基于银纳米簇与磁性微球-适配体偶联物的赭曲霉毒素A检测方法研究

摘要

赭曲霉毒素A （ochratoxinA,OTA）作为一种强毒性真菌毒素,对人体健康存在重大危害,但目前仍缺乏用于食品中OTA检测的高灵敏、高选择性、简便低成本的方法。针对这一技术空白,该研究构建了一种基于银纳米簇与磁性微球—适配体偶联物的OTA荧光适配体传感器。在无OTA存在时,生物素适配体与银模板杂交形成双链结构并结合于磁性微球（magneticbeads,MBs）,经磁分离后,上清液中无游离单链银模板,因此无法与银离子反应生成银纳米簇（silver nanoclusters,AgNCs）;然而,当体系中存在OTA时,由于G-四链体的稳定性高于适配体与银模板形成的双链结构,靶向OTA的生物素适配体（biotin-aptamer-OTA,Biotin-Apt-OTA）会与OTA特异性结合,进而折叠形成G-四链体,同时释放出游离的单链银模板。体系中OTA浓度不同,磁分离后上清液中游离单链银模板的含量也存在差异,其与银离子反应生成的AgNCs荧光强度随之不同,且所生成的AgNCs具有强红色荧光特性。基于上述原理,该OTA适配体传感器展现出优异的高选择性,且检测限低至0.27 ng/mL （R²=0.991）。该方法无需昂贵试剂与高端仪器,且无需专业操作人员,成功实现实际食品基质中OTA的精准定量检测,为食品中OTA等真菌毒素的防控提供了良好应用前景。

关键词

磁性微球 / 银纳米簇 / 无标记荧光适配体传感器 / 赭曲霉毒素A