捻转血矛线虫胰岛素样肽编码基因的鉴定、表达与组织定位

摘要

胰岛素样肽(insulin-like peptides, ILPs)在线虫新陈代谢、信号转导、发育进程等生物学过程中发挥重要作用，是控制动物寄生线虫感染的潜在靶标。为探究ILPs在寄生线虫发育与感染中的具体作用，对捻转血矛线虫(Haemonchus contortus,H.contortus)ILPs编码基因进行全基因组鉴定、序列和进化分析；通过实时荧光定量PCR方法检测H.contortus不同发育时期ILPs编码基因的转录水平；经原核表达ILPs重组蛋白用于多克隆抗体制备及Western blot分析；采用间接免疫荧光定位试验明确ILPs在H.contortus虫体不同发育阶段的组织分布情况。结果显示，与秀丽隐杆线虫(Caenorhabditis elegans)相比，H.contortus ILPs编码基因发生显著缩减，仅有3个具备拮抗性分子特性的ILPs编码基因；ILPs编码基因在H.contortus感染性三期幼虫阶段的转录水平最高；ILPs蛋白主要分布于感染性幼虫的肠道与皮下组织。本研究鉴定3个可能参与调控H.contortus幼虫发育进程及感染过程的拮抗性ILPs编码基因，为寄生线虫在宿主体内的滞育现象研究以及潜在干预靶标的筛选奠定了基础。

关键词

捻转血矛线虫 / 胰岛素样肽 / 原核表达 / 组织定位 / 发育调控 / 幼虫滞育