诃子鞣酸对LPS诱导的小鼠子宫内膜炎的保护作用

摘要

为探究诃子鞣酸(chebulagic acid, CA)对脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)诱导的小鼠子宫内膜炎的保护作用。本研究体外试验部分，使用MTT法检测CA对小鼠腹腔巨噬细胞活性的影响，通过ELISA和Westen blot分别检测CA对LPS刺激的巨噬细胞促炎性细胞因子(TNF-α、IL-1β和IL-6)分泌水平和ERK、p38和p65磷酸化水平的影响；体内试验部分，通过ELISA分析CA对LPS刺激后小鼠子宫组织TNF-α、IL-1β和IL-6分泌水平的影响，使用组织免疫荧光法检测小鼠子宫损伤相关因子(HMGB1)的表达水平，通过HE染色法观察小鼠子宫组织的病理变化，使用血常规法分析小鼠全血中白细胞数、中性粒细胞数和单核细胞数的变化。结果显示，CA质量浓度为12.5、25.0、50.0 mg/L对巨噬细胞活性均无显著影响，因此后续试验结果与CA的细胞毒性无关。CA可显著下调受到LPS刺激的巨噬细胞中的TNF-α,IL-1β和IL-6分泌水平，且具有浓度依赖性。此外，CA可显著下调受LPS诱导的巨噬细胞中ERK、p38和p65的磷酸化水平。CA可显著下调LPS刺激小鼠后子宫组织中TNF-α、IL-1β和IL-6的分泌水平；LPS刺激可增加小鼠全血中的白细胞数、中性粒细胞数和单核细胞数，而使用CA治疗可使其显著降低；相比于LPS刺激组，CA治疗组子宫组织中HMGB1的表达水平显著降低；LPS刺激小鼠子宫后导致子宫角出血和水肿，使用CA治疗后子宫角出血程度和水肿程度均有所降低。同时，HE病理切片显示LPS刺激组小鼠子宫组织中出现大量的嗜中性粒细胞浸润，子宫内膜上皮发生增生、水肿、坏死及脱落，CA(100 mg/kg)治疗后，子宫组织基本恢复正常，具有浓度依赖性。以上结果表明，CA可通过抑制小鼠腹腔巨噬细胞中MAPK和NF-κB通路的激活，下调巨噬细胞和子宫组织中炎症介质的表达水平从而减轻LPS诱导的小鼠子宫内膜炎。

关键词

子宫内膜炎 / 诃子鞣酸 / 脂多糖 / 炎症介质 / 炎症信号通路 / 高迁移率蛋白1 / 小鼠