中国人群常见的RHAG^*808A变异型等位基因携带者红细胞RhAG蛋白、RhD和RhCE抗原表达的分析

摘要

目的 通过体内和体外表达研究，探索中国人群中常见的RHAG^*808A变异等位基因对RhAG蛋白、RhD和RhCE血型抗原表达的影响。方法 针对KMxD数据库中发现的1个分布频率较高的RHAG基因错义突变（c.808G>A,p.Val270Ile）,采用Polyphen-2和Provean软件进行生物信息学分析；随后采用高分辨熔解曲线（high resolution melting, HRM）方法，筛查携带该突变的先证者，采用流式细胞术检测其红细胞表面RhAG蛋白、RhD及RhCE抗原表达；同时构建RHAG野生型及突变型表达载体，转染HEK 293T细胞进行体外表达试验，通过流式细胞术分析该突变对于RhAG蛋白、RhD及RhCE抗原表达的影响。结果 polyphen-2和Provean软件分别提示RhAG氨基酸变异（p.Val270Ile）可能为有害或中性变异；在广州地区999例无偿献血者中，筛查到RHAG^*808A突变型等位基因纯合携带者4例，杂合携带者99例，该等位基因分布频率为5.4%（107/1 998）;RHAG^*808A变异型等位基因纯合携带者、杂合携带者与野生型个体红细胞表面RhAG蛋白、RhD和RhCE抗原表达无统计学差异，体外表达结果与以上结果一致。结论 我国人群常见的RHAG^*808A变异型等位基因对红细胞表面RhAG蛋白、RhD和RhCE抗原的表达没有影响，应该属于人群多态性位点。

关键词

RHAG突变 / 体外表达 / Rh血型抗原