利用PacBio三代测序技术鉴定1例B/O血型嵌合体

摘要

目的 利用PacBio三代测序技术对1例ABO血型正、反定型不符的患者标本进行检测，以明确其血型，探讨血清学方法与分子生物学方法在确定嵌合体血型中的应用。方法 血型血清学试验方法；PCR基因扩增ABO基因第1～7号外显子并进行Sanger法测序；PacBio三代测序技术对标本进行ABO基因全长测序及单倍型分析；短串联重复序列（short tandem repeat, STR）分型。结果 患者血型血清学结果疑为B亚型（正定型抗-B:2+mf）;Sanger测序结果显示ABO基因第6外显子c.261delG,为ABO^*O.01.01纯合型。PacBio三代测序结果显示该患者基因型为ABO^*O.01.01/ABO^*O.01.01及低比例的ABO^*B.01。STR检测结果显示患者20个STR位点中有9个位点显示出3～4种分型，证实其为嵌合体。结论 该患者为B/O血型嵌合体。低比例的ABO^*B.01嵌合是导致血清学抗-B混合视野的真正原因。PacBio三代测序技术不仅可以确定ABO基因单倍型还可以检出低比例ABO血型中基因嵌合。

关键词

ABO正反不符 / 嵌合体 / Sanger法测序 / PacBio三代测序技术 / 血型血清学