猪轮状病毒TaqMan荧光定量检测方法的建立及初步应用

摘要

为了对早期猪轮状病毒(porcine rotavirus, PoRV)感染情况进行监测，根据GenBank中已有的A型PoRV VP6序列，设计2对引物和荧光定量探针，建立了TaqMan荧光定量RT-PCR方法，并对该方法特异性、灵敏性和重复性进行评价。结果显示所建立的TaqMan荧光定量RT-PCR方法特异性强、重复性好、灵敏度高，可检测到10~1拷贝/μL。经对2 366份腹泻仔猪的粪便样品进行检测，所建立的方法检出率(5.92%,140/2 366)高于常规RT-PCR(4.95%,117/2 366),两者的符合率为98.58%。结果表明，本研究建立的PoRV TaqMan荧光定量RT-PCR方法可用于猪轮状病毒病的临床检测。

关键词

猪轮状病毒 / TaqMan探针 / 荧光定量RT-PCR方法