芍药苷通过影响EGFR/RhoA通路在非小细胞肺癌A549细胞中的抗肿瘤活性

摘要

目的:探究基于生信靶点和基础实验研究芍药苷(PF)对人非小细胞肺癌细胞(A549)的潜在抗肿瘤活性机制。方法:分别采用CCK-8实验、平板克隆实验、细胞划痕实验及流式细胞术实验检测PF对NSCLC细胞系A549生长、迁移和凋亡的影响；利用SwissTargetPrediction、PharmMapper和ChEMBL数据库检索PF的相关靶点，通过GeneCards、DisGeNET和OMIM数据库中检索NSCLC的靶点，使用STRING和DAVID数据库进行蛋白质-蛋白质分析与富集分析，运用SYBYL软件对排名前10靶点对应的蛋白质与PF进行分子对接，应用Western blot检测PF对p-AKT和p-EGFR和RhoA蛋白表达。结果:CCK-8和平板克隆实验表明PF能有效抑制肺癌细胞生长。50μmol/L和100μmol/L的PF在24 h对A549细胞的迁移率分别为22.89%、13.78%,低于空白组的55.85%(P<0.05)。PF在24 h对A549细胞的凋亡率高于对照组(P<0.05)。基因靶点预测与验证结果显示：PF与NSCLC的核心靶点为32个，对NSCLC富集分析发现，包含PI3K-AKT、MAPK、Ras、Rap1、雌激素、FoxO和VEGF信号通路等7条潜在作用通路。分子对接结果显示，与PF作用排名前三的蛋白质分别为RhoA、AKT和EGFR。与对照组相比，PF干预A549细胞后p-AKT和p-EGFR和RhoA的表达水平降低，差异有统计学意义(P<0.05)。结论:PF可能通过调控EGFR/RhoA通路抑制非小细胞肺癌A549细胞生长、迁移并促进其凋亡。

关键词

芍药苷 / 非小细胞肺癌 / 抗癌机制 / EGFR/RhoA信号通路

基金资助

四川省德阳市重点研发项目(2022SZ043;2023SZZ111;2023SZZ115)