菊苣酸对磷酰胺氮芥诱导巨噬细胞免疫抑制的调节作用

摘要

用3μmol/L磷酰胺氮芥(phosphoramide mustard, PM)诱导RAW264.7细胞24 h,建立体外细胞免疫抑制模型；给予不同剂量(25、50、100μmol/L)的菊苣酸(chicoric acid, CA)干预细胞24 h,考察CA对免疫抑制的调节作用。利用CCK-8法检测细胞活力，中性红吞噬法检测细胞吞噬能力，ELISA试剂盒测定细胞IL-1β和IL-6表达，NO含量测定试剂盒测定细胞NO水平，实时荧光定量PCR测定IL-1β、IL-6和iNOS mRNA的相对表达量。结果显示，3μmol/L PM诱导RAW264.7细胞24 h后，巨噬细胞活力与吞噬能力显著降低(P<0.05),NO、IL-1β与IL-6的表达以及相应的mRNA相对表达量均显著下降(P<0.05),巨噬细胞免疫抑制模型成功建立；给予不同剂量(25、50、100μmol/L)的CA干预24 h后，巨噬细胞活力与吞噬能力显著增强(P<0.05),巨噬细胞NO、IL-1β与IL-6分泌水平以及相应的mRNA相对表达量明显升高(P<0.05)。结果表明，PM可以有效建立体外巨噬细胞免疫抑制模型，CA可能通过增强巨噬细胞活力与吞噬能力，促进炎症因子表达发挥免疫增强作用，从而提高机体免疫功能。本研究建立体外巨噬细胞免疫抑制模型，探究CA对PM诱导RAW264.7细胞免疫抑制的调节作用，为将CA开发为新型兽用免疫增强剂提供了理论基础。

关键词

菊苣酸 / 磷酰胺氮芥 / 巨噬细胞 / 免疫抑制 / 免疫增强