率呈负相关，包衣增质量越大，药物的释放速率越缓慢。3种包衣增质量条件下12 h累积释放度均>90%，其中包衣增质量11%的处方释放曲线线性最优，0.5~12 h线性回归系数最高（5%、8%、11%对应的R²值分别为0.933 0、0.949 5、0.987 1）。因此，选择最优包衣增质量为11%。

2.3.4 激光打孔

固定处方工艺参数（处方F16），考察0.5、0.6、0.7 mm释药孔径分别对药物释放度的影响。结果显示，不同孔径对应的释放曲线差异无统计学意义（各曲线之间的f₂均>75），结合打孔工艺容错性与生产稳定性考量，确定最优释药孔径为0.6 mm。见图9。

2.4 衣膜表面结构的观测

选取合格包衣片剂及黏片、衣膜粉白等典型缺陷包衣片剂，采用扫描电子显微镜分别在40、100、500倍放大条件下观察衣膜的微观形貌。结果显示，不同包衣质量的片剂衣膜微观结构存在明显差异：黏片样品包衣膜棱角模糊、边缘不规整，表面油滑、颗粒感较弱；衣膜粉白样品表面凹凸不平、棱角锐利、断层较多、颗粒感显著；合格包衣样品衣膜边缘清晰、表面平整、颗粒分布均匀，结构规整。见图10。

2.5 片芯处方的优化

2.5.1 正交实验

单因素考察结果显示，渗透泵控释片释药行为主要由片芯处方和半透性包衣膜参数调控，其中包衣增质量对释放速率的调控规律明确，可实现微量释药调节，因此本实验重点优化片芯处方。固定包衣液组分（质量浓度1.5 g·L^－1 PEG 4000 + 30 g·L^－1醋酸纤维素）、包衣增质量11%、释药孔径0.6 mm，筛选出影响释药行为的3个核心片芯处方因素：含药层氯化钠用量（A）、助推层氯化钠用量（B）、助推层PEO用量（C）。采用L₉（3⁴）正交实验设计开展处方优化^［13］，各因素水平见表2。

本实验设置3项释药评价指标：1 h累积释放度（R₁，目标值8%，评价初期释药行为）、6 h累积释放度（R₆，目标值50%，评价中期释药行为）、12 h累积释放度（R₁₂，目标值90%，评价释药完全性），各指标权重系数均为1^［13］，采用综合评分法评价释药效果，评分计算公式：Re=（|R₁-8%|+|R₆-50%|+|R₁₂-90%|）×100%。Re数值越小表示药物释药效果越好^［13］。正交实验设计、结果及方差分析见表3、表4，其中D列为误差列。

方差分析结果显示，A、B、C 3个考察因素对药物释药行为均具有显著差异，误差列无统计学意义，即因素间交互作用对实验结果影响极小。由极差分析结果可知，各因素对释放行为的影响程度依次为C>B>A；最优片芯处方组合为A₂B₂C₂，即含药层氯化钠用量为6 mg·片^-1、助推层氯化钠用量为20 mg·片^-1、助推层PEO用量为70 mg·片^-1，该结果与单因素考察得到的最优处方（F16）一致。

2.6 优化处方的验证

结合单因素考察和正交实验结果，确定柿叶总黄酮双层渗透泵控释片最优处方：片芯采用F16处方，包衣液含1.5 g·L^-1 PEG 4000和30 g·L^-1醋酸纤维素，包衣增质量11%，释药孔径为0.6 mm。按照优化处方与固定制备工艺平行制备3批样品，进行处方工艺验证。结果显示，制剂呈完整双层结构，片面包覆均匀半透膜，含药层圆心处设有规整释药孔。采用2.3.5项下的方法对制备样品进行释放度检测，结果见图12。3批样品体外释放结果显示，12 h累积释放度均>90%，0.5~12 h释药曲线线性回归系数R²为0.987 1~0.991 2，释药行为符合零级动力学特征；优化处方工艺稳定、重复性良好。见图11、图12。

