绿原酸影响酮病奶牛乳腺细胞的CPT1A和SOCE的表达

摘要

运用荧光定量PCR和Western blot方法检测健康、酮病奶牛乳腺组织中肉碱棕榈酰转移酶1A(carnitine palmitoyltransferase 1a, CPT1A)及储存操作Ca~(2+)通道(store-operated Ca~(2+) entry, SOCE)通路相关分子Orai1、Orai3、STIM1和STIM2的表达水平；在体外乳腺细胞培养过程中，细胞处理分为对照组、BHBA组、CGA组、CGA+BHBA组。使用20 mg/L绿原酸(chlorogenic acid, CGA)刺激细胞12 h后用1.2 mmol/L BHBA刺激细胞24 h,运用荧光定量PCR和Western blot方法检测不同处理细胞中CPT1A及SOCE通路相关分子Orai1、Orai3、STIM1和STIM2的表达水平。结果显示，与健康奶牛相比，酮病奶牛乳腺组织中CPT1A的转录水平和表达水平均极显著降低(P<0.01),而Orai1、Orai3、STIM1和STIM2的转录水平和表达水平均显著升高(P<0.05)。与对照组相比，BHBA刺激降低了CPT1A的转录水平和表达水平(P<0.01),升高了Orai1、Orai3、STIM1和STIM2的转录水平和表达水平(P<0.05);与对照组相比，CGA组CPT1A、Orai1、Orai3、STIM1和STIM2的转录水平和表达水平无明显变化(P>0.05);与BHBA组相比，使用CGA和BHBA共同刺激使CPT1A的转录水平和表达水平升高(P<0.05),Orai1、Orai3、STIM1和STIM2的转录水平和表达水平降低P<0.05)。结果表明，绿原酸增加酮病奶牛乳腺细胞的CPT1A的表达并降低SOCE的表达。

关键词

SOCE / 绿原酸 / 氧化 / 酮病 / 奶牛