单增李斯特菌lmo2363基因缺失株的构建及其生物学特性

摘要

探究lmo2363基因在单增李斯特菌分离株LM83-1抗胁迫过程中的功能。本研究以分离株LM83-1为亲本株，利用重叠延伸PCR和同源重组技术，构建单增李斯特菌lmo2363基因缺失株和回补株，比较野生株、缺失株和回补株在不同胁迫环境下的生长能力、应激存活率以及生物被膜形成能力。结果显示，成功构建了单增李斯特菌lmo2363基因缺失株和回补株；生长曲线测定结果显示，在4℃、7%NaCl、10%NaCl、3.5%乙醇、4.0%乙醇和pH5胁迫条件下缺失株的生长能力比野生株LM83-1弱（P<0.001）;应激存活试验结果表明，在pH3和10 mmol/L H₂O₂应激处理1 h后，缺失株的存活率显著低于野生株（P<0.010）;生物被膜形成能力测定结果显示，与野生株相比，缺失株的生物被膜形成能力下降（P<0.050）。结果表明，lmo2363基因介导单核细胞增生性李斯特菌（Listeria monocytogenes,LM）对低温、高渗透压、乙醇和酸胁迫环境的适应以及影响LM生物被膜的形成。本试验结果为进一步探究lmo2363基因在单增李斯特菌抗胁迫过程中的功能奠定了基础。

关键词

单增李斯特菌 / lmo2363基因 / 生物被膜 / 抗胁迫