3 讨论

柿叶总黄酮水溶性较差，难以制成单室渗透泵制剂，因此本研究将其设计成双层渗透泵控释片，以实现平稳持续释药。根据《中国药典》（2025年版）标准，市售脑心清片单片中柿叶总黄酮含量不低于7.6 mg，临床单次给药剂量为7.6~15.2 mg，每日3次，日总剂量为22.8~45.6 mg^［2］。参照缓释制剂12 h用药间隔的设计思路^［7］，本研究将控释片单药剂量设定为22.8 mg，每日2次，旨在降低服药频次，同时维持体内血药浓度的平稳性。市售脑心清片单片中柿叶提取物含量为50~100 mg，柿叶提取物杂质组分复杂、主药占比低，不利于渗透泵制剂的制备成型，因此本研究选取其主要药理有效成分柿叶总黄酮作为制剂主药^［7］。

《中国药典》（2025年版）中脑心清片柿叶总黄酮含量测定采用液相色谱法，通过检测槲皮素、山柰素含量折算总黄酮含量^［2］，该方法需要加热回流处理样品，操作繁琐、检测效率低，不适用于体外释放大批量样品的快速检测。因此本研究采用文献报道的铝盐络合-紫外分光光度法检测总黄酮含量^［7，14］。紫外分光光度法的最优吸光度检测区间通常为0.2~0.7，为拓宽药物释放度测定范围，本实验将检测吸光度值区间拓展至0.17~0.84，经系统方法学考察，该检测范围内分析方法稳定、可靠。本实验参照文献^［7］小杯浆法进行体外释放度实验，通过缩小释放体系体积提高药物质量浓度，使其适配紫外分光光度计检测范围；同时在释放介质中添加十二烷基硫酸钠作为增溶剂，有效改善柿叶总黄酮水溶性差的问题。

双层渗透泵制剂制备过程中，通常在单层辅料中加入少量色素以区分片芯双层结构，便于激光打孔识别。预实验发现，含药层加入氧化铁红会干扰总黄酮含量测定，因此本研究将氧化铁红添加至助推层。由于助推层的助推剂主要停留在衣膜内，氧化铁红几乎无释放，经方法学验证，氧化铁红对释放度测定结果的影响可忽略不计。

含药层和助推层中的PEO辅料遇水后黏性较强，手工制粒过程中易出现物料结团成块、难以通过筛网等问题，导致颗粒收率下降。预实验结果显示，以体积分数95%乙醇水溶液为润湿剂，所得颗粒的外观规整、颗粒均匀，制粒过程可控性强、收率较高。后续中试放大生产中，可通过优化机械制粒参数，适当降低润湿剂含水率与用量、提高制粒机剪切速率，解决规模化制粒的结团成块问题。此外，柿叶总黄酮与PEO混合粉体干燥过程中需定时翻动，保障物料干燥均匀，避免局部干燥不完全而影响制剂释药性能。

含药层中，随着低相对分子质量助悬剂PEO N-10用量增加，药物释放速率出现缓慢下降趋势，原因可能为PEO N-10水化后形成高黏度凝胶体系，阻碍了药物扩散与释药孔中的药物释放过程。助推层中，随着高相对分子质量PEO WSR-303用量增加，释放速率逐渐加快，当用量达到临界值后，释放速率不再显著提高。当PEO用量过高，过大的膨胀推力易导致包衣膜破裂，破坏控释体系稳定性。因此，PEO型号选择和用量优化需兼顾控释效果、制剂稳定性和生产成本。

包衣工艺参数存在显著交互作用，直接影响包衣成型质量。喷液量过大、雾化气压偏低或物料温度过低，会导致包衣液堆积、干燥不完全，引发包衣膜粘连；喷液距离过远、雾化气压过大、物料温度过高，可能导致包衣液提前干燥，形成脆硬衣膜，诱发衣膜变白、开裂等现象。

