肠炎沙门菌eutR基因缺失株的构建及其部分生物学特性的鉴定

摘要

利用同源重组的方法成功构建了肠炎沙门菌eutR基因缺失株，通过对其生化特性、运动性、抵御体外应激作用以及在RAW264.7细胞内存活能力等方面进行研究。结果显示，肠炎沙门菌eutR基因缺失株生化特性和运动能力较肠炎沙门菌野生型没有明显变化；肠炎沙门菌eutR基因缺失株抵御酸、碱和抗氧化能力显著降低，而抵御热的能力无显著变化；eutR基因缺失株在RAW264.7细胞内存活能力较野生型显著降低。为了进一步分析eutR基因对肠炎沙门菌毒力因子表达的影响，利用SYBR Green法检测缺失株与野生株invH、ssav、ssrA、xthA、orf245、sodC、lrp、mrr1和hflk等毒力基因的相对表达水平，研究发现肠炎沙门菌eutR基因缺失株的上述毒力因子的表达较野生株均显著下调。经动物试验对肠炎沙门菌eutR基因缺失株进行LD50测定，结果显示eutR基因缺失株的LD₅₀高于野生型，表明eutR基因可影响沙门菌的毒力。本研究阐明了eutR基因对肠炎沙门菌在巨噬细胞内存活能力、部分生物学特性及毒力的影响，为肠炎沙门菌基因工程减毒疫苗开发提供新的基因敲除靶标。

关键词

肠炎沙门菌 / eutR基因 / 生物学特性 / 毒力因子