诃子鞣酸通过MAPK/NF-κB通路调控LPS诱导的奶牛子宫内膜组织炎症反应的作用

摘要

分离并体外培养奶牛子宫内膜组织，用1.0 mg/L脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)刺激1 h后与诃子鞣酸(Chebulagic acid, CA)(12.5、25.0、50.0、100.0 mg/L)共培养，然后收集不同处理组的奶牛子宫内膜组织进行试验。应用ELISA和实时荧光定量PCR法检测TNF-α、IL-6、IL-1β的蛋白分泌水平和基因表达水平；HE染色观察奶牛子宫内膜组织损伤程度；应用免疫荧光技术鉴定高迁移率蛋白-1(high mobility grope boxprotein 1,HMGB-1)、透明质酸酶结合蛋白-2(hyaluronidase binding protein 2,HABP-2)的表达；Western blot检测ERK、p65和IκBα的磷酸化表达水平。结果显示，经CA处理LPS诱导的奶牛子宫内膜组织炎症反应模型后，TNF-α在6、24 h和IL-6在6、12、24 h的蛋白分泌水平显著下降，IL-1β和IL-6在6、9、12 h和TNF-α在6 h的基因表达水平均显著下调；HE染色切片发现，LPS+CA组相比LPS组均有所改善，上皮细胞脱落程度减轻，腺体和血管结构较为完整，炎性细胞浸润程度降低，无明显的坏死或出血；LPS+CA组也显著下调了HMGB-1和HABP-2的表达；LPS+CA组的ERK、IκBα和p65的磷酸化水平显著降低。结果表明，CA能够通过抑制LPS诱导的奶牛子宫内膜组织炎症反应中MAPK和NF-κB通路的激活，下调其奶牛子宫组织中炎症因子的表达水平从而减轻LPS诱导的奶牛子宫内膜组织炎症反应。由此推断，CA可能是一种潜在的奶牛子宫内膜炎的治疗药物，值得进一步的研究和开发。

关键词

奶牛子宫内膜炎 / 奶牛子宫内膜组织 / 诃子鞣酸 / 脂多糖 / 炎症因子 / 信号通路