低相对分子质量PEO水化后可形成较高黏度的凝胶，能够维持含药层药物颗粒的均匀分散状态，避免药物沉降聚集，因此常作为渗透泵片含药层助悬剂；高相对分子质量PEO具备优异的水化膨胀性能，可在片芯内部形成稳定渗透压驱动力，是助推层的核心功能辅料。氯化钠、甘露醇、乳糖、蔗糖等促渗剂可在片芯内部建立并维持稳定的渗透压差，促进介质持续渗入片芯，为药物平稳释药提供动力支撑^［8-9］。

本研究单因素考察的参数水平均基于预实验结果及课题组渗透泵制剂制备中的经验设定，参考制剂研究常用单因素考察方法，各因素设置高、中、低3个水平开展筛选^［15］。单因素实验操作简便、结果直观、重复性好，适用于处方工艺的初步筛选^［16］，但该方法忽视了多因素间的交互作用，优化结果存在局限性，难以得到全局最优参数组合。为克服单因素实验的局限，本研究在单因素筛选基础上采用正交实验^［17］优化核心片芯处方，方差分析结果显示三因素间交互作用无统计学意义。后续可采用响应面法进一步优化处方工艺参数，提升制剂性能。

本研究仅完成了柿叶总黄酮双层泵控释片的基础处方工艺筛选与优化，研究存在一定局限性。后续研究中应开展体内药代动力学实验、体内外释药相关性研究，结合体内释药特征优化处方工艺参数，完成中试放大生产与制剂稳定性考察，为该制剂的临床应用提供实验依据。

综上所述，本研究成功制备了具有零级释药特征的柿叶总黄酮双层泵控释片，通过单因素实验与正交实验完成了处方工艺优化，确定了最优制剂处方与制备参数。优化后的制剂12 h内释药平稳、释放完全，体外控释性能良好，但其体内释药行为、生物利用度及长期稳定性仍需进一步深入研究。

参考文献

[1] 刘茜茜. 柿叶清肺止咳、凉血止血、活血化瘀药效研究［D］. 郑州：河南中医药大学，2023：9-10．

[2] 国家药典委员会. 中华人民共和国药典：2025年版：一部［M］. 北京： 中国医药科技出版社， 2025： 1528-1529.

[3] 李楚源，贝伟剑，刘昌孝，等. 脑心清片防治脑动脉硬化研究进展［J］. 药物评价研究，2010，33（4）：296-301．

[4] Li Chuyuan， Bei Weijian， Liu Changxiao，et al. Advances in studies on prevention and treatment for cerebral arteriosclerosis of Naoxingqing Pellet［J］. Drug Evaluation Research，2010，33（4）：296-301．

[5] 董静宇，王闻渤，刘洋，等. 槲皮素与器官缺血再灌注损伤研究进展［J］. 药学前沿，2025，29（3）：506-515．

[6] Dong Jingyu， Wang Wenbo， Liu Yang，et al. Research progress on quercetin and organ ischemia/reperfusion injury［J］. Frontiers in Pharmaceutical Sciences，2025，29（3）：506-515．

[7] 何晨，田茜，贺敬霞，等. 柿叶总黄酮固体分散体口腔崩解片处方的优化［J］. 中成药，2017，39（12）：2513-2517．

[8] He Chen， Tian Qian， He Jingxia，et al. Formulation optimization for orally disintegrating tablets of solid dispersions of total flavonoids from Diospyros kaki leaves［J］. Chinese Traditional Patent Medicine，2017，39（12）：2513-2517．

[9] 韩伟，方琳，张玲贞，等. 柿叶黄酮分散片的处方优化及质量控制［J］. 哈尔滨商业大学学报：自然科学版，2022，38（4）：387-391．

[10] Han Wei， Fang Lin， Zhang Lingzhen，et al. Prescription optimization and quality control of Persimmon Leaf Flavone Dispersible Tablets［J］. Journal of Harbin University of Commerce： Natural Sciences Edition，2022，38（4）：387-391．

[11] 梁宇红，陈丽，吴钢，等. 柿叶黄酮缓释片的制备及其释放度测定［J］. 中成药，2013，35（10）：2134-2137．

[12] Liang Yuhong， Chen Li， Wu Gang，et al. Preparation and release in vitro of Persimmon Leaf Total Flavones Sustained-release Tablets containing chitosan［J］. Chinese Traditional Patent Medicine，2013，35（10）：2134-2137．

