密山兴凯湖湿地豆雁格氏乳球菌的分离鉴定及药物敏感性分析

摘要

为明确中俄边境密山兴凯湖湿地候鸟携带格氏乳球菌的实际情况,从而为候鸟相关疫病的防控工作提供临床层面的参考依据,该研究于该湿地范围内采集了50份豆雁的新鲜粪便样本。样本经PBS缓冲液稀释后,分别接种于LB固体培养基和血液琼脂培养基上,培养24 h后挑取单菌落进行分离纯化;通过革兰氏染色、生化鉴定、药敏实验及16S rRNA基因PCR扩增鉴定菌种,测序结果经BLAST比对后,用DNA Star软件分析序列同源性,Mega 11.0软件构建系统进化树以明确菌株遗传进化关系,最后开展小鼠致病性实验。实验结果显示,分离菌为革兰氏阳性菌,呈蓝紫色双列或短链排列;生化鉴定结果显示,该分离菌赖氨酸、鸟氨酸、氨基酸碱基对呈阳性;16S rRNA基因PCR扩增出1 415bp的目的条带,测序后上传至NCBI获得基因登录号:PQ726422。16S rRNA基因系统进化树结果显示,该序列与格氏乳球菌16S rRNA基因序列(KP317697.1和MG016446.1)处于同一分支,表明分离菌为格氏乳球菌;对分离菌进行药敏实验,结果显示,分离菌对头孢氨苄、万古霉素、强力霉素等13种药物表现为敏感;对头孢唑林、头孢哌酮2种药物表现为中介;对氯霉素、阿奇霉素、头孢他啶等5种药物表现为耐药。药敏结果表明,分离菌对一些抗生素具有一定耐药性,并对小鼠具有一定的致病性。该实验从密山兴凯湖湿地豆雁粪便中分离出具有耐药性的格氏乳球菌,为密山兴凯湖湿地豆雁肠道菌群的深入研究提供了参考。

关键词

密山 / 兴凯湖 / 豆雁 / 格氏乳球菌 / 分离鉴定 / 耐药性