大鼠肝脏葡醛酸转移酶活性测定的显色光度法研究

柴媛媛; 王芳; 于红; 许卉

doi:10.13951/j.cnki.37-1213/n.2012.04.016

烟台大学学报（自然科学与工程版） ›› 2012, Vol. 25 ›› Issue (4) : 316 -320. DOI: 10.13951/j.cnki.37-1213/n.2012.04.016

大鼠肝脏葡醛酸转移酶活性测定的显色光度法研究

柴媛媛, 王芳, 于红, 许卉

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摘要

在探讨显色反应机理的基础上,对以2-氨基酚为底物测定葡醛酸转移酶(UGTs)活性的显色光度法进行了优化.结果表明,在控制反应条件下,过量的底物本身并不发生显色反应,而其葡醛酸结合代谢物2-氨基酚葡醛酸苷可发生重氮-偶氮化反应,在540nm波长处有最大吸收,且吸光度与代谢物浓度成正比.因此,可以具有相同发色团的苯胺为标准,根据标准曲线计算UGTs的酶活性.2-氨基酚葡醛酸苷在0.5～8μmol/L范围内线性良好,r>0.999(n=6),吸光度值可在显色完全后40 min内保持稳定.应用本法测定了雄性SD大鼠肝微粒体及S9组分的UGTs活性,结果分别为0.704 nmol·min-1·mg-1和0.177 nmol·min-1·mg-1.该方法测定条件的可控性好,操作简便,结果准确可靠,适用于临床前动物药代实验研究中UGTs活性的常规评价.