cisAB(c.796A>C)等位基因鉴定及其转移酶的分子对接

孔永奎; 王书亚; 靳慧芳; 王静; 郑露; 龚艳杰; 杨乾坤

doi:10.13303/j.cjbt.issn.1004-549x.2025.10.015

中国输血杂志 ›› 2025, Vol. 38 ›› Issue (10) : 1395 -1402. DOI: 10.13303/j.cjbt.issn.1004-549x.2025.10.015

cisAB(c.796A>C)等位基因鉴定及其转移酶的分子对接

孔永奎, 王书亚, 靳慧芳, 王静, 郑露, 龚艳杰, 杨乾坤

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摘要

目的通过1例cisAB亚型先证者及其家系的研究，揭示cisAB（p.Met266Leu）转移酶的分子生物学机制。方法选取1例男性新生儿为研究对象。采用试管法鉴定先证者及其家庭成员的ABO血型，并对先证者及部分家庭成员进行PCR-SSP检测、ABO基因测序和单克隆分析，家系调查明确其亚型基因在家族中的遗传方式，同源建模分析氨基酸变异对转移酶结构的影响，分子对接展示转移酶的双功能活性及供受体结合构象。结果血清学显示先证者及其父亲抗-H增强、奶奶正反不符。先证者测序结果与A1.01相比存在c.297A>G、c.526C>G、c.657C>T、 c.703G>A、c.803G>C、c.930G>A杂合变异（与B.01相比，缺少c.796C>A变异，也即存在c.796A>C变异）和c.261delG,结合单克隆分析确定先证者基因型为ABO^*cisAB（c.796A>C）/ABO^*O.01.01,父亲基因型为ABO^*cisAB（c.796A>C）/ABO^*O.01.02,奶奶基因型为ABO^*cisAB（c.796A>C）/ABO^*B102。家系分析表明该cisAB（c.796A>C）等位基因遗传自父亲和奶奶而非自然变异。同源建模显示cisAB（p.Met266Leu）转移酶Leu266侧链朝向和分子间作用力发生改变，分子对接表明变异后的酶活性中心“结合口袋”既能容纳UDP-GalNAc,又能容纳UDP-Gal, cisAB酶结构上具有双功能活性。结论该例cisAB（p.Met266Leu）双功能酶活性与核苷酸c.796A>C的变异有关，分子对接表明该酶具有A/B糖供体的双亲性。