基于HPLC-MS/MS技术的酮病奶牛血清脂质代谢物分析

摘要

对25头荷斯坦奶牛进行初次筛选，包含13头疑似酮病和12头疑似健康奶牛。依据临床症状和血液酮体浓度将其分为临床型酮病组(血液中BHBA≥3.0 mmol/L,NEFA> 0.5 mmol/L,且表现消瘦、食欲减退)及健康组(血液中BHBA<1.2 mmol/L,NEFA<0.4 mmol/L,临床检查无异常表现)。选取胎次相近、产奶量和体况相似的临床型酮病奶牛、健康奶牛各5头。采集奶牛全血到促凝管中，使用高效液相色谱-串联质谱法(high performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry, HPLC-MS/MS)检测酮病奶牛血清中的异常脂质分子。选取P<0.05,VIP>1的脂质分子。结果显示：共筛选出18个与酮病相关的差异代谢物，与健康组相比，酮病组其中有5种磷脂酰胆碱(phosphatidylcholine, PC)、4种胆固醇酯(cholesterol esters, CE)、2种鞘磷脂(sphingomyelin, SM)、2种溶血磷脂酰胆碱(lyso-phosphatidyl choline, LPC)、2种甘油三酯(triglyceride, TAG)降低；有3种游离脂肪酸(free fat acid, FFA)升高。结果表明，这些异常的脂质可能是酮病奶牛的新型标志物。

关键词

奶牛 / 围产期 / 酮病 / 脂质组学 / HPLC-MS/MS