基于自噬调控探讨解毒通络调肝方对SD大鼠胰岛细胞保护的作用机制

摘要

观察解毒通络调肝方基于自噬调控保护2型糖尿病SD大鼠胰岛细胞的作用机制。8周龄SD雄性大鼠，高脂饲料喂养4周后联合链脲佐菌素40 mg/kg单次腹腔注射诱导2型糖尿病大鼠动物模型，中药组予解毒通络调肝方低剂量(1.5 g·kg^-1·d^-1)、中剂量(4.5 g·kg^-1·d^-1)及高剂量(13.5 g·kg^-1·d^-1),西药组予盐酸二甲双胍(0.15 g·kg^-1·d^-1)。连续灌胃4周，检测各组大鼠空腹血糖、糖化血清蛋白、甘油三酯、胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、游离脂肪，ELISA法检测空腹血清胰岛素并计算胰岛素抵抗指数，进行葡萄糖耐量试验。取SD大鼠胰腺组织，HE染色，免疫组织化学法检测Beclin-1、LC3蛋白的表达，Western blot法检测Beclin-1、LC3、P62蛋白的表达，RT-PCR法检测Beclin-1、LC3RNA的表达。结果显示，解毒通络调肝方及盐酸二甲双胍组均有较好的降糖及降脂效果（P<0.05,P<0.01）。胰腺组织HE染色显示，结构紊乱，边界不清，排列不规则，胞浆少，胰岛内细胞质染色变浅或呈空泡化现象，在解毒通络调肝方及盐酸二甲双胍组中明显改善。自噬调控方面，运用免疫组织化学法、Western blot法、RT-PCR法检测，解毒通络调肝方及盐酸二甲双胍组对自噬标志蛋白Beclin-1及LC3表达均较模型组显著上升（P<0.01）;降低P62蛋白表达（P<0.05,P<0.01）。结果证明，解毒通络调肝方可有效缓解2型糖尿病SD大鼠体质量下降趋势，改善多饮情况，具有较好地改善糖、脂代谢的作用，并且可缓解2型糖尿病SD大鼠胰腺组织病理结构的损害保护胰岛细胞，其作用可能是通过调控自噬水平实现的。

关键词

2型糖尿病 / 解毒通络调肝方 / 自噬 / 胰岛细胞