流式细胞术检测HLA-C分子表达水平的影响因素探讨

摘要

目的 探讨流式细胞术检测HLA-C分子表达水平的影响因素。方法 收集2024年3—5月外周造血干细胞志愿捐献者CD34细胞计数检测后剩余的单采造血干细胞悬液标本共12例，分别探讨读取有核细胞不同数量(50万、5万、0.5万个)、加入红细胞裂解液及抗体的先后顺序不同、距离失效期时长不同的HLA-C抗体，对HLA-C表达水平检测结果的影响，并采用Student t检验分析组间差异显著性。结果 分别读取50万、5万、0.5万个有核细胞，3组数据组间HLA-C阳性细胞占比、平均荧光强度差异均无显著性(P>0.05);加入红细胞裂解液及抗体的先后顺序不同，对于HLA-C阳性细胞占比差异无显著性(P>0.05);但“先裂解红细胞再加抗体”的HLA-C MFI值显著低于“先加抗体再裂解红细胞”的MFI值(P<0.05);使用距失效期仍有24个月的HLA-C抗体所检出的阳性细胞占比及MFI值，显著高于距失效期仅剩有5个月的HLA-C抗体(P<0.05)。结论 本文探讨了流式细胞术检测HLA-C分子表达水平的影响因素，研究结果对规范HLA-C表达水平的实验操作、提高检测结果的准确性和可比性具有良好的参考和应用价值。

关键词

人类白细胞抗原(HLA) / HLA-C基因 / 表达水平 / 流式细胞术 / 平均荧光强度(MFI)