Bw.03的分子生物学研究及分子同源建模

摘要

目的 对1例ABO血型B亚型进行分子生物学研究，并对突变后的酶进行三维建模预测。方法 采用试管法及微柱凝胶法鉴定ABO表型；采用序列特异性引物聚合酶链反应(PCR-SSP)检测ABO血型基因，并对ABO基因第6、7外显子序列进行测序分析；通过Modeller10.4对糖基转移酶进行同源建模，应用PyMOL2.5.0软件进行分析。结果 先证者标本血清学正定型B抗原减弱，反定型存在抗-B;PCR-SSP检测结果显示存在B、O基因，测序结果显示在B基因第7外显子发生c.721 C>T突变，导致p.Arg241Trp。同源建模与野生型相比，Bw.03糖基转移酶(GT)结构局部发生改变，分子间作用力分析显示241位原有的3个氢键全部消失。结论 血型分子生物学检查有助于疑难血型的准确定型；同源建模能更直观的显示Bw.03 GT活性变弱的关键位点，分子间作用力分析能解释酶活性变弱的根本原因。

关键词

Bw血型 / 分子生物学 / 同源建模 / 分子间作用力分析