负载aPexos和EGCG的可溶微针用于大鼠烫伤伤口愈合的研究

摘要

目的 采用负载人工血小板外泌体（artificial platelet-derived exosomes, aPexos）的甲基丙烯酰化壳聚糖（Chitosan Methacryloyl, CSMA）作为针体材料，负载表没食子儿茶素没食子酸酯（Epigallocatechin gallate,EGCG）的明胶和羧甲基壳聚糖（Carboxymethyl chitosan, CMCS）作为背衬材料制备微针，探究aPexos-EGCG微针在治疗烫伤伤口愈合的治疗效果以及作用机制。方法 采用超声和梯度超离的方式制备提取aPexos,使用纳米颗粒追踪分析（NTA）,透射电镜，ELISA试剂分别检测aPexos的浓度、形态及其生长因子TGF-β1,PDGF-BB,VEGF的含量。再将aPexos和EGCG分别负载在针体和背衬内，考察微针的针体形貌和机械性能。通过动物实验评价aPexos-EGCG微针应用于大鼠烫伤伤口愈合的效果。结果 aPexos的尺寸分布主要在50～150 nm,粒径为（132.7±3.8）nm,浓度为（2.88±0.36）×10¹³个/mL。TGF-β1浓度为（1 363.0±135.39）ng/mL,PDGF-BB浓度为（63.5±14.8）ng/mL,VEGF的浓度为（1 606.0±77.5）pg/mL。机械性能检测结果证明其具有足够的的机械强度刺穿皮肤角质层。大鼠烫伤伤口愈合实验结果显示，d3和d7 aPexos-EGCG微针组的伤口愈合率与对照组相比有统计学差异，分别是（47.64±12.5）%vs（18.11±6.40）%,（87.45±5.57）%vs（79.85±5.03）%（P<0.05）。HE和Masson染色显示aPexos-EGCG微针组可见更完整的表皮层，胶原沉积百分比高于对照组。免疫荧光染色结果显示，aPexos-EGCG微针组的M1型巨噬细胞的含量下降，M2型巨噬细胞含量上升，新生血管标志物CD31和α-SMA均表达上升，且与其它3组相比有统计学差异（P<0.05）。结论 aPexos-EGCG微针具有良好的机械性能，能够成功刺穿皮肤角质层并递送aPexos和EGCG,可调控创面的M1型和M2型巨噬细胞的比例并抑制炎症反应，有效地促进大鼠烫伤伤口的愈合，为组织修复领域提供一种新的思路。

关键词

人工血小板外泌体 / 表没食子儿茶素没食子酸酯 / 烫伤创面 / 可溶微针 / 组织修复