血小板对5种常见致病菌抗菌效果的比较分析

摘要

目的 比较分析血小板对MRSA、SE、SA、E.coli和CRKP 5种临床常见致病菌的抗菌效果，并对因DCD敏感性差异导致抗菌效果不同进行初步探索分析。方法 使用相同数量的血小板建立血小板和血小板裂解物分别与5种致病菌的共培养体系，通过观察菌液浊度、测定菌液OD_{600 nm}值和菌落计数，评价血小板和血小板裂解物对5种致病菌的抗菌效果；收集血小板与MRSA共培养后的上清蛋白进行定量蛋白质组学分析，探索血小板发挥抗菌功能的重要抗菌蛋白；使用ELISA法检测血小板和血小板裂解物分别与5种致病菌共培养后上清中的DCD含量，初步分析血小板对5种致病菌抗菌效果不同的原因。结果 分别相比于对照MRSA、SA和SE,血小板和血小板裂解物分别与MRSA、SA和SE共培养12 h后，菌液浊度出现降低，且OD_{600 nm}值和菌落计数均显著降低（P<0.05）,此后至24 h菌落计数保持不变；相比于对照E.coli组，血小板和血小板裂解物分别与E.coli共培养组的菌液浊度无明显变化，但OD_{600 nm}值出现降低（P<0.05）,菌落计数降低至10～8 CFU/mL（P>0.05）;而相比于对照CRKP组，血小板和血小板裂解物分别与CRKP共培养组的菌液浊度、OD_{600 nm}值和菌落计数均无明显变化（P>0.05）;蛋白组学结果显示，与MRSA共培养后，血小板活化相关的重要蛋白：胶原蛋白、纤维蛋白原、血管性血友病因子、整合素αⅡbβ3、血小板糖蛋白Ⅴ和Ⅳ均发生显著上调；ELISA检测结果显示，与5种致病菌共培养后，血小板可分泌大量的DCD,且分泌的DCD含量均在3μg/mL左右。结论 血小板对革兰氏阳性菌MRSA、SA和SE的抗菌效果要优于对革兰氏阴性菌E.coli和CRKP抗菌效果，且血小板对MRSA的抗菌效果最好；血小板对5种致病菌的抗菌效果差异可能与DCD抗菌肽对5种致病菌的敏感性有关。

关键词

血小板抗菌 / 血小板活化 / 皮离蛋白 / 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 / 革兰氏阳性菌 / 革兰氏阴性菌