PIK3CA基因功能性点突变细胞系的构建和鉴定

郭晓娜; 李劲风; 胡宗风; 朱伟; 李小鹏

doi:10.13951/j.cnki.37-1213/n.210317

烟台大学学报（自然科学与工程版） ›› 2022, Vol. 35 ›› Issue (3) : 301 -307. DOI: 10.13951/j.cnki.37-1213/n.210317

PIK3CA基因功能性点突变细胞系的构建和鉴定

郭晓娜, 李劲风, 胡宗风, 朱伟, 李小鹏

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摘要

为揭示人乳头瘤病毒(Human papillomavirus, HPV)阳性及阴性头颈癌中PIK3CA突变的致癌分子机制，研发针对PIK3CA突变癌症的靶向药物。通过CRISPR/Cas9系统介导的同源重组机制获得HPV16阳性和阴性人永生化角质形成细胞PIK3CA H1047R功能性点突变细胞系，对该点突变细胞系的研究表明，PIK3CA H1047R突变细胞系已构建完成。Western Blot结果表明，基因编辑后的细胞系能够正常表达PIK3CA编码蛋白；RT-PCR测序结果显示，点突变基因能够正常表达；同时，相比于永生化不成瘤细胞，突变后的细胞具有成瘤性并且增殖速度明显加快。功能性点突变细胞系的获得，为进一步揭示PIK3CA突变的致癌分子机制，研发针对PIK3CA突变肿瘤的靶向药物提供理论基础。