猪δ冠状病毒感染猪树突状细胞及对免疫因子分泌能力的影响

摘要

以猪树突状细胞(porcine dendritic cells, pDCs)为模型，探究猪δ冠状病毒(porcine deltacoronavirus, PDCoV)是否能够对pDCs进行有效感染及对抗病毒细胞因子分泌的影响。采集猪外周抗凝血，分离获得猪外周血单核细胞，经白细胞介素-4(interleukin-4,IL-4)和集落刺激因子(granulocyte-macrophage colony stimulating factor, GM-CSF)诱导培养获得未成熟树突状细胞，利用倒置显微镜和透射电镜观察其生物学形态，通过蛋白质免疫印迹和激光共聚焦试验检测病毒是否可以对pDCs进行感染，qRT-PCR检测抗病毒因子IFN-α和ISG56的表达。结果显示，成功分离培养得到具有典型树突状细胞形态的pDCs,将PDCoV接种至分离培养得到的pDCs中，PDCoV可以有效感染，可以在pDCs中进行复制并产生感染性的子代病毒颗粒，病毒滴度达到4.4 lgTCID_(50)/0.1 mL。同时检测PDCoV感染pDCs时对抗病毒因子表达的影响，结果表明，在病毒感染pDCs后48 h产生了高水平的IFN-α和ISG56。本研究成功诱导培养得到pDCs,首次证实PDCoV可以在体外感染pDCs,并在细胞中进行有效地复制，pDCs在病毒感染后促进IFN-α、ISG56的分泌来发挥抗病毒免疫效应，为后续研究PDCoV的致病机制提供了新的思路。

关键词

猪δ冠状病毒 / 猪树突状细胞 / 病毒感染 / 抗病毒因子