中华补血草金属硫蛋白基因的克隆及高盐处理下的表达模式分析

摘要

以中华补血草叶片为材料,提取其总RNA并反转录cDNA,并以cDNA为模板,克隆得到包含该基因完整开放阅读框的cDNA序列,序列分析表明,该基因开放阅读框长249 bp,编码82个氨基酸;该蛋白含有14个半胱氨酸,主要分布在蛋白质的N端和C端,呈CC,CX,CXXC形式排列.预测该蛋白分子质量为8 133.1 D;等电点为4.72;35～48位和52～68位氨基酸间有2个较强的疏水区.用3%NaCl处理补血草植株0、12、244、8、72h,利用半定量-PCR技术对该基因在盐胁迫下表达模式的分析表明,在3%NaCl处理条件下,随着盐处理处理时间的延长该基因的表达量逐渐升高,在盐处理48 h时表达量最高,之后其表达量出现下降.

关键词

中华补血草 / 金属硫蛋白 / 基因克隆 / 表达模式 / 序列分析

基金资助

山东省自然科学基金资助项目(Y2007D16); 国家自然科学基金资助项目(30870199); 中国农业大学植物生理学与生物化学国家重点实验室开放课题基金资助项目(SKLPPBKF09008); 烟台大学博士基金资助项目(HY07B16)