肺炎克雷伯菌K7R噬菌体生物学特性及其抗性菌株的抗性机制

摘要

以肺炎克雷伯菌K7R为宿主菌分离得到1株长尾噬菌体vB＿KpnS＿ZH01(简称P-K7R),其最佳感染复数为0.01,潜伏期约为10 min,暴发量为169 PFU/cell,且具有稳定、良好的杀菌活性。全基因组测序结果显示，P-K7R全长为52 111 bp,共编码86个开放阅读框。经过诱导，获得P-K7R抗性菌K7R-5P,尽管K7R-5P和K7R在显微镜下菌株、菌落形态以及生长曲线无明显差异，但在两者转录组学水平上检测到ompC、ompF、N5、N102及N103五个差异基因。此外，K7R-5P与K7R对噬菌体在吸附率上有明显差异，K7R的吸附效率达到80%以上，而K7R-5P的吸附效率不足20%。最后，利用qRT-PCR对转录组学结果进行验证，结果显示K7R-5P的ompC基因表达量恢复之后，菌株对噬菌体P-K7R的抗性消失，表明ompC基因在噬菌体P-K7R吸附肺炎克雷伯菌过程中起着关键作用。结果表明，成功获得1株裂解性肺炎克雷伯菌噬菌体P-K7R并在体外探究了细菌对噬菌体K7R-5P产生抗性的机制，为噬菌体治疗的进一步高效应用奠定了基础。

关键词

肺炎克雷伯菌 / 噬菌体 / 噬菌体抗性 / 转录组学 / 吸附受体