[13] Lin W， Li Y， Shi Q，et al. Preparation and evaluation of Bilayer-core Osmotic Pump Tablets contained topiramate［J］. PLoS One，2022，17（2）：e0264457．

[14] Liu S R， Lin W， Xie X Y，et al. Formulation development and evaluation of Push-pull Osmotic Pump Bi-layered Tablets for phencynonate HCl in the treatment of motion sickness［J］. Pharm Dev Technol，2025，30（2）：220-232．

[15] 曾媛，朱兰琼，郭真君，等. 盐酸地芬尼多双层渗透泵片的制备及处方优化［J］. 中国药师，2018，21（10）：1750-1755．

[16] Zeng Yuan， Zhu Lanqiong， Guo Zhenjun，et al. Preparation and formula optimization of Diphenidol Hydrochloride Push-pull Osmotic Pump Tablets［J］. China Pharmacist，2018，21（10）：1750-1755．

[17] 李江，杨星钢，荆恒攀，等. 星点设计-效应面法优化银杏叶总黄酮双层渗透泵控释片处方［J］. 中草药，2014，45（12）：1702-1708．

[18] Li Jiang， Yang Xinggang， Jing Hengpan，et al. Optimization of Bi-layer Osmotic Pump Controlled Release Tablets of total flavonoids from Ginkgo Folium by central composite design-response surface methodology［J］. Chinese Traditional and Herbal Drugs，2014，45（12）：1702-1708．

[19] 尹朋朋，许俊博，刘茜英，等. 盐酸二甲双胍缓释片仿制药处方开发与体外溶出效果评价［J］. 中国药业，2025，34（3）：38-42．

[20] Yin Pengpeng， Xu Junbo， Liu Qianying，et al. Generic drug formulation development of Metformin Hydrochloride Extended-release Tablets and in vitro dissolution evaluation［J］. China Pharmaceuticals，2025，34（3）：38-42．

[21] 叶吴琦，左丁，张子豪，等. 卡托普利择时渗透泵片的处方优化［J］. 中国药房，2018，29（10）：1328-1332．

[22] Ye Wuqi， Zuo Ding， Zhang Zihao，et al. Formula optimization of Captopril Timing Osmotic Pump Tablets［J］. China Pharmacy，2018，29（10）：1328-1332．

[23] 罗昱澜. 柿叶中总黄酮的含量测定［J］. 华夏医学，2008，21（3）：433-434．

[24] Luo Yulan. Determination of total flavonoids in Diospyros leaves ［J］. Acta Medicinae Sinica，2008，21（3）：433-434．

[25] 周成林，张安杰，张太伦，等. 盐酸吗啡渗透泵片片芯促渗剂研究［J］. 中国药业，2024，33（9）：4-7．

[26] Zhou Chenglin， Zhang Anjie， Zhang Tailun，et al. Penetration enhancers of tablet core of Morphine Hydrochloride Osmotic Pump Tablets［J］. China Pharmaceuticals，2024，33（9）：4-7．

[27] 张玲玲，阙晓，蒲婷，等. 致孔剂及其用量对盐酸吗啡渗透泵片体外释放度的影响［J］. 中国药业，2024，33（17）：16-20．

[28] Zhang Lingling， Que Xiao， Pu Ting，et al. Effects of pore-forming agents and their dosage on the in vitro release of Morphine Hydrochloride Osmotic Pump Tablets［J］. China Pharmaceuticals，2024，33（17）：16-20．

[29] 袁曼，谢世孔，叶文君，等. 正交试验法优选复方黄栀连颗粒的提取工艺［J］. 西北药学杂志，2024，39（3）：77-81．

[30] Yuan Man， Xie Shikong， Ye Wenjun，et al. Optimization of the extraction process of Compound Huangzhilian Granules with orthogonal test［J］. Northwest Pharmaceutical Journal，2024，39（3）：77-81．

基金资助

湖南省自然科学基金科药联合基金项目(2022JJ80050)