脐血造血干细胞体外培养巨核系的CD36基因表达研究

摘要

目的 阐明体外培养巨核细胞的CD36基因表达量及转录子结构。方法 以脐血CD34⁺造血干细胞为起点，利用不同细胞因子组合体外定向培养巨核系。分别提取0 d、7 d、12 d培养的总细胞，以及14 d、18 d培养后CD41a分选的巨核细胞RNA。以RNA-NGS测序技术分析5个培养期的RNA基因表达谱，并进一步分析CD36基因表达情况。结果 TPO（100 ng/mL）组的培养体系产生的巨核细胞数量[（2.2±0.02）×10～6/mL]明显高于其他5组，5个培养期的RNA中共检测到22 066个表达基因，各时间点的基因表达量与培养时序呈相关性。CD36基因表达随培养时间呈上升趋势，14 d和18 d的巨核系CD36表达量FPKM值分别为18.35和101.85,远低于巨核系ITGA2B和ITGB3基因而略高于CD109基因表达。18 d的巨核系CD36最长转录子为3.8 kb,包含外显子E3～E14全部及E15部分序列。结论 首次报道了体外培养巨核系中CD36基因表达量及转录子结构，为CD36基因在巨核系的表达及其调控研究提供基础数据。

关键词

CD36 / 巨核系 / 血小板 / 基因表达