重组人附睾特异蛋白BDFx的优化表达与纯化

王敏强; 朱庆凯; 张成林; 王海燕; 李建远

doi:10.13951/j.cnki.37-1213/n.2009.03.002

烟台大学学报（自然科学与工程版） ›› 2009, Vol. 22 ›› Issue (3) : 176 -179. DOI: 10.13951/j.cnki.37-1213/n.2009.03.002

重组人附睾特异蛋白BDFx的优化表达与纯化

王敏强, 朱庆凯, 张成林, 王海燕, 李建远

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摘要

通过改变异丙醇-β-D硫代半乳糖苷诱导浓度、诱导温度及诱导培养时间,优化含重组人附睾特异蛋白BDFx工程菌的表达条件.运用DEAE阴离子与CM阳离子交换层析及S-100分子筛层析纯化重组蛋白,用基质辅助激光解吸离子化-飞行时间质谱法、SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳、紫外扫描等方法鉴定目的蛋白.结果显示,缩短诱导培养时间、降低IPTG浓度等可提高重组蛋白的表达量,表明适当提高诱导表达温度不会形成包涵体,并可缩短表达时间.